背景技術(shù):培養(yǎng)基是供微生物、植物、動物組織和細菌生長和維持生長用的人工配置的養(yǎng)料,完全滅菌后用于單種微生物培養(yǎng)和鑒定,一般都是在無菌狀態(tài)下儲存,定量使用的,屬于一種高新產(chǎn)業(yè)。傳統(tǒng)的制備培養(yǎng)基的過程先將培養(yǎng)基粉末進行人工配置,攪勻,然后再裝到錐形瓶里邊在蒸汽滅菌器里邊滅菌再使用,這需要耗費大量的人力物力,而且效率不高。目前,國外進口的培養(yǎng)基制備器,可以將配置、滅菌合二為一,較后恒溫保持等待分裝。極大地提高了效率,而且節(jié)省了人力物力,但是國外的的進口設(shè)備價格比較昂貴,因此造成了生產(chǎn)成本的高居不下,在用戶的使用范圍上造成了一定的局限性。目前國內(nèi)沒有公司生產(chǎn)該的培養(yǎng)基制備器,因此,完成培養(yǎng)基配置、滅菌一體化顯得尤為重要。半合成培養(yǎng)基在合成培養(yǎng)基中,加入某種或幾種天然成分。廣東培養(yǎng)基滅菌 培養(yǎng)基制備器
在制備培養(yǎng)基時,通常要考慮以下因素:(1)pH值多數(shù)細胞系在pH=7.4下生長得很好。盡管各細胞株之間細胞生長*pH值變化很小,但一些正常的成纖維細胞系以pH=7.4~7.7,轉(zhuǎn)化細胞以pH=7.0~7.4更合適。據(jù)報道,上皮細胞以pH=5.5合適。為確定*佳pH值,做一個簡單的生長實驗或特殊功能分析酚紅常用作指示劑,pH=7.4呈紅色,pH=7.0變橙色,pH=6.5變黃色,而pH=7.6呈紅色中略帶藍色,pH=7.8呈紫色。由于對顏色的觀察有很大的主觀性,因而必須用無菌平衡鹽溶液和同樣濃度的酚紅配一套標(biāo)準(zhǔn)樣,放在與制備培養(yǎng)基相同的瓶子中。(2)緩沖能力碳算鹽緩沖系統(tǒng)由于毒性小、成本低、對培養(yǎng)物有營養(yǎng)作用,因此比其他緩沖系統(tǒng)用得多。在pH值條件下的緩沖能力差。(3)滲透壓多數(shù)培養(yǎng)細胞對滲透壓有很寬的耐受范圍,一般常用冰點降低或蒸汽壓升高測定。如果自己配培養(yǎng)基,可通過測定滲透壓防止稱量和稀釋等造成的誤差。中國香港不銹鋼內(nèi)桶培養(yǎng)基制備器固體培養(yǎng)基根據(jù)性質(zhì)又分為固化培養(yǎng)基、非可逆性固化培養(yǎng)基、天然固態(tài)培養(yǎng)基、濾膜。
干粉顆粒微生物培養(yǎng)基儲存條件:通常情況下,干粉培養(yǎng)基和顆粒培養(yǎng)基產(chǎn)品,在室溫干燥避光的儲存環(huán)境中,并注意密封存放,避免產(chǎn)品陽光直射,室內(nèi)濕度與溫度太高,如不注意密封情況,顆粒粉末在會有結(jié)塊和受潮的現(xiàn)象,所以使用后一定要擰緊蓋子,注意防潮。關(guān)于儲存時長,只要嚴(yán)格按照培養(yǎng)基廠家的標(biāo)簽要求存放,未開封的培養(yǎng)基可保存兩至三年。我們平常使用時,干粉沒必要放在冰箱里,但如果在制備當(dāng)天打開培養(yǎng)基后沒有用完,建議將其存放在冰箱中,減少受潮問題但不要放置太多天??傊疀]有開封的干粉、顆粒培養(yǎng)基存放在陰涼干燥處即可。
培養(yǎng)基的類型:天然培養(yǎng)基天然培養(yǎng)基是指利用各種動、植物或微生物的原料,其成分難以確切知道。用作這種培養(yǎng)基的主要原料有:牛肉膏、麥芽汁、蛋白胨、酵母膏、玉米粉、麩皮、各種餅粉、馬鈴薯、牛奶、血清等。用這些物質(zhì)配成的培養(yǎng)基雖然不能確切知道它的化學(xué)成分,但一般來講,營養(yǎng)是比較豐富的,微生物生長旺盛,而且來源普遍,配制方便,所以較為常用,尤其適合于配制實驗室常用的培養(yǎng)基。這種培養(yǎng)基的穩(wěn)定性常受生產(chǎn)廠或批號等因素的影響。培養(yǎng)基根據(jù)物理狀態(tài)可分為固體培養(yǎng)基、液體培養(yǎng)基、半固體培養(yǎng)基。
固體斜面培養(yǎng)基配制:培養(yǎng)基各成份的混合和溶化:培養(yǎng)基所用化學(xué)藥品均應(yīng)是化學(xué)純的。使用的蒸煮鍋不得為銅鍋或鐵鍋,以防有微量銅或鐵混入培養(yǎng)基中,使細菌不易生長。較好使用不銹鋼萵加熱溶化,可放入大燒杯或大燒瓶中置高壓蒸汽滅菌器或流動蒸汽消毒器中蒸煮溶化。在鍋中溶化時、可先用溫水加熱并隨時擾動、以防焦化、如發(fā)現(xiàn)有焦化現(xiàn)象、該培養(yǎng)基即不能使用,應(yīng)重新制備。待大部分固體成分溶化后,再用較小火力使所有成分完全溶化,迄至煮沸。如為瓊脂溶化,用另一部分水溶化其它成分,然后將兩溶液充分混合。在加熱溶化過程中,因蒸發(fā)而丟失的水分,較后必須加以補足。培養(yǎng)基pH的初步調(diào)正:因培養(yǎng)基在加熱消毒過程中、pH會有所變化,培養(yǎng)基各成分完全溶解后,應(yīng)進行PH的初步調(diào)正。。液體培養(yǎng)基是培養(yǎng)基物理分類一種,是相對固體培養(yǎng)基而言的,是微生物或動植物細胞的液狀培養(yǎng)基。中國香港不銹鋼內(nèi)桶培養(yǎng)基制備器
培養(yǎng)基制備器各種工作模式預(yù)存五組分配參數(shù)。廣東培養(yǎng)基滅菌 培養(yǎng)基制備器
天然培養(yǎng)基中血清主要作用:對培養(yǎng)中的細胞起到某些保護作用:有一些細胞,如內(nèi)皮細胞、骨髓樣細胞可以釋放蛋白酶,血清中含有抗蛋白酶成分,起到中和作用。這種作用是偶然發(fā)現(xiàn)的,則有目的的使用血清來終止胰蛋白酶的消化作用。因為胰蛋白酶已經(jīng)被較廣用于貼壁細胞的消化傳代。血清蛋白形成了血清的粘度,可以保護細胞免受機械損傷,特別是在懸浮培養(yǎng)攪拌時,粘度起到重要作用。血清還含有一些微量元素和離子,他們在代謝中起重要作用,如SeO3、硒等。廣東培養(yǎng)基滅菌 培養(yǎng)基制備器