價(jià)格昂貴,是構(gòu)成動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)對生產(chǎn)成本的主要部分之一。血清的質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)血清質(zhì)量高低取決于兩方面因素:一是取材對象,二是取材過程。用于取材的動(dòng)物應(yīng)健康無病并且在指定的出生天數(shù)之內(nèi),取材過程應(yīng)嚴(yán)格按照操作規(guī)程執(zhí)行,制備出的血清要經(jīng)過嚴(yán)格的質(zhì)量鑒定。WHO公布的《用動(dòng)物細(xì)胞體外培養(yǎng)生產(chǎn)生物制品規(guī)程》中的要求:1.牛血清必須來自有文件證明無牛海綿狀腦病的牛群或國家。并應(yīng)具備適當(dāng)?shù)谋O(jiān)測系統(tǒng)。2.有些國家還要求牛血清來自未用過反芻動(dòng)物蛋白飼料的牛群。3.證明所用牛血清中不含對所生產(chǎn)疫苗病毒的***物。4.血清要通過濾膜過濾除菌,保證無菌。5.無細(xì)菌、霉菌、支原體和病毒的污染,有些國家要求無細(xì)菌噬菌體污染。6.對細(xì)胞有良好的支持繁殖作用。我國在對牛血清的質(zhì)量2000年版《中國生物制品主要原輔料質(zhì)控標(biāo)準(zhǔn)》中提出比較嚴(yán)格的標(biāo)準(zhǔn)要求。包括蛋白質(zhì)含量,細(xì)菌、***、支原體、牛病毒、大腸桿菌噬菌體、細(xì)菌內(nèi)***,支持細(xì)胞增殖檢查。培養(yǎng)基培養(yǎng)基配制編輯語音一、配制用水培養(yǎng)基的大部分是水,所以水的質(zhì)量直接影響培養(yǎng)基的質(zhì)量。按Waymouth標(biāo)準(zhǔn),水的電阻應(yīng)為200萬歐姆,一般實(shí)驗(yàn)室里以玻璃蒸餾器制備的雙蒸水或三蒸水可以符合使用條件。也受某些微生物代謝產(chǎn)物的影響。長寧區(qū)介紹干粉培養(yǎng)基及配套試劑質(zhì)量保證
二、培養(yǎng)基培養(yǎng)基有天然、人工兩種。一般實(shí)驗(yàn)室使用的是RPMI-1640粉末培養(yǎng)基,以雙蒸或三蒸水配制。NaHCO3(或HCl)調(diào)pH至,若pH值超過,則大多數(shù)細(xì)胞不能生長。RPMI-1640不耐高壓滅菌,使用前需經(jīng)滅菌μm孔徑濾膜濾過處理。三、血清培養(yǎng)中常使用小牛血清(或胎牛血清)。血清亦不能高壓滅菌,無菌的小牛血清需在56℃水浴30分鐘滅活補(bǔ)體,置4℃冰箱存放待用。配制時(shí)含量視培養(yǎng)細(xì)胞種類、時(shí)間而定,一般用10—15%。由于血清成分復(fù)雜、條件不易控制,可選用無血清培養(yǎng)基。四、***素為防止培養(yǎng)時(shí)期細(xì)菌的污染,可在培養(yǎng)基中添加適當(dāng)***素,一般用量與組織細(xì)胞培養(yǎng)相同:卡那霉素100單位/毫升,或雙抗--青霉素100單位/毫升,鏈霉素100微克/毫升。五、植物血凝素(PHA)非增殖期的細(xì)胞不能制備染色體,如人外周血淋巴細(xì)胞,但在離體培養(yǎng)過程中,在PHA的作用下,可被刺激轉(zhuǎn)化為淋巴母細(xì)胞而進(jìn)入有絲分裂。經(jīng)實(shí)驗(yàn)測定其分裂高峰分別于培養(yǎng)后44-48小時(shí)和68-72小時(shí)。PHA有粘多糖,蛋白質(zhì)兩種重要成分。粘多糖促使有絲分裂,蛋白質(zhì)起凝集作用。PHA***的細(xì)胞數(shù)隨其濃度而增加,直至全部免疫活性細(xì)胞均被***為止,但PHA濃度過高會(huì)引起凝集,一般采用4%濃度為好。徐匯區(qū)常規(guī)干粉培養(yǎng)基及配套試劑銷售價(jià)格例如,在微生物單細(xì)胞蛋白的工業(yè)生產(chǎn)過程中。
