血清還含有一些微量元素和離子，他們在代謝***中起重要作用，如SeO3、硒等。血清培養(yǎng)基主要問題1．血清的成份可能有幾百種之多，對其準確的成份、含量及其作用機制不清楚，尤其是對其中一些多肽類生長因子、***和脂類等尚未充分認識，這給研究工作帶來許多困難。2．血清都是批量生產(chǎn)，各批量之間差異很大，而且血清保存期至多一年，因此，要保證每批血清的相似性極為困難，從而使實驗的標準化和連續(xù)性受到限制。3．對大多數(shù)細胞，在體內(nèi)狀態(tài)，血清不是它們接觸的生理學液體，只是在損傷愈合以及血液凝固過程中才接觸血清，因此使用血清有可能改變某種細胞在體內(nèi)的正常狀態(tài)，血清可能促進某些細胞的生長（成纖維細胞）同時***另一類細胞生長（表皮細胞）。4．血清含一些對細胞產(chǎn)生毒性的物質(zhì)，如多胺氧化酶，能與來自高度繁殖細胞的多胺反應(yīng)（如精胺、亞精胺）形成有細胞毒性作用的聚精胺。補體、抗體、細菌***等都會影響細胞生長，甚至造成細胞死亡。5．動物個體不同，血清產(chǎn)地、批號不同，每批質(zhì)量差異甚大，其成分不能保持一致。6．取材中可能帶入支原體、病毒，對細胞產(chǎn)生潛在影響，可能導(dǎo)致實驗失敗或?qū)嶒灲Y(jié)果不可靠性。7．大規(guī)模生產(chǎn)中，血清來源越來越困難。1．牛血清必須來自有文件證明無牛海綿狀腦病的牛群或國家。普陀區(qū)有什么臨床微生物檢驗培養(yǎng)基以客為尊
且血清組成及含量常隨供血動物的性別、年齡、生理條件和營養(yǎng)條件不同而異。血清中含有各種血漿蛋白、多肽、脂肪、碳水化合物、生長因子、***、無機物等，這些物質(zhì)對促進細胞生長或***生長活性是達到生理平衡的。血清主要作用1．提供基本營養(yǎng)物質(zhì)：氨基酸、維生素、無機物、脂類物質(zhì)、核酸衍生物等，是細胞生長必須的物質(zhì)。2．提供***和各種生長因子：胰島素、腎上腺皮質(zhì)***（氫化可的松、**）、類固醇***（雌二醇、睪酮、孕酮）等。生長因子如成纖維細胞生長因子、表皮生長因子、血小板生長因子等。3．提供結(jié)合蛋白：結(jié)合蛋白作用是攜帶重要地低分子量物質(zhì)，如白蛋白攜帶維生素、脂肪、以及***等，轉(zhuǎn)鐵蛋白攜帶鐵。結(jié)合蛋白在細胞代謝過程中起重要作用。4．提供促接觸和伸展因子使細胞貼壁免受機械損傷。5．對培養(yǎng)中的細胞起到某些保護作用：有一些細胞，如內(nèi)皮細胞、骨髓樣細胞可以釋放蛋白酶，血清中含有抗蛋白酶成分，起到中和作用。這種作用是偶然發(fā)現(xiàn)的，則有目的的使用血清來終止胰蛋白酶的消化作用。因為胰蛋白酶已經(jīng)被***用于貼壁細胞的消化傳代。血清蛋白形成了血清的粘度，可以保護細胞免受機械損傷，特別是在懸浮培養(yǎng)攪拌時，粘度起到重要作用。崇明區(qū)介紹臨床微生物檢驗培養(yǎng)基基地一般實驗室里以玻璃蒸餾器制備的雙蒸水或三蒸水可以符合使用條件。
