制備培養(yǎng)基的操作要點:a.液體培養(yǎng)基所配制的培養(yǎng)基是液態(tài)的,其中的成分基本上溶于水,沒有明顯的固形物,液體培養(yǎng)基營養(yǎng)成分分布均勻,易于控制微生物的生長代謝狀態(tài)。b.固體培養(yǎng)基在液體培養(yǎng)基中加入適量的凝固劑即成固體培養(yǎng)基。常用作凝固劑的物質(zhì)有瓊脂、明膠、硅膠等,以瓊脂為常用。固體培養(yǎng)基在實際中用得十分普遍。在實驗室中,它被用作微生物的分離、鑒定、檢驗雜菌、計數(shù)、保藏、生物測定等。c.半固體培養(yǎng)基如果把少量的凝固劑加入到液體培養(yǎng)基中,就制成了半固體培養(yǎng)基。以瓊脂為例,它的用量在0.2~1%之間。這種培養(yǎng)基有時可用來觀察微生物的動力,有時用來保藏菌種。培養(yǎng)基制備器具有液量分配,時間分配,復(fù)制分配三種工作模式。安徽全自動培養(yǎng)基制備器
培養(yǎng)基配制后一般都有沉渣或混濁出現(xiàn)醫(yī)學(xué),需過濾成清晰透明后方可使用,常用的過濾方法如下:1.液體培養(yǎng)基:液體培養(yǎng)基必須清晰,以便觀察細菌的生長情況,常用濾紙過濾,亦可在加熱前加入用水稀釋的雞蛋白(1000ml培養(yǎng)基用1個雞蛋白)在100℃加熱后保持60~70℃,40~60分鐘,使其不溶性物質(zhì)附于凝固的蛋白上而沉淀,然后再用虹吸法吸出上清液或以濾紙過濾。2.固體培養(yǎng)基:如系瓊脂培養(yǎng)基,于加熱融化后需趁熱以絨布或兩層紗布中夾脫脂棉過濾;亦可用自然沉淀法,即將瓊脂培養(yǎng)基盛人鋁鍋或廣口搪瓷容器內(nèi),以高壓(103.43kPa)蒸汽融化15分鐘后,靜置高壓鍋內(nèi)過夜,次日將瓊脂傾出,用刀將底部沉渣切去,再融化即可收清晰的瓊脂培養(yǎng)基。河南培養(yǎng)基消毒 培養(yǎng)基制備器配制培養(yǎng)基的原則:根據(jù)培養(yǎng)目的需要選擇適宜的營養(yǎng)物質(zhì)。
孢子培養(yǎng)基:孢子培養(yǎng)基是供菌種繁殖孢子的一種常用固體培養(yǎng)基,對這種培養(yǎng)基的要求是能使菌體迅速生長,產(chǎn)生較多較好的孢子,并要求這種培養(yǎng)基不易引起菌種發(fā)生變異。所以對孢子培養(yǎng)基的基本配制要求是:靠前,營養(yǎng)不要太豐富(特別是有機氮源),否則不易產(chǎn)孢子。如灰色鏈霉在葡萄糖-硝酸鹽-其它鹽類的培養(yǎng)基上都能很好地生長和產(chǎn)孢子,但若加入0.5%酵母膏或酪蛋白后,就只長菌絲而不長孢子。第二,所用無機鹽的濃度要適量,不然也會影響孢子量和孢子顏色。第三,要注意孢子培養(yǎng)基的pH和濕度。生產(chǎn)上常用的孢子培養(yǎng)基有:麩皮培養(yǎng)基、小米培養(yǎng)基、大米培養(yǎng)基、玉米碎屑培養(yǎng)基和用葡萄糖、蛋白胨、牛肉膏和食鹽等配制成的瓊脂斜面培養(yǎng)基。大米和小米常用作霉菌孢子培養(yǎng)基,因為它們含氮量少,疏松、表面積大,所以是較好孢子培養(yǎng)基。大米培養(yǎng)基的水分需控制在21%-50%,而曲房空氣濕度需控制在90%-靠前。
