該實(shí)驗(yàn)的目的是對(duì)比單**小板裂解液與乏血小板血漿對(duì)成纖維細(xì)胞及在促進(jìn)傷口愈合的作用。方法概述如下:?jiǎn)?*小板制備血小板裂解液和乏血小板血漿,用于大鼠原代皮膚成纖維細(xì)胞,以5%或者10%的濃度處理細(xì)胞,24 h之后檢測(cè)細(xì)胞增殖率,細(xì)胞周期,并且使用Transwell方法檢測(cè)細(xì)胞遷移.取皮器建立大鼠皮膚缺損模型,分別以血小板凝膠,血漿和生理鹽水處理傷口,2d換藥,8d后計(jì)算傷口愈合率,石蠟切片HE染色,Q-PCR方法分析不同愈合組織的差異。如何選擇血小板裂解液?血小板裂解液反復(fù)凍融
間充質(zhì)間質(zhì)細(xì)胞(MSCs)體外擴(kuò)增的培養(yǎng)基一般添加胎牛血清FBS,但是考慮到異種ganran及免疫反應(yīng)的風(fēng)險(xiǎn),監(jiān)管機(jī)構(gòu)并不鼓勵(lì)使用。人血小板裂解液除了不存在異種免疫反應(yīng)或牛病原體ganran的風(fēng)險(xiǎn),有助于增強(qiáng)間充質(zhì)干細(xì)胞的擴(kuò)增,也相對(duì)容易地根據(jù)良好的生產(chǎn)規(guī)范程序生產(chǎn),并已用于臨床應(yīng)用,因此現(xiàn)如很多資料顯示血小板裂解液已被證明是擴(kuò)增MSCs一種非常有效的FBS替代方法(參考文獻(xiàn)1)。 血小板裂解液由血漿組成,含有纖維蛋白原和凝血因子,對(duì)于一般細(xì)胞培養(yǎng)中涉及的含鈣培養(yǎng)基來(lái)說(shuō)通常需要加入抗凝劑(常用肝素、Rivaroxaban利伐沙班、argatroban阿加曲班等)來(lái)防止凝膠形成,其中肝素很為常用。Merck血小板裂解液反復(fù)凍融血小板裂解液的血源從哪里來(lái)?
ELAREM Prime血小板裂解液是一款基于人血小板的高性?xún)r(jià)比的細(xì)胞培養(yǎng)添加劑,為細(xì)胞提供了無(wú)動(dòng)物源血清的培養(yǎng)環(huán)境,但是維持相同的細(xì)胞生長(zhǎng)效果。ELAREM Prime血小板裂解液來(lái)源于輸血級(jí)的血小板,具有穩(wěn)定的貨源供應(yīng),而無(wú)需像FBS一樣依賴(lài)于屠宰行業(yè),確保了平穩(wěn)的價(jià)格和安全的細(xì)胞培養(yǎng)條件。ELAREM Prime生產(chǎn)于無(wú)菌條件下大量混合的血小板單位,批次和批次間的穩(wěn)定性保證了可重復(fù)的實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù),無(wú)需像FBS一樣進(jìn)行批次間實(shí)驗(yàn)檢測(cè)。ELAREM Prime支持學(xué)術(shù)研究,工業(yè)生產(chǎn)以及體外診斷行業(yè)中的細(xì)胞體外擴(kuò)增應(yīng)用。其中的生長(zhǎng)因子組分增強(qiáng)不同細(xì)胞類(lèi)型和細(xì)胞系的繁殖和維持。
現(xiàn)在咱們已經(jīng)了解到肝素對(duì)于血小板裂解液使用濃度優(yōu)化的必要性,小編繼續(xù)福利大放送,現(xiàn)給大家?guī)?lái)德國(guó)PL Bioscience公司的ELAREM系列的高性?xún)r(jià)比人源血小板裂解物,據(jù)說(shuō)有不到千元便可買(mǎi)到50ml的XENO-FREEN無(wú)動(dòng)物源MSCs細(xì)胞培養(yǎng)補(bǔ)充劑hPL,用戶(hù)根據(jù)自己的實(shí)驗(yàn)需求選擇需要添加肝素版本和不需要添加肝素版本。并且考慮到用戶(hù)從科研到臨床的過(guò)渡需求,我們曼博生物為各位用戶(hù)提供各種研究級(jí)、GMP/臨床級(jí)的hPL以支持學(xué)術(shù)研究、工業(yè)生產(chǎn)以及體外診斷行業(yè)中的細(xì)胞擴(kuò)增應(yīng)用。國(guó)產(chǎn)的血小板裂解液好用么?
相比之下,我們開(kāi)發(fā)了一個(gè)專(zhuān)有的制造工藝,使我們的血小板裂解液可使用電子束處理。重要的是經(jīng)輻照的產(chǎn)品被發(fā)現(xiàn)保存了輻照前的產(chǎn)品功效,圖顯示了未經(jīng)處理的hPL(Stemulate)和電子束處理的hPL(nLivenPR)和伽馬處理的FBS對(duì)細(xì)胞增殖的影響。骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞的生長(zhǎng)在模擬或***中生長(zhǎng),始終顯示與傳統(tǒng)方法相比,維持細(xì)胞的穩(wěn)健擴(kuò)張,輻照FBS的生長(zhǎng)速度要慢得多。A-MSCs結(jié)果類(lèi)似結(jié)果,已經(jīng)為我們的許多客戶(hù)已過(guò)渡到輻照版本的血小板裂解液。血小板裂解液為什么要使用肝素?Helios血小板裂解液protocol
人源血小板裂解液是無(wú)動(dòng)物源血清培養(yǎng)補(bǔ)充劑,能在細(xì)胞培養(yǎng)時(shí)提供細(xì)胞生長(zhǎng)所需動(dòng)力。血小板裂解液反復(fù)凍融
通過(guò)BODIPY染色的脂肪滴來(lái)反映的成脂分化情況,發(fā)現(xiàn)兩種肝素UFH和LMWH在高濃度時(shí),分化成脂細(xì)胞的百分比明顯降低。同樣的,通過(guò)茜素紅染色的磷酸鈣沉淀分析成骨分化情況,高濃度肝素也降低了成骨分化的百分比,特別是在脂肪組織來(lái)源的MSCs中,UFH肝素高濃度對(duì)成脂和成骨分化誘導(dǎo)的負(fù)面影響較為明顯?;谏鲜鼋Y(jié)果,我們現(xiàn)在知道血小板裂解液中添加的抗凝劑肝素在體外MSCs擴(kuò)增的必要性,在購(gòu)買(mǎi)血小板裂解液后,用戶(hù)應(yīng)結(jié)合自己的實(shí)驗(yàn)條件去合理的選擇合適的肝素濃度,而肝素濃度的選擇應(yīng)該在有效防止含血小板裂解液培養(yǎng)基凝膠形成的基礎(chǔ)上盡量降低,以減少肝素對(duì)于MSCs的增殖能力、成纖維細(xì)胞體外集落形成單位(CFU-F)、MSCs體外分化等的影響。血小板裂解液反復(fù)凍融
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