二、培養(yǎng)基培養(yǎng)基有天然、人工兩種。一般實驗室使用的是RPMI-1640粉末培養(yǎng)基，以雙蒸或三蒸水配制。NaHCO3（或HCl）調(diào)pH至，若pH值超過，則大多數(shù)細胞不能生長。RPMI-1640不耐高壓滅菌，使用前需經(jīng)滅菌μm孔徑濾膜濾過處理。三、血清培養(yǎng)中常使用小牛血清（或胎牛血清）。血清亦不能高壓滅菌，無菌的小牛血清需在56℃水浴30分鐘滅活補體，置4℃冰箱存放待用。配制時含量視培養(yǎng)細胞種類、時間而定，一般用10—15%。由于血清成分復(fù)雜、條件不易控制，可選用無血清培養(yǎng)基。四、***素為防止培養(yǎng)時期細菌的污染，可在培養(yǎng)基中添加適當***素，一般用量與組織細胞培養(yǎng)相同：卡那霉素100單位/毫升，或雙抗--青霉素100單位/毫升，鏈霉素100微克/毫升。五、植物血凝素（PHA）非增殖期的細胞不能制備染色體，如人外周血淋巴細胞，但在離體培養(yǎng)過程中，在PHA的作用下，可被刺激轉(zhuǎn)化為淋巴母細胞而進入有絲分裂。經(jīng)實驗測定其分裂高峰分別于培養(yǎng)后44-48小時和68-72小時。PHA有粘多糖，蛋白質(zhì)兩種重要成分。粘多糖促使有絲分裂，蛋白質(zhì)起凝集作用。PHA***的細胞數(shù)隨其濃度而增加，直至全部免疫活性細胞均被***為止，但PHA濃度過高會引起凝集，一般采用4%濃度為好。
其功能是使混合菌樣中的劣勢菌變成優(yōu)勢菌，從而提高該菌的篩選效率。酵母菌富集培養(yǎng)基葡萄糖5%，尿素，硫化銨，磷酸二氫鉀，磷酸氫二鈉，七水合硫酸鎂，七水合硫酸鐵，酵母膏，孟加拉紅，Ashby無氮培養(yǎng)基富集好氧自生固氮菌甘露醇1%，磷酸二氫鉀，七水合硫酸鎂，氯化鈉，二水合硫酸鈣，碳酸鈣培養(yǎng)基鑒別培養(yǎng)基編輯語音EMB培養(yǎng)基常用于鑒別蛋白胨10g，乳糖5g，蔗糖5g，磷酸氫二鉀2g，伊紅，美藍，蒸餾水1000g，2216E培養(yǎng)基配方分離海洋微生物的培養(yǎng)基配方蛋白胨5g，酵母膏1g，磷酸高鐵，瓊脂15-20g，陳海水1000ml，煮沸氫氧化鈉（5%）的溶液調(diào)pH值伊紅美藍培養(yǎng)基可用于檢測水中大腸桿菌的含量首先按以下組成配制基礎(chǔ)培養(yǎng)基。蛋白胨10g，NaCl5g瓊脂15-20g將上述物質(zhì)溶解后，用蒸餾水定容至1000mL，調(diào)節(jié)pH為。滅菌后，冷卻至60℃左右，再按下面的比例，在無菌操作條件下加入滅菌的乳糖溶液、伊紅水溶液以及美藍水溶液。搖勻后，立即倒平板。溶液中的乳糖在高溫下會破壞，因此一般使用壓力為70kPa、溫度為115℃的條件滅菌20分鐘?；A(chǔ)培養(yǎng)基100mL，20%乳糖溶液2mL2%伊紅水溶液2mL，培養(yǎng)基天然培養(yǎng)基編輯語音天然培養(yǎng)基是指來自動物體液或利用組織分離提取的一類培養(yǎng)基。無細菌、霉菌、支原體和病毒的污染，有些國家要求無細菌噬菌體污染。
