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天津垂直輪PEI轉染試劑官方代理

來源: 發(fā)布時間:2025-02-10

瞬時轉染方法:1.接種細胞:轉染前一晚,用膠原酶(WORTHINGTONG公司LS004196)消化細胞并計數(不建議用胰酶)。調整細胞濃度,將細胞鋪入細胞培養(yǎng)的器皿,每個孔置入的細胞量應能使轉染時細胞匯合度達到70~80%。2.準備DNA-PEI復合物:DNA、PEI試劑和稀釋劑在進行以下步驟前需先使其升至室溫。,用Opti-MEMITM(Invitrogen)或其他適合的無蛋白培養(yǎng)基稀釋適量DNA。用同樣的培養(yǎng)基稀釋PEI試劑。每1μgDNA需用1.5-5μL線性PEI轉染試劑。一邊輕輕渦旋裝有DNA溶液的試管,一邊將稀釋的線性PEI轉染試劑滴加至試管中(注意:請勿顛倒添加順序)。充分混勻后,室溫靜置10~25min以形成DNA-PEI復合物。當溶液體積較大時,請用圓底聚丙烯管,例如NEST5mL/14mL離心管。3.轉染細胞:直接向每個孔中加入DNA-PEI復合物并輕輕渦旋培養(yǎng)板/培養(yǎng)皿。在無血清條件下轉染時,去除生長培養(yǎng)基,替換成無血清培養(yǎng)基,然后滴DNA-PEI復合物。轉染1.5h后,添加?體積的包含30%血清的生長培養(yǎng)基。4.孵育細胞和分析結果:在CO2培養(yǎng)箱中37℃下孵育細胞至可以分析檢測。轉染后5h即可檢測到轉入基因的表達。請自行確定適合檢測時間。如想申請試用裝,請關注公眾號:Mine-bio,回復“申請PEI”,即可參加!PEI轉染試劑適用于針對293和CHO細胞的瞬時轉染。天津垂直輪PEI轉染試劑官方代理

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對于某些類型的細胞如HEK-293、HEK293T、NIH/3T3和COS細胞,在轉染前兩天鋪板可顯著提高轉入基因的表達水平。如果選擇轉染前兩天鋪板,可適當降低鋪板密度,以確保轉染時細胞的匯合度仍為70~80%。2.對于接觸抑制敏感的細胞,可適當降低鋪板密度。3.即使在有蛋白(如10%的血清)存在的情況下,DNA-PEI復合物仍能轉染細胞,但是DNA-PEI復合物必須在無蛋白存在的條件下形成。我們推薦使用Opti-MEMITM培養(yǎng)基以達到*轉染效率。其他的無蛋白培養(yǎng)基則需測試與線性PEI轉染試劑的兼容性。更多Polysciences PEI轉染試劑等相關產品信息,歡迎咨詢上海曼博生物!如想申請試用裝,可關注我們的公眾號:Mine-bio,后臺回復關鍵詞“PEI申請”參加活動山東全球PEI轉染試劑官方代理PEI轉染試劑在使用時出現沉淀的原因是什么?

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抗體藥物研發(fā)客戶提供小眾創(chuàng)新產品,包括從Researchgrade到cGMP等級的無動物源培養(yǎng)基質,轉染試劑、病毒轉導試劑、基因編輯工具等產品和定制服務,支持ATMP(AdvanceTherapyMedicinalProducts)藥物研發(fā)從R&D到Clinicaltrial以及后期商業(yè)化的無縫轉化;以及提供藥物開發(fā)和探索的抗體文庫定制和商業(yè)授權靈活的CHO工程細胞株以支持抗體藥物的商業(yè)化生產,以此希望幫助國內科研工作者快速地接觸世界范圍內的技術,分享研發(fā)工具進步帶來的技術紅利,終為細胞、基因產業(yè)以及再生醫(yī)學行業(yè)等乃至整個生命科學行業(yè)賦能!更多關于PEI轉染試劑相關產品問題,歡迎咨詢上海曼博生物!