培養(yǎng)基的實驗室制備:①概述:培養(yǎng)基和試劑的滅菌通常采用濕熱滅菌或過濾滅菌。有些培養(yǎng)基無需高壓滅菌,可煮滅菌。如,含亮綠的腸道菌培養(yǎng)基對光和熱特別敏感,應(yīng)在煮沸后快速冷卻,避光保存。同樣,一些試劑則不需要滅菌,直接使用(參見相關(guān)標(biāo)準(zhǔn)或生產(chǎn)廠商的使用說明)。②濕熱滅菌;p濕熱滅菌在高壓鍋或培養(yǎng)基制備器中進行。高壓霉菌一般采用121℃±3℃霉菌15min。如果培養(yǎng)基的體積超過1000mL,要對滅菌條件進行適當(dāng)?shù)恼{(diào)整。所有操作均要按照標(biāo)準(zhǔn)和使用說明的規(guī)定進行。注:大容量培養(yǎng)基(>1000mL)滅菌時可能會造成過度加熱。加熱后應(yīng)采取適當(dāng)?shù)姆绞嚼鋮s,防止沸溢。這對大容量培養(yǎng)基和敏感性培養(yǎng)基(如含亮綠的培養(yǎng)基)是非常重要的。培養(yǎng)基制備器微生物細胞組成元素的調(diào)查或分析,是設(shè)計培養(yǎng)基時的重要參考依據(jù)。
培養(yǎng)基的配置應(yīng)該注意的幾大步驟:常用玻璃儀器的準(zhǔn)備制備培養(yǎng)基所用的吸管、錐形瓶、毛細吸管、平皿等玻璃儀器用前要用肥皂水洗刷后用清水沖洗干凈,晾干后備用。(1)平皿用紙或布包好,或裝在金屬盒內(nèi),于121℃高壓蒸汽菌3min后烘干,備用。(2)試管管口用棉花塞或硅氟塑料試管塞塞好,再用布或報紙包扎好,121℃高壓蒸汽滅菌20℃后烘干,備用。(3)吸管及滴管先用少許棉花塞于吸口端(防止污染物吸出,或橡皮帽內(nèi)的氣體污染),然后用紙包后或裝入金屬吸管筒內(nèi),于121℃高壓蒸汽滅菌20min后烘干,備用。其他玻璃器皿均應(yīng)按上法處理,也應(yīng)裝金屬筒內(nèi)160℃干熱滅菌2h后,備用。一般培養(yǎng)基在受熱、吸潮后,易被細菌污染或分解變質(zhì),因此一般培養(yǎng)基必須防潮、避光、陰涼處保存。甘肅培養(yǎng)基滅菌 培養(yǎng)基制備器
強力磁力攪拌培養(yǎng)基在內(nèi)腔里混合的均勻性得到確保,并避免凝結(jié)。安徽全自動培養(yǎng)基制備器
培養(yǎng)基制備的基本方法和注意事項:1、培養(yǎng)基配方的選定:同一種培養(yǎng)基的配方在不同著作中常會有某些差別。因此,除所用的是標(biāo)準(zhǔn)方法,應(yīng)嚴(yán)格按其規(guī)定進行配制外,一般均應(yīng)盡量收集有關(guān)資料,加以比較核對,再依據(jù)自己的使用目的,加以選用,記錄其來源。2、培養(yǎng)基的制備記錄:每次制備培養(yǎng)基均應(yīng)有記錄,包括培養(yǎng)基名稱,配方及其來源,和各種成份的牌號,較終pH值、消毒的溫度和時間制備的日期和制備者等,記錄應(yīng)復(fù)制一份,原記錄保存?zhèn)洳?,?fù)制記錄隨制好的培養(yǎng)基一同存放、以防發(fā)生混亂。安徽全自動培養(yǎng)基制備器