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價格昂貴,是構(gòu)成動物細胞培養(yǎng)對生產(chǎn)成本的主要部分之一。血清的質(zhì)量標準血清質(zhì)量高低取決于兩方面因素:一是取材對象,二是取材過程。用于取材的動物應健康無病并且在指定的出生天數(shù)之內(nèi),取材過程應嚴格按照操作規(guī)程執(zhí)行,制備出的血清要經(jīng)過嚴格的質(zhì)量鑒定。WHO公布的《用動物細胞體外培養(yǎng)生產(chǎn)生物制品規(guī)程》中的要求:1.牛血清必須來自有文件證明無牛海綿狀腦病的牛群或國家。并應具備適當?shù)谋O(jiān)測系統(tǒng)。2.有些國家還要求牛血清來自未用過反芻動物蛋白飼料的牛群。3.證明所用牛血清中不含對所生產(chǎn)疫苗病毒的***物。4.血清要通過濾膜過濾除菌,保證無菌。5.無細菌、霉菌、支原體和病毒的污染,有些國家要求無細菌噬菌體污染。6.對細胞有良好的支持繁殖作用。我國在對牛血清的質(zhì)量2000年版《中國生物制品主要原輔料質(zhì)控標準》中提出比較嚴格的標準要求。包括蛋白質(zhì)含量,細菌、***、支原體、牛病毒、大腸桿菌噬菌體、細菌內(nèi)***,支持細胞增殖檢查。培養(yǎng)基培養(yǎng)基配制編輯語音一、配制用水培養(yǎng)基的大部分是水,所以水的質(zhì)量直接影響培養(yǎng)基的質(zhì)量。按Waymouth標準,水的電阻應為200萬歐姆,一般實驗室里以玻璃蒸餾器制備的雙蒸水或三蒸水可以符合使用條件。取材過程應嚴格按照操作規(guī)程執(zhí)行,制備出的血清要經(jīng)過嚴格的質(zhì)量鑒定。長寧區(qū)個人臨床微生物檢驗培養(yǎng)基誠信互利
培養(yǎng)基制備基本方法編輯語音培養(yǎng)基配方的選定同一種培養(yǎng)基的配方在不同著作中常會有某些差別。因此,除所用的是標準方法,應嚴格按其規(guī)定進行配制外,一般均應盡量收集有關(guān)資料,加以比較核對,再依據(jù)自己的使用目的加以選用,記錄其來源。培養(yǎng)基的制備記錄每次制備培養(yǎng)基均應有記錄,包括培養(yǎng)基名稱,配方及其來源,和各種成份的牌號。**終pH值、消毒的溫度和時間制各的日期和制備者等,記錄應復制一份,原記錄保存?zhèn)洳椋瑥椭朴涗涬S制好的培養(yǎng)基一同存放、以防發(fā)生混亂。培養(yǎng)基成分的稱取培養(yǎng)基的各種成分必須精確稱取并要注意防止錯亂,**好一次完成,不要中斷。可將配方置于傍側(cè),每稱完一種成分即在配方上做出記號,并將所需稱取的藥品一次取齊,置于左側(cè),每種稱取完畢后,即移放于右側(cè)。完全稱取完畢后,還應進行一次檢查。培養(yǎng)基各成份的混合和溶化培養(yǎng)基所用化學藥品均應是化學純的。使用的蒸煮鍋不得為銅鍋或鐵鍋,以防有微量銅或鐵混入培養(yǎng)基中,使細菌不易生長。**好使用不銹鋼鍋加熱溶化,也可放入大燒杯或大燒瓶中置高壓蒸汽滅菌器或流動蒸汽消毒器中蒸煮溶化。在鍋中溶化時、可先用溫水加熱并隨時擾動,以防焦化、如發(fā)現(xiàn)有焦化現(xiàn)象、該培養(yǎng)基即不能使用。寶山區(qū)常規(guī)臨床微生物檢驗培養(yǎng)基服務費無細菌、霉菌、支原體和病毒的污染,有些國家要求無細菌噬菌體污染。
