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人血小板裂解液保存溫度

來源: 發(fā)布時間:2021-10-12

凍融循環(huán)后的穩(wěn)定性:對所有的血小板裂解液不建議反復(fù)凍融超過3次(包括初始解凍),次數(shù)過多會形成較多的碎片沉淀,影響性能,因此建議***次解凍時即進(jìn)行分裝。Sexton進(jìn)行了內(nèi)部研究,以檢查經(jīng)歷反復(fù)凍融循環(huán)的hPL的穩(wěn)定性。雖然數(shù)據(jù)是使用Stemulate作為測試血清收集的,但基于產(chǎn)品的相似成分和相似的放行規(guī)范標(biāo)準(zhǔn),測試結(jié)果同樣適用于nLivenPR和T-LivenPR。Sexton建議單瓶的hPL產(chǎn)品經(jīng)歷不超過三個冷凍/解凍循環(huán),包括初始解凍。內(nèi)部數(shù)據(jù)顯示,在經(jīng)過多達(dá)三個冷凍/解凍循環(huán)時,pH、滲透壓、總蛋白或細(xì)胞生長沒有顯著變化。然而,需要注意的是,單個單位hPL所經(jīng)歷的凍融循環(huán)次數(shù)越多,碎片形成的發(fā)生率就越高。建議客戶在其培養(yǎng)基產(chǎn)品中遇到碎片問題時盡可能減少冷凍/解凍循環(huán)次數(shù)。此外,建議需要三次以上冷凍/解凍循環(huán)的客戶在初次解凍時進(jìn)行分裝。國產(chǎn)的血小板裂解液好用么?人血小板裂解液保存溫度

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本發(fā)明涉及細(xì)胞生物學(xué)領(lǐng)域,特別涉及一種血小板裂解液的制備方法及其應(yīng)用,用于替代動物來源的血清,為間充質(zhì)干細(xì)胞擴(kuò)增和生產(chǎn)提供的營養(yǎng)。該制備方法包括:將血小板在20~24℃振蕩保存1~5d,采用反復(fù)凍融法和超聲法進(jìn)行處理,離心,收集上清液,去除纖維蛋白,獲得血小板裂解液.本發(fā)明提供的血小板裂解液的制備方法可明顯提高血小板裂解液中細(xì)胞因子含量,且可進(jìn)行細(xì)胞因子的定量平衡,有利于減少產(chǎn)品批間的差異,可達(dá)到穩(wěn)定的促進(jìn)人源性細(xì)胞生長的作用。血小板裂解液使用說明血小板裂解液和胎牛血清,各自有利弊,只是這些年大家對血小板裂解物的熱情比較高漲。

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前述所說的生長因子大多存在于血小板內(nèi)部的α顆粒中,當(dāng)血小板被活化后會產(chǎn)生脫顆粒作用(即血小板的α顆粒會和細(xì)胞膜融合),進(jìn)而釋放大量活化的生長因子。而人源血小板裂解物就是直接將人類來源血小板細(xì)胞經(jīng)過連續(xù)的反復(fù)凍融裂解后,進(jìn)一步提純這些血小板脫顆粒的商品;人源血小板裂解物除了擁有比富血小板血漿更高的生長因子濃度,更用特殊工藝去除了細(xì)胞碎片,大幅降低了使用過程中的免疫原性。

人源血小板裂解物的使用方式非常方便簡單,在培養(yǎng)基中添加5%血小板裂解物,混合均勻后即可直接用來培養(yǎng)間充質(zhì)干細(xì)胞,且在傳代過程中不需要預(yù)包被培養(yǎng)皿。適合應(yīng)用在多種來源的間充質(zhì)原代干細(xì)胞培養(yǎng)過程呦!

Sextonh的PL血小板裂解液產(chǎn)品接收時處于干冰運(yùn)輸?shù)睦鋬鰻顟B(tài)。收到hPL產(chǎn)品后,建議客戶立即將產(chǎn)品儲存在-20°C的環(huán)境中。Sexton有數(shù)據(jù)支持運(yùn)輸期間短時間的干冰保存對產(chǎn)品性能(包括pH值、滲透壓、總蛋白和細(xì)胞生長)沒有顯著影響。Sexton hPL產(chǎn)品的解凍應(yīng)按照Sexton產(chǎn)品說明文件中的建議使用37°C水浴進(jìn)行。Sexton不建議使用4°C冰箱或室溫解凍方法,因?yàn)檫@些做法尚未經(jīng)過測試或作為任何內(nèi)部驗(yàn)證的一部分。已知使用冰箱或室溫解凍會導(dǎo)致更高水平的纖維蛋白/纖維蛋白原碎片,并可能導(dǎo)致產(chǎn)品性能下降。37°C水浴是Sexton用于所有批次放行測試的內(nèi)部解凍方法,也是與Sexton hPL產(chǎn)品相關(guān)的所有驗(yàn)證的解凍方法。血小板裂解液的添加比例是多少?

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由于在臨床中對血小板單元的需求而供體有限,因此使用新鮮的血小板單元來產(chǎn)生血小板裂解液引起了關(guān)注。過期的血小板單位可能是另一種來源,因?yàn)橛凶C據(jù)表明可以使用從過期單位獲得的血小板而不會影響終產(chǎn)品的質(zhì)量。在一個擁有380萬居民的意大利地區(qū),2014年生產(chǎn)了大約100,000個來自單一捐贈者的血沉棕黃層單位。其中約60%在有效期后被丟棄。考慮到50ml的平均血沉棕黃層體積,使用過期的血沉棕黃層單位可以生產(chǎn)約3000L的血小板裂解液。血小板裂解液在使用前一定要了解其使用方法。達(dá)優(yōu)血小板裂解液的正確使用方法

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ELAREM Prime人血小板裂解液是面向未來需求的先進(jìn)的細(xì)胞培養(yǎng)解決方案。基于人血小板的經(jīng)濟(jì)實(shí)惠的細(xì)胞生長促進(jìn)劑可實(shí)現(xiàn)從動物血清添加劑到無異種細(xì)胞培養(yǎng)條件的簡單轉(zhuǎn)換。每批ELAREM  Prime均由大量血小板單位生產(chǎn),以比較大限度地減少批次間的差異。ELAREM Prime支持細(xì)胞擴(kuò)增,無需批間測試即可提供一致的試驗(yàn)結(jié)果。ELAREM Prime只供體外實(shí)驗(yàn)和研究使用(RUO),該產(chǎn)品不適合直接用于人類或動物用途。有關(guān)安全預(yù)防措施,請參閱相應(yīng)的SDS。推薦用于與FBS相比,ELAREM Prime人血小板裂解液支持間充質(zhì)干細(xì)胞(MSC)的細(xì)胞生長性能,而不會丟失表型。非靈長類細(xì)胞系的體外繁殖和維持需要根據(jù)具體情況進(jìn)行測試和優(yōu)化。人血小板裂解液保存溫度

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