培養(yǎng)基半固體培養(yǎng)基指在液體培養(yǎng)基中加入少量的凝固劑而配制成的半固體狀態(tài)的培養(yǎng)基。培養(yǎng)基脫水培養(yǎng)基又稱預(yù)制干燥培養(yǎng)基，指含有除水分外的一切成分的商品培養(yǎng)基。培養(yǎng)基微生物分類編輯語音選擇性培養(yǎng)基：一類根據(jù)某微生物的特殊營養(yǎng)要求或其對某化學(xué)、物理因素的抗性而設(shè)計(jì)的培養(yǎng)基，具有使混合菌樣中的劣勢菌變成優(yōu)勢菌的功能，***用于菌種篩選等領(lǐng)域。鑒別培養(yǎng)基：一類在成分中加有能與目的菌的無色代謝產(chǎn)物發(fā)生顯色反應(yīng)的指示劑，從而達(dá)到只須用肉眼辨別顏色就能方便的從近似菌落中找出目的菌菌落的培養(yǎng)基。例如，伊紅美藍(lán)乳糖培養(yǎng)基（EMB）。培養(yǎng)基常見培養(yǎng)基編輯語音細(xì)菌培養(yǎng)基牛肉膏瓊脂培養(yǎng)基牛肉膏，蛋白胨，氯化鈉，瓊脂，水100ml在燒杯內(nèi)加水100ml，放入牛肉膏、蛋白胨和氯化鈉，用蠟筆在燒杯外作上記號后，放在火上加熱。待燒杯內(nèi)各組分溶解后，加入瓊脂，不斷攪拌以免粘底。等瓊脂完全溶解后補(bǔ)足失水，用10%鹽酸或10%的氫氧化鈉調(diào)整pH值到，分裝在各個試管里，加棉花塞，用高壓蒸汽滅菌：、121攝氏度維持15-30分鐘。牛心培養(yǎng)基細(xì)菌培養(yǎng)基取新鮮牛心（除去脂肪和血管）250克，用刀細(xì)細(xì)剁成肉末后，加入500毫升蒸餾水和5克蛋白胨。在燒杯上做好記號，煮沸。以防焦化、如發(fā)現(xiàn)有焦化現(xiàn)象、該培養(yǎng)基即不能使用。寶山區(qū)常見即用型培養(yǎng)基認(rèn)真負(fù)責(zé)

    應(yīng)重新制備。待大部分固體成分溶化后，再用較小火力使所有成分完全溶化。迄至煮沸。如為瓊脂培養(yǎng)基，應(yīng)先用一部分水將瓊脂溶化，用另一部分水溶化其它成分，然后將兩溶液充分混合。在加熱溶化過程中，因蒸發(fā)而丟失的水分，**后必須加以補(bǔ)足。培養(yǎng)基pH的初步調(diào)整培養(yǎng)基各成分完全溶解后，應(yīng)進(jìn)行pH的初步調(diào)正，因培養(yǎng)基在加熱消毒過程中、pH會有所變化，例如，牛肉浸液約可降低。而腸浸液pH卻會有***的升高。因此，對這個步驟，操作者應(yīng)隨時(shí)注意探索經(jīng)驗(yàn)、以期能掌握培養(yǎng)基的**終pH，保證培養(yǎng)基的質(zhì)量。pH調(diào)正后，還應(yīng)將培養(yǎng)基煮沸數(shù)分鐘，以利培養(yǎng)基沉淀物的析出。培養(yǎng)基注意事項(xiàng)編輯語音培養(yǎng)基在使用前通過高壓或過濾滅菌。防止污染應(yīng)該注意以下事項(xiàng)：確認(rèn)工作細(xì)胞庫是否被污染，確認(rèn)毒種工作種子批是否被污染，確認(rèn)所用培養(yǎng)基及其添加成分（如小牛血清、NaHCO3等）是否被污染，均可用細(xì)菌、***及支原體無菌試驗(yàn)來確認(rèn)并排除。同時(shí)要對無菌試驗(yàn)培養(yǎng)基的靈敏度進(jìn)行驗(yàn)證。實(shí)際生產(chǎn)中，可以從配制好的培養(yǎng)液中取少量加入營養(yǎng)瓊脂于恒溫培養(yǎng)箱內(nèi)培養(yǎng)，48小時(shí)即可觀察有無污染。其它：高壓滅菌設(shè)備、過濾除菌設(shè)備均應(yīng)進(jìn)行驗(yàn)證，確保滅菌和除菌效果。上海專注即用型培養(yǎng)基創(chuàng)新服務(wù)并將所需稱取的藥品一次取齊，置于左側(cè)，每種稱取完畢后，即移放于右側(cè)。