調(diào)整pH值到6。分裝,滅菌,備用。該培養(yǎng)基用于培養(yǎng)和保存靈芝、平菇、香菇等食用菌菌種。***的培養(yǎng)基在植物組織培養(yǎng)時,通過調(diào)節(jié)IAA和CTK的比值能影響愈傷組織分化出根或芽。CTK/IAA高時,愈傷組織分化芽。CTK/IAA低時,分化根;CTK/IAA比例適中維持愈傷組織不分化。愈傷組織誘導培養(yǎng)基制備以MS培養(yǎng)基母液為基礎(chǔ),向潔凈鋁鍋中順序加入大量元素20×母液100mL,微量元素100×母液20mL,鐵鹽100×母液20mL,維生素100×母液20mL,肌醇200×母液10mL,甘氨酸200×母液10mL,配制得MS培養(yǎng)基后,再加入·L-1的BA8mL,·L-1的NAA8mL。然后加入實際配制培養(yǎng)基體積約2/3-3/4的蒸餾水,加入40g蔗糖后攪拌使其溶化,用·L-1的NaOH和mol·L-1的HCl調(diào)整pH值至。加入14g瓊脂,將鋁鍋置于電爐上,攪拌加熱使瓊脂完全溶化,然后用蒸餾水定容至終體積2L,繼續(xù)加熱幾分鐘使之混合均勻后分裝于三角瓶中。******葉片愈傷組織誘導取一無菌培養(yǎng)皿,用解剖刀切取1-2片無菌苗葉片置于無菌培養(yǎng)皿中,并用解剖刀將葉片切成2mm2左右的小片,然后將其接種于準備好的培養(yǎng)基上,每瓶接種5小片,一共接種6瓶。接種后的三角平置于24條件下黑暗培養(yǎng)1周。
用于培養(yǎng)霉菌的加入蔗糖,用于培養(yǎng)酵母菌的加入葡萄糖),補足水分,分裝,滅菌,備用。把這培養(yǎng)基的pH值調(diào)到,配方中的糖,如用葡萄糖還可用來培養(yǎng)放線菌和芽孢桿菌。豆芽汁培養(yǎng)基黃豆芽100g,瓊脂15g,葡萄糖20g,水1000ml洗凈黃豆芽,加水煮沸30分鐘。用紗布過濾,濾液中加入瓊脂,加熱溶解后放入糖,攪拌使它溶解,補足水分到1000ml,分裝,滅菌,備用。把這培養(yǎng)基的pH值調(diào)到,可用來培養(yǎng)細菌和放線菌。豌豆瓊脂培養(yǎng)基豌豆80粒,瓊脂5g,水200ml瓊脂取80粒干豌豆加水,煮沸1小時,用紗布過濾后,在濾液中加入瓊脂,煮沸到溶解,分裝,滅菌,備用。食用菌菌種培養(yǎng)基馬鈴薯-蔗糖-瓊脂培養(yǎng)基20%馬鈴薯煮汁1000ml,蔗糖20g,瓊脂18g把馬鈴薯洗凈去皮后,切成小塊。稱取馬鈴薯小塊200g,加水1000ml,煮沸20分鐘后,過濾。在濾汁中補足水分到1000ml,即成20%馬鈴薯煮汁。在馬鈴薯煮汁中加入瓊脂和蔗糖,煮沸,使它溶解后,補足水分,分裝,滅菌,備用。使用該培養(yǎng)基對pH值要求不嚴格,可以不測定。綜合馬鈴薯培養(yǎng)基20%馬鈴薯煮汁1000ml,磷酸二氫鉀3g,硫酸鎂,葡萄糖20g,維生素10mg,瓊脂18g先配制20%馬鈴薯煮汁,方法同上。在煮汁中加入上述各種組分,加熱溶解后補足水分。有些國家還要求牛血清來自未用過反芻動物蛋白飼料的牛群。
應重新制備。待大部分固體成分溶化后,再用較小火力使所有成分完全溶化。迄至煮沸。如為瓊脂培養(yǎng)基,應先用一部分水將瓊脂溶化,用另一部分水溶化其它成分,然后將兩溶液充分混合。在加熱溶化過程中,因蒸發(fā)而丟失的水分,**后必須加以補足。培養(yǎng)基pH的初步調(diào)整培養(yǎng)基各成分完全溶解后,應進行pH的初步調(diào)正,因培養(yǎng)基在加熱消毒過程中、pH會有所變化,例如,牛肉浸液約可降低。而腸浸液pH卻會有***的升高。因此,對這個步驟,操作者應隨時注意探索經(jīng)驗、以期能掌握培養(yǎng)基的**終pH,保證培養(yǎng)基的質(zhì)量。pH調(diào)正后,還應將培養(yǎng)基煮沸數(shù)分鐘,以利培養(yǎng)基沉淀物的析出。培養(yǎng)基注意事項編輯語音培養(yǎng)基在使用前通過高壓或過濾滅菌。防止污染應該注意以下事項:確認工作細胞庫是否被污染,確認毒種工作種子批是否被污染,確認所用培養(yǎng)基及其添加成分(如小牛血清、NaHCO3等)是否被污染,均可用細菌、***及支原體無菌試驗來確認并排除。同時要對無菌試驗培養(yǎng)基的靈敏度進行驗證。實際生產(chǎn)中,可以從配制好的培養(yǎng)液中取少量加入營養(yǎng)瓊脂于恒溫培養(yǎng)箱內(nèi)培養(yǎng),48小時即可觀察有無污染。其它:高壓滅菌設(shè)備、過濾除菌設(shè)備均應進行驗證,確保滅菌和除菌效果。價格昂貴,是構(gòu)成動物細胞培養(yǎng)對生產(chǎn)成本的主要部分之一。黃浦區(qū)個人臨床微生物檢驗培養(yǎng)基基地
