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培養(yǎng)基化學(xué)分類編輯語音培養(yǎng)基天然培養(yǎng)基天然培養(yǎng)基是指一類利用動物、植物或微生物體包括其提取物制成的培養(yǎng)基。例如。牛肉膏蛋白胨培養(yǎng)基、麥芽汁培養(yǎng)基和LB培養(yǎng)基等。常用的天然有機營養(yǎng)物質(zhì)包括豆芽汁、玉米粉、土壤浸液、麩皮、牛奶、血清、椰子汁等。天然培養(yǎng)基成本較低,除在實驗室經(jīng)常使用外,也適于用來進行工業(yè)上大規(guī)模的微生物發(fā)酵生產(chǎn)。固體培養(yǎng)基培養(yǎng)基組合培養(yǎng)基合成培養(yǎng)基是根據(jù)天然培養(yǎng)基的成分,用化學(xué)物質(zhì)模擬合成、人工設(shè)計而配制的培養(yǎng)基。例如,高氏1號培養(yǎng)基和查氏培養(yǎng)基等。合成培養(yǎng)基有一定的配方,配制合成培養(yǎng)基時重復(fù)性強,但與天然培養(yǎng)基相比其成本較高,微生物在其中生長速度較慢,一般適于在實驗室用來進行有關(guān)微生物營養(yǎng)需求、代謝、分類鑒定、生物量測定、菌種選育及遺傳分析等方面的研究工作。[2]培養(yǎng)基半組合培養(yǎng)基指一類主要以化學(xué)試劑配制,同時還加有某種或某些天然成分的培養(yǎng)基。例如,馬鈴薯蔗糖培養(yǎng)基。培養(yǎng)基物理分類編輯語音培養(yǎng)基液體培養(yǎng)基80%~90%是水,其中配有可溶性的或不溶性的營養(yǎng)成分的培養(yǎng)基。培養(yǎng)基固體培養(yǎng)基一類配制成的固體狀態(tài)的基質(zhì)。根據(jù)性質(zhì)又分為固化培養(yǎng)基、非可逆性固化培養(yǎng)基、天然固態(tài)培養(yǎng)基、濾膜。不要中斷。可將配方置于傍側(cè),每稱完一種成分即在配方上做出記號。青浦區(qū)現(xiàn)代即用型培養(yǎng)基銷售電話
其功能是使混合菌樣中的劣勢菌變成優(yōu)勢菌,從而提高該菌的篩選效率。酵母菌富集培養(yǎng)基葡萄糖5%,尿素,硫化銨,磷酸二氫鉀,磷酸氫二鈉,七水合硫酸鎂,七水合硫酸鐵,酵母膏,孟加拉紅,Ashby無氮培養(yǎng)基富集好氧自生固氮菌甘露醇1%,磷酸二氫鉀,七水合硫酸鎂,氯化鈉,二水合硫酸鈣,碳酸鈣培養(yǎng)基鑒別培養(yǎng)基編輯語音EMB培養(yǎng)基常用于鑒別蛋白胨10g,乳糖5g,蔗糖5g,磷酸氫二鉀2g,伊紅,美藍,蒸餾水1000g,2216E培養(yǎng)基配方分離海洋微生物的培養(yǎng)基配方蛋白胨5g,酵母膏1g,磷酸高鐵,瓊脂15-20g,陳海水1000ml,煮沸氫氧化鈉(5%)的溶液調(diào)pH值伊紅美藍培養(yǎng)基可用于檢測水中大腸桿菌的含量首先按以下組成配制基礎(chǔ)培養(yǎng)基。蛋白胨10g,NaCl5g瓊脂15-20g將上述物質(zhì)溶解后,用蒸餾水定容至1000mL,調(diào)節(jié)pH為。滅菌后,冷卻至60℃左右,再按下面的比例,在無菌操作條件下加入滅菌的乳糖溶液、伊紅水溶液以及美藍水溶液。搖勻后,立即倒平板。溶液中的乳糖在高溫下會破壞,因此一般使用壓力為70kPa、溫度為115℃的條件滅菌20分鐘?;A(chǔ)培養(yǎng)基100mL,20%乳糖溶液2mL2%伊紅水溶液2mL,培養(yǎng)基天然培養(yǎng)基編輯語音天然培養(yǎng)基是指來自動物體液或利用組織分離提取的一類培養(yǎng)基。奉賢區(qū)推廣即用型培養(yǎng)基銷售價格以防焦化、如發(fā)現(xiàn)有焦化現(xiàn)象、該培養(yǎng)基即不能使用。