轉(zhuǎn)用文火燉2小時(shí)。過濾,濾出的肉末干燥處理,濾液pH值調(diào)到。每支試管內(nèi)加入10毫升肉湯和少量碎末狀的干牛心,滅菌,備用。根瘤菌培養(yǎng)基葡萄糖10g,磷酸氫二鉀,碳酸鈣3g,硫酸鎂,酵母粉,水1000ml,1%結(jié)晶紫溶液1ml。先把瓊脂加水煮沸溶解,然后分別加入其他組分,攪拌使溶解后,分裝,滅菌,備用。放線菌培養(yǎng)基淀粉硝酸鹽培養(yǎng)基(高氏一號培養(yǎng)基)可溶性淀粉,硝酸鉀,磷酸氫二鉀,氯化鈉,硫酸鎂,硫酸亞鐵,瓊脂2g,水100ml。先把淀粉放在燒杯里,用5ml水調(diào)成糊狀后,倒入95ml水,攪勻后加入其他藥品,使它溶解。在燒杯外做好記號,加熱到煮沸時(shí)加入瓊脂,不停攪拌,待瓊脂完全溶解后,補(bǔ)足失水。調(diào)整pH值到,分裝后滅菌,備用。面粉瓊脂培養(yǎng)基面粉60g,瓊脂20g,水1000ml把面粉用水調(diào)成糊狀,加水到500ml,放在文火上煮30分鐘。另取500ml水,放入瓊脂,加熱煮沸到溶解后,把兩液調(diào)勻,補(bǔ)充水分,調(diào)整pH值到,分裝,滅菌,備用。微藻培養(yǎng)基BG-11培養(yǎng)基NaNO3,K2HPO4·,MgSO4·,CaCl2·CitricAcid(檸檬酸),F(xiàn)erricammoniumcitrate(檸檬酸鐵銨,EDTA(dinatrium-salt),Na2CO3,A5+Cosolution*(A5溶液1000×)1mlDistilledWater。
血清還含有一些微量元素和離子,他們在代謝***中起重要作用,如SeO3、硒等。血清培養(yǎng)基主要問題1.血清的成份可能有幾百種之多,對其準(zhǔn)確的成份、含量及其作用機(jī)制不清楚,尤其是對其中一些多肽類生長因子、***和脂類等尚未充分認(rèn)識,這給研究工作帶來許多困難。2.血清都是批量生產(chǎn),各批量之間差異很大,而且血清保存期至多一年,因此,要保證每批血清的相似性極為困難,從而使實(shí)驗(yàn)的標(biāo)準(zhǔn)化和連續(xù)性受到限制。3.對大多數(shù)細(xì)胞,在體內(nèi)狀態(tài),血清不是它們接觸的生理學(xué)液體,只是在損傷愈合以及血液凝固過程中才接觸血清,因此使用血清有可能改變某種細(xì)胞在體內(nèi)的正常狀態(tài),血清可能促進(jìn)某些細(xì)胞的生長(成纖維細(xì)胞)同時(shí)***另一類細(xì)胞生長(表皮細(xì)胞)。4.血清含一些對細(xì)胞產(chǎn)生毒性的物質(zhì),如多胺氧化酶,能與來自高度繁殖細(xì)胞的多胺反應(yīng)(如精胺、亞精胺)形成有細(xì)胞毒性作用的聚精胺。補(bǔ)體、抗體、細(xì)菌***等都會(huì)影響細(xì)胞生長,甚至造成細(xì)胞死亡。5.動(dòng)物個(gè)體不同,血清產(chǎn)地、批號不同,每批質(zhì)量差異甚大,其成分不能保持一致。6.取材中可能帶入支原體、病毒,對細(xì)胞產(chǎn)生潛在影響,可能導(dǎo)致實(shí)驗(yàn)失敗或?qū)嶒?yàn)結(jié)果不可靠性。7.大規(guī)模生產(chǎn)中,血清來源越來越困難?;蚣尤胙趸瘎?,從而增加F值;
培養(yǎng)基化學(xué)分類編輯語音培養(yǎng)基天然培養(yǎng)基天然培養(yǎng)基是指一類利用動(dòng)物、植物或微生物體包括其提取物制成的培養(yǎng)基。例如。牛肉膏蛋白胨培養(yǎng)基、麥芽汁培養(yǎng)基和LB培養(yǎng)基等。常用的天然有機(jī)營養(yǎng)物質(zhì)包括豆芽汁、玉米粉、土壤浸液、麩皮、牛奶、血清、椰子汁等。天然培養(yǎng)基成本較低,除在實(shí)驗(yàn)室經(jīng)常使用外,也適于用來進(jìn)行工業(yè)上大規(guī)模的微生物發(fā)酵生產(chǎn)。固體培養(yǎng)基培養(yǎng)基組合培養(yǎng)基合成培養(yǎng)基是根據(jù)天然培養(yǎng)基的成分,用化學(xué)物質(zhì)模擬合成、人工設(shè)計(jì)而配制的培養(yǎng)基。例如,高氏1號培養(yǎng)基和查氏培養(yǎng)基等。合成培養(yǎng)基有一定的配方,配制合成培養(yǎng)基時(shí)重復(fù)性強(qiáng),但與天然培養(yǎng)基相比其成本較高,微生物在其中生長速度較慢,一般適于在實(shí)驗(yàn)室用來進(jìn)行有關(guān)微生物營養(yǎng)需求、代謝、分類鑒定、生物量測定、菌種選育及遺傳分析等方面的研究工作。