證明所用牛血清中不含對所生產(chǎn)疫苗病毒的***物。長寧區(qū)個人臨床微生物檢驗培養(yǎng)基誠信互利
其功能是使混合菌樣中的劣勢菌變成優(yōu)勢菌,從而提高該菌的篩選效率。酵母菌富集培養(yǎng)基葡萄糖5%,尿素,硫化銨,磷酸二氫鉀,磷酸氫二鈉,七水合硫酸鎂,七水合硫酸鐵,酵母膏,孟加拉紅,Ashby無氮培養(yǎng)基富集好氧自生固氮菌甘露醇1%,磷酸二氫鉀,七水合硫酸鎂,氯化鈉,二水合硫酸鈣,碳酸鈣培養(yǎng)基鑒別培養(yǎng)基編輯語音EMB培養(yǎng)基常用于鑒別蛋白胨10g,乳糖5g,蔗糖5g,磷酸氫二鉀2g,伊紅,美藍,蒸餾水1000g,2216E培養(yǎng)基配方分離海洋微生物的培養(yǎng)基配方蛋白胨5g,酵母膏1g,磷酸高鐵,瓊脂15-20g,陳海水1000ml,煮沸氫氧化鈉(5%)的溶液調(diào)pH值伊紅美藍培養(yǎng)基可用于檢測水中大腸桿菌的含量首先按以下組成配制基礎(chǔ)培養(yǎng)基。蛋白胨10g,NaCl5g瓊脂15-20g將上述物質(zhì)溶解后,用蒸餾水定容至1000mL,調(diào)節(jié)pH為。滅菌后,冷卻至60℃左右,再按下面的比例,在無菌操作條件下加入滅菌的乳糖溶液、伊紅水溶液以及美藍水溶液。搖勻后,立即倒平板。溶液中的乳糖在高溫下會破壞,因此一般使用壓力為70kPa、溫度為115℃的條件滅菌20分鐘?;A(chǔ)培養(yǎng)基100mL,20%乳糖溶液2mL2%伊紅水溶液2mL,培養(yǎng)基天然培養(yǎng)基編輯語音天然培養(yǎng)基是指來自動物體液或利用組織分離提取的一類培養(yǎng)基。長寧區(qū)個人臨床微生物檢驗培養(yǎng)基誠信互利
上海申啟生物科技有限公司位于上海市普陀區(qū)綏德路118弄60號4層、62號4層,是一家專業(yè)的從事生物科技領(lǐng)域內(nèi)的技術(shù)開發(fā)、技術(shù)研制、技術(shù)咨詢、技術(shù)轉(zhuǎn)讓,一類醫(yī)療器械的銷售,微生物干粉培養(yǎng)基的生產(chǎn)加工(限綏德路118弄62號4層),醫(yī)用體外診斷試劑(限綏德路118弄60號4層),從事貨物及技術(shù)的進出口業(yè)務,。公司。在上海申啟近多年發(fā)展歷史,公司旗下現(xiàn)有品牌醫(yī)療器械的銷售等。公司不僅*提供專業(yè)的從事生物科技領(lǐng)域內(nèi)的技術(shù)開發(fā)、技術(shù)研制、技術(shù)咨詢、技術(shù)轉(zhuǎn)讓,一類醫(yī)療器械的銷售,微生物干粉培養(yǎng)基的生產(chǎn)加工(限綏德路118弄62號4層),醫(yī)用體外診斷試劑(限綏德路118弄60號4層),從事貨物及技術(shù)的進出口業(yè)務,。,同時還建立了完善的售后服務體系,為客戶提供良好的產(chǎn)品和服務。自公司成立以來,一直秉承“以質(zhì)量求生存,以信譽求發(fā)展”的經(jīng)營理念,始終堅持以客戶的需求和滿意為重點,為客戶提供良好的技術(shù)開發(fā),技術(shù)研發(fā),技術(shù)轉(zhuǎn)讓,醫(yī)療器材,從而使公司不斷發(fā)展壯大。