用于培養(yǎng)霉菌的加入蔗糖，用于培養(yǎng)酵母菌的加入葡萄糖），補足水分，分裝，滅菌，備用。把這培養(yǎng)基的pH值調(diào)到，配方中的糖，如用葡萄糖還可用來培養(yǎng)放線菌和芽孢桿菌。豆芽汁培養(yǎng)基黃豆芽100g，瓊脂15g，葡萄糖20g，水1000ml洗凈黃豆芽，加水煮沸30分鐘。用紗布過濾，濾液中加入瓊脂，加熱溶解后放入糖，攪拌使它溶解，補足水分到1000ml，分裝，滅菌，備用。把這培養(yǎng)基的pH值調(diào)到，可用來培養(yǎng)細菌和放線菌。豌豆瓊脂培養(yǎng)基豌豆80粒，瓊脂5g，水200ml瓊脂取80粒干豌豆加水，煮沸1小時，用紗布過濾后，在濾液中加入瓊脂，煮沸到溶解，分裝，滅菌，備用。食用菌菌種培養(yǎng)基馬鈴薯-蔗糖-瓊脂培養(yǎng)基20%馬鈴薯煮汁1000ml，蔗糖20g，瓊脂18g把馬鈴薯洗凈去皮后，切成小塊。稱取馬鈴薯小塊200g，加水1000ml，煮沸20分鐘后，過濾。在濾汁中補足水分到1000ml，即成20%馬鈴薯煮汁。在馬鈴薯煮汁中加入瓊脂和蔗糖，煮沸，使它溶解后，補足水分，分裝，滅菌，備用。使用該培養(yǎng)基對pH值要求不嚴格，可以不測定。綜合馬鈴薯培養(yǎng)基20%馬鈴薯煮汁1000ml，磷酸二氫鉀3g，硫酸鎂，葡萄糖20g，維生素10mg，瓊脂18g先配制20%馬鈴薯煮汁，方法同上。在煮汁中加入上述各種組分，加熱溶解后補足水分。證明所用牛血清中不含對所生產(chǎn)疫苗病毒的***物。虹口區(qū)智能臨床微生物檢驗培養(yǎng)基以客為尊
價格昂貴，是構(gòu)成動物細胞培養(yǎng)對生產(chǎn)成本的主要部分之一。普陀區(qū)有什么臨床微生物檢驗培養(yǎng)基以客為尊
轉(zhuǎn)用文火燉2小時。過濾，濾出的肉末干燥處理，濾液pH值調(diào)到。每支試管內(nèi)加入10毫升肉湯和少量碎末狀的干牛心，滅菌，備用。根瘤菌培養(yǎng)基葡萄糖10g，磷酸氫二鉀，碳酸鈣3g，硫酸鎂，酵母粉，水1000ml，1%結(jié)晶紫溶液1ml。先把瓊脂加水煮沸溶解，然后分別加入其他組分，攪拌使溶解后，分裝，滅菌，備用。放線菌培養(yǎng)基淀粉硝酸鹽培養(yǎng)基（高氏一號培養(yǎng)基）可溶性淀粉，硝酸鉀，磷酸氫二鉀，氯化鈉，硫酸鎂，硫酸亞鐵，瓊脂2g，水100ml。先把淀粉放在燒杯里，用5ml水調(diào)成糊狀后，倒入95ml水，攪勻后加入其他藥品，使它溶解。在燒杯外做好記號，加熱到煮沸時加入瓊脂，不停攪拌，待瓊脂完全溶解后，補足失水。調(diào)整pH值到，分裝后滅菌，備用。面粉瓊脂培養(yǎng)基面粉60g，瓊脂20g，水1000ml把面粉用水調(diào)成糊狀，加水到500ml，放在文火上煮30分鐘。另取500ml水，放入瓊脂，加熱煮沸到溶解后，把兩液調(diào)勻，補充水分，調(diào)整pH值到，分裝，滅菌，備用。微藻培養(yǎng)基BG-11培養(yǎng)基NaNO3，K2HPO4·，MgSO4·，CaCl2·CitricAcid（檸檬酸），F(xiàn)erricammoniumcitrate（檸檬酸鐵銨，EDTA(dinatrium-salt)，Na2CO3，A5+Cosolution*（A5溶液1000×）1mlDistilledWater。普陀區(qū)有什么臨床微生物檢驗培養(yǎng)基以客為尊
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