二、培養(yǎng)基培養(yǎng)基有天然、人工兩種。一般實驗室使用的是RPMI-1640粉末培養(yǎng)基,以雙蒸或三蒸水配制。NaHCO3(或HCl)調(diào)pH至,若pH值超過,則大多數(shù)細胞不能生長。RPMI-1640不耐高壓滅菌,使用前需經(jīng)滅菌μm孔徑濾膜濾過處理。三、血清培養(yǎng)中常使用小牛血清(或胎牛血清)。血清亦不能高壓滅菌,無菌的小牛血清需在56℃水浴30分鐘滅活補體,置4℃冰箱存放待用。配制時含量視培養(yǎng)細胞種類、時間而定,一般用10—15%。由于血清成分復(fù)雜、條件不易控制,可選用無血清培養(yǎng)基。四、***素為防止培養(yǎng)時期細菌的污染,可在培養(yǎng)基中添加適當***素,一般用量與組織細胞培養(yǎng)相同:卡那霉素100單位/毫升,或雙抗--青霉素100單位/毫升,鏈霉素100微克/毫升。五、植物血凝素(PHA)非增殖期的細胞不能制備染色體,如人外周血淋巴細胞,但在離體培養(yǎng)過程中,在PHA的作用下,可被刺激轉(zhuǎn)化為淋巴母細胞而進入有絲分裂。經(jīng)實驗測定其分裂高峰分別于培養(yǎng)后44-48小時和68-72小時。PHA有粘多糖,蛋白質(zhì)兩種重要成分。粘多糖促使有絲分裂,蛋白質(zhì)起凝集作用。PHA***的細胞數(shù)隨其濃度而增加,直至全部免疫活性細胞均被***為止,但PHA濃度過高會引起凝集,一般采用4%濃度為好。
培養(yǎng)基制備基本方法編輯語音培養(yǎng)基配方的選定同一種培養(yǎng)基的配方在不同著作中常會有某些差別。因此,除所用的是標準方法,應(yīng)嚴格按其規(guī)定進行配制外,一般均應(yīng)盡量收集有關(guān)資料,加以比較核對,再依據(jù)自己的使用目的加以選用,記錄其來源。培養(yǎng)基的制備記錄每次制備培養(yǎng)基均應(yīng)有記錄,包括培養(yǎng)基名稱,配方及其來源,和各種成份的牌號。**終pH值、消毒的溫度和時間制各的日期和制備者等,記錄應(yīng)復(fù)制一份,原記錄保存?zhèn)洳?,?fù)制記錄隨制好的培養(yǎng)基一同存放、以防發(fā)生混亂。培養(yǎng)基成分的稱取培養(yǎng)基的各種成分必須精確稱取并要注意防止錯亂,**好一次完成,不要中斷??蓪⑴浞街糜诎鴤?cè),每稱完一種成分即在配方上做出記號,并將所需稱取的藥品一次取齊,置于左側(cè),每種稱取完畢后,即移放于右側(cè)。完全稱取完畢后,還應(yīng)進行一次檢查。培養(yǎng)基各成份的混合和溶化培養(yǎng)基所用化學(xué)藥品均應(yīng)是化學(xué)純的。使用的蒸煮鍋不得為銅鍋或鐵鍋,以防有微量銅或鐵混入培養(yǎng)基中,使細菌不易生長。**好使用不銹鋼鍋加熱溶化,也可放入大燒杯或大燒瓶中置高壓蒸汽滅菌器或流動蒸汽消毒器中蒸煮溶化。在鍋中溶化時、可先用溫水加熱并隨時擾動,以防焦化、如發(fā)現(xiàn)有焦化現(xiàn)象、該培養(yǎng)基即不能使用。pH值、消毒的溫度和時間制各的日期和制備者等,記錄應(yīng)復(fù)制一份。