PEIMAX——高產工業(yè)化轉染試劑-高度濃縮,可制備大量轉染試劑Polysciences轉染試劑系列是基于聚乙烯亞胺(Polyethylenimine,PEI)的產品,因其較高的轉染效果,已廣泛應用于工業(yè)化生產。聚乙烯亞胺是一種具有較高的陽離子電荷密度的有機大分子,每相隔二個碳原子,即每“第三個原子都是質子化的氨基氮原子,使得聚合物網絡在任何pH下都能充當有效的“質子海綿”(protonsponge)體。PEI可用作轉染試劑,它可以縮聚DNA分子形成顆粒并轉染真核細胞。PEIMAX40K是由Polysciences出品的全合成線性聚乙烯亞胺瞬時轉染試劑。PEIMAX是一款高度濃縮的粉劑,大量科學家選擇PEIMAX,在內部自行制備低成本高效益的PEI轉染試劑。多年以來,經過眾多業(yè)內人士評審的公開研究和出版文獻表明,在HEK293、CHO和Sf9系統(tǒng)中可獲得很高的轉染效率,在重組抗體和病毒載體生產中穩(wěn)定性高,可靠性強。PEIMAX提供從96孔板到200L生物反應器持續(xù)的高基因表達細胞體系,實現從新藥研發(fā)到工業(yè)化生產的輕松過度。而且與大多數細胞轉染方案相比,使用PEIMAX至少可降低40%轉染成本(部分案例可降低90%轉染成本)。更多PEI MAX相關產品信息,歡迎咨詢上海曼博生物!用PEI轉染時,一般和DNA的比例是多少?

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材料:質粒DNA指數生長的真核細胞PEI(聚乙烯亞胺)1×HBS(pH7.4)配方:PEI儲存液(100μM):稱取125mgPEI粉末溶解于50ml1×HBS(pH7.4)中,0.2μm濾膜過濾,儲存于4℃?zhèn)溆谩?×HBS(pH7.4):將8.76gNaCl溶解于900ml超純水,加入20ml1M的HEPES,調pH值到7.4,定容至1L,過濾(0.2μm濾膜)后儲存于4℃?zhèn)溆?。方法?.細胞分盤:通過胰酶消化收集細胞,用適當的完全培養(yǎng)基以4×105至8×105細胞/cm2的密度平鋪細胞于60mm組織培養(yǎng)皿上(根據實驗需要選擇培養(yǎng)皿,使細胞貼壁后所占總面積達到培養(yǎng)皿面積的70-90%)。根據細胞貼壁情況于含5%CO2的37℃溫箱中孵育8-24h,當細胞貼壁完全后即可開始轉染。轉染前換入2mL預熱的無血清培養(yǎng)基。更多產品信息,歡迎咨詢上海曼博生物!PEI轉染試劑是一種陽離子聚合物轉染試劑。重慶細胞擴增PEI轉染試劑

PEI轉染試劑是一種高分子化學類轉染試劑.天津垂直輪PEI轉染試劑官方代理

上海曼博生物醫(yī)藥科技有限公司成立于2019年,依托于集團公司泉心泉意深厚的資源和超過400家國內客戶群體,生命科學領域一站式供應鏈體系,以及高風險生物危險材料進出口平臺的優(yōu)勢,曼博生物嚴格篩選國際創(chuàng)新且經過同行驗證過的產品和技術,引入中國市場,開發(fā)、孵育和推廣,致力于將全球創(chuàng)新產品和前沿技術帶入中國,集中在為細胞/基因領域、/免疫,抗體藥物研發(fā)客戶提供小眾創(chuàng)新產品,包括從Researchgrade到cGMP等級的無動物源培養(yǎng)基質,轉染試劑、病毒轉導試劑、基因編輯工具等產品和定制服務,支持ATMP(AdvanceTherapyMedicinalProducts)藥物研發(fā)從R&D到Clinicaltrial以及后期商業(yè)化的無縫轉化。更多關于Polysciences PEI相關產品問題,歡迎咨詢上海曼博生物!也歡迎關注我們的公眾號:Mine-Bio.天津垂直輪PEI轉染試劑官方代理

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