[2]培養(yǎng)基半組合培養(yǎng)基指一類主要以化學(xué)試劑配制,同時(shí)還加有某種或某些天然成分的培養(yǎng)基。例如,馬鈴薯蔗糖培養(yǎng)基。培養(yǎng)基物理分類編輯語音培養(yǎng)基液體培養(yǎng)基80%~90%是水,其中配有可溶性的或不溶性的營養(yǎng)成分的培養(yǎng)基。培養(yǎng)基固體培養(yǎng)基一類配制成的固體狀態(tài)的基質(zhì)。根據(jù)性質(zhì)又分為固化培養(yǎng)基、非可逆性固化培養(yǎng)基、天然固態(tài)培養(yǎng)基、濾膜。5、原料來源的選擇在配制培養(yǎng)基時(shí)應(yīng)盡量利用廉價(jià)且易于獲得的原料作為培養(yǎng)基成分。寶山區(qū)質(zhì)量干粉培養(yǎng)基及配套試劑建筑
在培養(yǎng)基中加入抗壞血酸、硫化氫、半胱氨酸、谷胱甘肽。長寧區(qū)介紹干粉培養(yǎng)基及配套試劑質(zhì)量保證
蒸餾水)919mlSE培養(yǎng)基·6H2OFe—EDTA1mlA5solution1000×1mldistilledwater958mlSoilExtract(土壤提取液)配置方法取花園土未施過肥,加入蒸餾水1000毫升,瓶口用透氣塞封口,在水浴中沸水加熱2小時(shí),冷卻數(shù)小時(shí),在無菌條件下過濾,取上清液,將滅菌蒸餾水加入上清液至總體積1000毫升。土壤提取液保存在4℃?zhèn)溆?。CompositionoftheA5solutionAddto100mlofdistilledwater:(加入100ml的蒸餾水)(NH4):將EDTA和FeCl3·6H2O分別溶于水和HCl(),混勻即可。Na2EDTA1gdistilledwater50mlFeCl3·6H2O81mgHCl()50mlPr培養(yǎng)基Preparation:to997mLofglass-distilledwater,addgproteosepeptone,gagar,andthefollowingstocksolutions:workingsolutiong/()1mlA5溶液和EDTA-Fe溶液配制方法同上。***培養(yǎng)基薩市(Sabouraud’s)培養(yǎng)基蛋白胨10g,瓊脂20g,麥芽糖40g,水1000ml先把蛋白胨、瓊脂加水后,加熱,不斷攪拌,待瓊脂溶解后,加入40g麥芽糖(或葡萄糖),攪拌,使它溶解,然后分裝,滅菌,備用。本培養(yǎng)菌是培養(yǎng)許多種類***所常用的。馬鈴薯糖瓊脂培養(yǎng)基把馬鈴薯洗凈去皮,取200g切成小塊,加水1000ml,煮沸半小時(shí)后,補(bǔ)足水分。在濾液中加入10g瓊脂,煮沸溶解后加糖20g。長寧區(qū)介紹干粉培養(yǎng)基及配套試劑質(zhì)量保證
上海申啟生物科技有限公司位于上海市普陀區(qū)綏德路118弄60號4層、62號4層,擁有一支專業(yè)的技術(shù)團(tuán)隊(duì)。致力于創(chuàng)造***的產(chǎn)品與服務(wù),以誠信、敬業(yè)、進(jìn)取為宗旨,以建醫(yī)療器械的銷售產(chǎn)品為目標(biāo),努力打造成為同行業(yè)中具有影響力的企業(yè)。公司不僅*提供專業(yè)的從事生物科技領(lǐng)域內(nèi)的技術(shù)開發(fā)、技術(shù)研制、技術(shù)咨詢、技術(shù)轉(zhuǎn)讓,一類醫(yī)療器械的銷售,微生物干粉培養(yǎng)基的生產(chǎn)加工(限綏德路118弄62號4層),醫(yī)用體外診斷試劑(限綏德路118弄60號4層),從事貨物及技術(shù)的進(jìn)出口業(yè)務(wù),。,同時(shí)還建立了完善的售后服務(wù)體系,為客戶提供良好的產(chǎn)品和服務(wù)。自公司成立以來,一直秉承“以質(zhì)量求生存,以信譽(yù)求發(fā)展”的經(jīng)營理念,始終堅(jiān)持以客戶的需求和滿意為重點(diǎn),為客戶提供良好的技術(shù)開發(fā),技術(shù)研發(fā),技術(shù)轉(zhuǎn)讓,醫(yī)療器材,從而使公司不斷發(fā)展壯大。