然后在同樣溫度下有光照和全黑暗下培養(yǎng)3周直至愈傷組織形成(兩種情況各置3瓶)。觀察愈傷組織誘導(dǎo)結(jié)果,統(tǒng)計愈傷組織誘導(dǎo)率。***分化及植株再生培養(yǎng)將誘導(dǎo)的愈傷組織按類型分別轉(zhuǎn)入分化培養(yǎng)基上,置于連續(xù)光照,溫度20-22℃條件下培養(yǎng)3周,統(tǒng)計愈傷組織再生植株情況。愈傷組織誘導(dǎo)的總體情況***愈傷組織誘導(dǎo)培養(yǎng)4周后,愈傷組織基本形成,即排除因生長時間不夠而未形成愈傷的情況。具體情況見表一中所示。6瓶培養(yǎng)物均有愈傷形成,且都未發(fā)生污染,但誘導(dǎo)率幾乎各不相同。其中,在光照條件下培養(yǎng)的3瓶平均愈傷誘導(dǎo)率為,在黑暗條件下培養(yǎng)的3瓶平均愈傷誘導(dǎo)率為。由于實驗過程中,外植體即***葉片取得偏小,接種時可能已有部分外植體的大部分細胞脫水死亡,使整個實驗的愈傷組織誘導(dǎo)率偏低,愈傷塊偏小。動物細胞培養(yǎng)基RPMI1640培養(yǎng)基是一個全營養(yǎng)型培養(yǎng)基,***應(yīng)用于哺乳動物細胞和雜交瘤細胞的培養(yǎng),如人骨髓瘤細胞、鼠雜交瘤細胞、人白細胞以及B細胞和T細胞。**初設(shè)計用于懸浮細胞培養(yǎng)和人白血病細胞的單層細胞培養(yǎng)。培養(yǎng)基特殊培養(yǎng)基編輯語音選擇性培養(yǎng)基選擇性培養(yǎng)基是指根據(jù)某種微生物的特殊營養(yǎng)要求或其對某化學(xué)、物理因素的抗性而設(shè)計的培養(yǎng)基。包括培養(yǎng)基名稱,配方及其來源,和各種成份的牌號。金山區(qū)推廣即用型培養(yǎng)基服務(wù)保障
因此,除所用的是標準方法,應(yīng)嚴格按其規(guī)定進行配制外。青浦區(qū)現(xiàn)代即用型培養(yǎng)基銷售電話
培養(yǎng)基半固體培養(yǎng)基指在液體培養(yǎng)基中加入少量的凝固劑而配制成的半固體狀態(tài)的培養(yǎng)基。培養(yǎng)基脫水培養(yǎng)基又稱預(yù)制干燥培養(yǎng)基,指含有除水分外的一切成分的商品培養(yǎng)基。培養(yǎng)基微生物分類編輯語音選擇性培養(yǎng)基:一類根據(jù)某微生物的特殊營養(yǎng)要求或其對某化學(xué)、物理因素的抗性而設(shè)計的培養(yǎng)基,具有使混合菌樣中的劣勢菌變成優(yōu)勢菌的功能,***用于菌種篩選等領(lǐng)域。鑒別培養(yǎng)基:一類在成分中加有能與目的菌的無色代謝產(chǎn)物發(fā)生顯色反應(yīng)的指示劑,從而達到只須用肉眼辨別顏色就能方便的從近似菌落中找出目的菌菌落的培養(yǎng)基。例如,伊紅美藍乳糖培養(yǎng)基(EMB)。培養(yǎng)基常見培養(yǎng)基編輯語音細菌培養(yǎng)基牛肉膏瓊脂培養(yǎng)基牛肉膏,蛋白胨,氯化鈉,瓊脂,水100ml在燒杯內(nèi)加水100ml,放入牛肉膏、蛋白胨和氯化鈉,用蠟筆在燒杯外作上記號后,放在火上加熱。待燒杯內(nèi)各組分溶解后,加入瓊脂,不斷攪拌以免粘底。等瓊脂完全溶解后補足失水,用10%鹽酸或10%的氫氧化鈉調(diào)整pH值到,分裝在各個試管里,加棉花塞,用高壓蒸汽滅菌:、121攝氏度維持15-30分鐘。牛心培養(yǎng)基細菌培養(yǎng)基取新鮮牛心(除去脂肪和血管)250克,用刀細細剁成肉末后,加入500毫升蒸餾水和5克蛋白胨。在燒杯上做好記號,煮沸。青浦區(qū)現(xiàn)代即用型培養(yǎng)基銷售電話
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