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上海GingisREXIdeS蛋白酶

來(lái)源: 發(fā)布時(shí)間:2024-06-10

大多數(shù)商業(yè)zhiliao性抗體屬于IgG類(lèi),在Fc結(jié)構(gòu)域中含有N-聚糖。一個(gè)重要的關(guān)鍵質(zhì)量屬性是糖基化曲線,因?yàn)樗鼤?huì)影響穩(wěn)定性、溶解度、藥效學(xué)和藥代動(dòng)力學(xué)特性。這種翻譯后修飾可能發(fā)生在生物工藝開(kāi)發(fā)和制造過(guò)程中,因此需要密切監(jiān)測(cè)。Genovis的FabRICATOR(IdeS)酶已成為一種被接受的快速表征單克隆抗體(mAb)的分析工具。FabRICATOR在鉸鏈下方消化IgG,產(chǎn)生F(ab')2和Fc/2片段。單個(gè)FabRICATOR消解位點(diǎn)和質(zhì)量譜的后續(xù)精度使Fc糖基化譜能夠檢測(cè),從而可以監(jiān)測(cè)批次間的一致性和其他關(guān)鍵質(zhì)量屬性。用于表征zhiliao用途的單克隆抗體、Fc融合蛋白、ADC和生物仿制藥。上海GingisREXIdeS蛋白酶

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與IdeS不同,Genovis的GingisKHAN(Kgp)是一種半胱氨酸蛋白酶,可在鉸鏈上方的單個(gè)位點(diǎn)(KSCDK/THTCPPC)消化人IgG1,產(chǎn)生完整且均質(zhì)的Fab和Fc片段。GingisKHAN是一種賴(lài)氨酸特異性蛋白酶。單一的消化位點(diǎn)是人IgG1三維結(jié)構(gòu)的結(jié)果,使這種賴(lài)氨酸暴露于酶中。如果去除N-聚糖,則Fc上暴露的賴(lài)氨酸處可能會(huì)出現(xiàn)額外的消化位點(diǎn)。GingisKHAN需要溫和的還原條件才能具有活性,并且在37°C和pH8下獲得活性。還原劑(2mM半胱氨酸)與酶一起提供。GingisKHAN是從牙齦卟啉單胞菌中純化的。該酶用于使用LC-MS表征基于抗體的生物zhiliao藥物,研究Fc聚糖分析、雙特異性抗體、親和力和親和力效應(yīng),并鑒定翻譯后修飾。上海GingisREXIdeS蛋白酶Genovis提供IdeS蛋白酶色譜柱,使得抗體消化和亞基生成的自動(dòng)化使生物反應(yīng)器的在線監(jiān)測(cè)應(yīng)用成為可能。

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Genovis是一家瑞典生物技術(shù)公司,自2010年起,為生物制藥公司提供SmartEnzymes工具酶。Genovis提供一系列獨(dú)特、快速且易于使用的酶學(xué)工具,主要用于生物制藥行業(yè)和學(xué)術(shù)界。我們?cè)谌蚍秶鷥?nèi)提供創(chuàng)新的智能酶SmartEnzymes?,用于單克隆抗體、ADC、生物仿制藥和雙特異性生物藥物的開(kāi)發(fā)、生產(chǎn)和質(zhì)量控制。您可以在我們的網(wǎng)站上“Application頁(yè)面”獲得更多應(yīng)用信息,如果您有興趣,可以和我們一起做一個(gè)“SmartStories”,也可以聯(lián)系我們。

Genovis酶的適應(yīng)性和更高的通量和自動(dòng)化工作流程的中級(jí)方法,這是非常重要的。 隨著分析方法和儀器的改進(jìn),在表征實(shí)驗(yàn)室中有更大的能力進(jìn)行更多類(lèi)型的分析,或者在工藝開(kāi)發(fā)或QC實(shí)驗(yàn)室中有更先進(jìn)的分析儀器。 當(dāng)涉及到能夠支持大量樣本分析的活動(dòng)時(shí),例如克隆篩選,工藝開(kāi)發(fā)和驗(yàn)證以及穩(wěn)定性研究,這是非常好的。 此外,Genovis產(chǎn)品的效率、健壯性(Robust)和易用性使它們更容易應(yīng)用于這些類(lèi)型的工作,而且,也適用于受控環(huán)境中的批次放行方法。Genovis的產(chǎn)品很好地支持這種類(lèi)型的工作,這也促使Genovis不斷推出新產(chǎn)品和現(xiàn)有產(chǎn)品的不同形式,以支持客戶(hù)的工作。人IgA1比IgA2具有更長(zhǎng)的富含O-聚糖且更靈活的鉸鏈區(qū)域。

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Genovis的FabRICATOR Fab2 (IdeS)試劑盒可消化兔 IgG,但要在親和步驟中捕獲 Fc 片段,您需要另一種填料,而不是試劑盒中通常包含的 CaptureSelect? Fc。如果您對(duì)處理兔IgG感興趣,請(qǐng)聯(lián)系Genovis團(tuán)隊(duì),我們將在FabRICATOR Fab2試劑盒中提供與兔Fc相容的樹(shù)脂色譜柱。使用FabRICATOR的抗體消化的簡(jiǎn)單性、速度和可重復(fù)性也意味著這種酶可以被用于質(zhì)量控制應(yīng)用。 QC方法需要執(zhí)行簡(jiǎn)單,易于訓(xùn)練,高度可重復(fù),數(shù)據(jù)易于分析,這正是您使用FabRICATOR所得到的。 因?yàn)樗m用于一系列不同的IgG,這也意味著使用FabRICATOR進(jìn)行QC工作的客戶(hù)將能夠在未來(lái)的產(chǎn)品中使用它。 這顯示了這種酶在抗體消化中是多么的有效。FabRICATOR MagIC磁珠含有Ides固定化酶專(zhuān)為自動(dòng)化平臺(tái)(振動(dòng)臺(tái))而設(shè)計(jì)。北京GlySERIASIdeS蛋白酶

Genovis的FabRICATOR(IdeS) MagIC 以較少的用戶(hù)交互減少實(shí)驗(yàn)和操作時(shí)間。上海GingisREXIdeS蛋白酶

對(duì)于涉及完整Fab或Fc抗體片段的應(yīng)用,需要在抗體鉸鏈處進(jìn)行消化。木瓜蛋白酶和 Lys-C 等傳統(tǒng)酶可用于生成 Fab 片段,但非特異性酶活性需要仔細(xì)優(yōu)化,以極大限度地降低多個(gè)消化位點(diǎn)的風(fēng)險(xiǎn)。Genovis的SmartEnzymes IgG 蛋白酶 GingisKHAN 和 FabALACTICA 具有一個(gè)消化位點(diǎn),可從人 IgG1 生成均質(zhì)的 Fab 和 Fc 抗體片段。生成的片段可用于結(jié)晶和高階結(jié)構(gòu) (HOS) 的 NMR 研究、結(jié)合研究等。在這里,我們提出了獲得完整Fab和Fc抗體片段的不同策略。所得片段顯示 GingisKHAN 的有效消化,用于生成完整的 Fab 片段或從依那西普上的融合 TNFR 結(jié)構(gòu)域中分離 Fc。由于 GingisKHAN 的特異性消化依賴(lài)于 IgG 的天然折疊,因此在變性條件下特異性受到負(fù)面影響。為了使用SDS-PAGE分析消解效率,在加入SDS上樣緩沖液之前,停止在分析樣品中加入碘乙酰胺的反應(yīng)。Genovis同時(shí)提供IdeS酶的純化試劑盒。上海GingisREXIdeS蛋白酶

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