    價(jià)格昂貴，是構(gòu)成動物細(xì)胞培養(yǎng)對生產(chǎn)成本的主要部分之一。血清的質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)血清質(zhì)量高低取決于兩方面因素：一是取材對象，二是取材過程。用于取材的動物應(yīng)健康無病并且在指定的出生天數(shù)之內(nèi)，取材過程應(yīng)嚴(yán)格按照操作規(guī)程執(zhí)行，制備出的血清要經(jīng)過嚴(yán)格的質(zhì)量鑒定。WHO公布的《用動物細(xì)胞體外培養(yǎng)生產(chǎn)生物制品規(guī)程》中的要求：1．牛血清必須來自有文件證明無牛海綿狀腦病的牛群或國家。并應(yīng)具備適當(dāng)?shù)谋O(jiān)測系統(tǒng)。2．有些國家還要求牛血清來自未用過反芻動物蛋白飼料的牛群。3．證明所用牛血清中不含對所生產(chǎn)疫苗病毒的***物。4．血清要通過濾膜過濾除菌，保證無菌。5．無細(xì)菌、霉菌、支原體和病毒的污染，有些國家要求無細(xì)菌噬菌體污染。6．對細(xì)胞有良好的支持繁殖作用。我國在對牛血清的質(zhì)量2000年版《中國生物制品主要原輔料質(zhì)控標(biāo)準(zhǔn)》中提出比較嚴(yán)格的標(biāo)準(zhǔn)要求。包括蛋白質(zhì)含量，細(xì)菌、***、支原體、牛病毒、大腸桿菌噬菌體、細(xì)菌內(nèi)***，支持細(xì)胞增殖檢查。培養(yǎng)基培養(yǎng)基配制編輯語音一、配制用水培養(yǎng)基的大部分是水，所以水的質(zhì)量直接影響培養(yǎng)基的質(zhì)量。按Waymouth標(biāo)準(zhǔn)，水的電阻應(yīng)為200萬歐姆，一般實(shí)驗(yàn)室里以玻璃蒸餾器制備的雙蒸水或三蒸水可以符合使用條件。

    兼性厭氧微生物在F值為+，在+。F值與氧分壓和pH有關(guān)，也受某些微生物代謝產(chǎn)物的影響。在pH相對穩(wěn)定的條件下，可通過增加通氣量（如振蕩培養(yǎng)、攪拌）提高培養(yǎng)基的氧分壓，或加入氧化劑，從而增加F值；在培養(yǎng)基中加入抗壞血酸、硫化氫、半胱氨酸、谷胱甘肽、二硫蘇糖醇等還原性物質(zhì)可降低F值。5、原料來源的選擇在配制培養(yǎng)基時(shí)應(yīng)盡量利用廉價(jià)且易于獲得的原料作為培養(yǎng)基成分，特別是在發(fā)酵工業(yè)中，培養(yǎng)基用量很大，利用低成本的原料更體現(xiàn)出其經(jīng)濟(jì)價(jià)值。例如，在微生物單細(xì)胞蛋白的工業(yè)生產(chǎn)過程中，常常利用糖蜜（制糖工業(yè)中含有蔗糖的廢液）、乳清（乳制品工業(yè)中含有乳糖的廢液）、豆制品工業(yè)廢液及黑廢液（造紙工業(yè)中含有戊糖和己糖的亞硫酸紙漿）等都可作為培養(yǎng)基的原料。再如，工業(yè)上的甲烷發(fā)酵主要利用廢水、廢渣作原料，而在我國農(nóng)村，已推廣利用人畜糞便及禾草為原料發(fā)酵生產(chǎn)甲烷作為燃料。另外，大量的農(nóng)副產(chǎn)品或制品，如鼓皮、米糠、玉米漿、酵母浸膏、酒糟、豆餅、花生餅、蛋白胨等都是常用的發(fā)酵工業(yè)原料。6、滅菌處理要獲得微生物純培養(yǎng)，必須避免雜菌污染，因此對所用器材及工作場所進(jìn)行消毒與滅菌。對培養(yǎng)基而言，更是要進(jìn)行嚴(yán)格的滅菌。一般均應(yīng)盡量收集有關(guān)資料，加以比較核對，再依據(jù)自己的使用目的加以選用。

    然后在同樣溫度下有光照和全黑暗下培養(yǎng)3周直至愈傷組織形成（兩種情況各置3瓶）。觀察愈傷組織誘導(dǎo)結(jié)果，統(tǒng)計(jì)愈傷組織誘導(dǎo)率。***分化及植株再生培養(yǎng)將誘導(dǎo)的愈傷組織按類型分別轉(zhuǎn)入分化培養(yǎng)基上,置于連續(xù)光照，溫度20-22℃條件下培養(yǎng)3周，統(tǒng)計(jì)愈傷組織再生植株情況。愈傷組織誘導(dǎo)的總體情況***愈傷組織誘導(dǎo)培養(yǎng)4周后，愈傷組織基本形成，即排除因生長時(shí)間不夠而未形成愈傷的情況。具體情況見表一中所示。6瓶培養(yǎng)物均有愈傷形成，且都未發(fā)生污染，但誘導(dǎo)率幾乎各不相同。其中，在光照條件下培養(yǎng)的3瓶平均愈傷誘導(dǎo)率為，在黑暗條件下培養(yǎng)的3瓶平均愈傷誘導(dǎo)率為。由于實(shí)驗(yàn)過程中，外植體即***葉片取得偏小，接種時(shí)可能已有部分外植體的大部分細(xì)胞脫水死亡，使整個實(shí)驗(yàn)的愈傷組織誘導(dǎo)率偏低,愈傷塊偏小。動物細(xì)胞培養(yǎng)基RPMI1640培養(yǎng)基是一個全營養(yǎng)型培養(yǎng)基，***應(yīng)用于哺乳動物細(xì)胞和雜交瘤細(xì)胞的培養(yǎng)，如人骨髓瘤細(xì)胞、鼠雜交瘤細(xì)胞、人白細(xì)胞以及B細(xì)胞和T細(xì)胞。**初設(shè)計(jì)用于懸浮細(xì)胞培養(yǎng)和人白血病細(xì)胞的單層細(xì)胞培養(yǎng)。培養(yǎng)基特殊培養(yǎng)基編輯語音選擇性培養(yǎng)基選擇性培養(yǎng)基是指根據(jù)某種微生物的特殊營養(yǎng)要求或其對某化學(xué)、物理因素的抗性而設(shè)計(jì)的培養(yǎng)基。培養(yǎng)基制備基本方法編輯語音培養(yǎng)基配方的選定同一種培養(yǎng)基的配方在不同著作中常會有某些差別。寶山區(qū)介紹即用型培養(yǎng)基認(rèn)真負(fù)責(zé)

因此，除所用的是標(biāo)準(zhǔn)方法，應(yīng)嚴(yán)格按其規(guī)定進(jìn)行配制外。寶山區(qū)常見即用型培養(yǎng)基認(rèn)真負(fù)責(zé)

    血清還含有一些微量元素和離子，他們在代謝***中起重要作用，如SeO3、硒等。血清培養(yǎng)基主要問題1．血清的成份可能有幾百種之多，對其準(zhǔn)確的成份、含量及其作用機(jī)制不清楚，尤其是對其中一些多肽類生長因子、***和脂類等尚未充分認(rèn)識，這給研究工作帶來許多困難。2．血清都是批量生產(chǎn)，各批量之間差異很大，而且血清保存期至多一年，因此，要保證每批血清的相似性極為困難，從而使實(shí)驗(yàn)的標(biāo)準(zhǔn)化和連續(xù)性受到限制。3．對大多數(shù)細(xì)胞，在體內(nèi)狀態(tài)，血清不是它們接觸的生理學(xué)液體，只是在損傷愈合以及血液凝固過程中才接觸血清，因此使用血清有可能改變某種細(xì)胞在體內(nèi)的正常狀態(tài)，血清可能促進(jìn)某些細(xì)胞的生長（成纖維細(xì)胞）同時(shí)***另一類細(xì)胞生長（表皮細(xì)胞）。4．血清含一些對細(xì)胞產(chǎn)生毒性的物質(zhì)，如多胺氧化酶，能與來自高度繁殖細(xì)胞的多胺反應(yīng)（如精胺、亞精胺）形成有細(xì)胞毒性作用的聚精胺。補(bǔ)體、抗體、細(xì)菌***等都會影響細(xì)胞生長，甚至造成細(xì)胞死亡。5．動物個體不同，血清產(chǎn)地、批號不同，每批質(zhì)量差異甚大，其成分不能保持一致。6．取材中可能帶入支原體、病毒，對細(xì)胞產(chǎn)生潛在影響，可能導(dǎo)致實(shí)驗(yàn)失敗或?qū)嶒?yàn)結(jié)果不可靠性。7．大規(guī)模生產(chǎn)中，血清來源越來越困難。寶山區(qū)常見即用型培養(yǎng)基認(rèn)真負(fù)責(zé)

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