簡(jiǎn)單制作培養(yǎng)基,需要完成以下幾個(gè)主要步驟:簡(jiǎn)單制作培養(yǎng)基,必須將其過濾并澄清液體介質(zhì)必須完全澄清,普通液體介質(zhì)可用濾紙過濾,濾紙應(yīng)折成折扇狀或漏斗狀,以免濾紙因水力不均而破裂。當(dāng)溫度較高時(shí),培養(yǎng)基可以用干凈的白天鵝絨過濾。新制肉、肝、血、馬鈴薯等濾液,必須用絲絨布過濾,再用濾紙一次又一次地過濾。若過濾方法不能滿足澄清的要求,則應(yīng)采用蛋清過濾。需要對(duì)介質(zhì)分類處理,按培養(yǎng)基及試管內(nèi)其它燒瓶使用的容器、用途分為適當(dāng)。貨運(yùn)量超過每2個(gè)集裝箱3個(gè)容量包裝的要求。封堵也是容器外包,可用防水防潮紙塞紙封堵容器內(nèi)棉。電動(dòng)式裝配機(jī)采用定量很好的重用或半自動(dòng)解。預(yù)處理和預(yù)處理對(duì)滅菌容器的清洗要干燥,滅菌時(shí)要徹底,培養(yǎng)基要干燥。一只小玻璃瓶批培養(yǎng)基被檢測(cè)出,培養(yǎng)基被一批pH批作為該值基準(zhǔn)時(shí),應(yīng)被分成20mL的培養(yǎng)基進(jìn)行消毒處理。全自動(dòng)培養(yǎng)基制備儀主要特點(diǎn):力攪拌,確保培養(yǎng)基受熱均勻,營(yíng)養(yǎng)均一。江蘇培養(yǎng)基制備器
滅菌:分裝好的培養(yǎng)基應(yīng)立即進(jìn)行滅菌。滅菌的方法種類如下:1.高壓蒸汽滅菌法:大多數(shù)熱培養(yǎng)基都可用此法,小量分裝時(shí),用121℃、15min;滅菌量大時(shí),用121℃、30min滅菌;含糖類的培養(yǎng)基只能113℃~115℃、15min滅菌,避免糖類遭破壞。2.煮沸滅菌:對(duì)含有不耐高溫物質(zhì)的培養(yǎng)基,可使用此方法。3.過濾除菌:以過濾的方法除菌,用無菌操作技術(shù),定量加入培養(yǎng)基。血液、物品可用無菌操作技術(shù)抽取,加入冷卻到50℃左右的培養(yǎng)基中。培養(yǎng)基含有不耐熱的物質(zhì)時(shí),可用此法。江蘇培養(yǎng)基制備器培養(yǎng)基制備器利用各種動(dòng)、植物或微生物的原料,其成分難以確切知道。
培養(yǎng)基制備基本方法:培養(yǎng)基配方的選定,同一種培養(yǎng)基的配方在不同著作中常會(huì)有某些差別。因此,除所用的是標(biāo)準(zhǔn)方法,應(yīng)嚴(yán)格按其規(guī)定進(jìn)行配制外,一般均應(yīng)盡量收集有關(guān)資料,加以比較核對(duì),再依據(jù)自己的使用目的加以選用,記錄其來源。培養(yǎng)基pH的初步調(diào)整,培養(yǎng)基各成分完全溶解后,應(yīng)進(jìn)行pH的初步調(diào)正,因培養(yǎng)基在加熱消毒過程中、pH會(huì)有所變化,例如,牛肉浸液約可降低pH0.2。而腸浸液pH卻會(huì)有明顯的升高。因此,對(duì)這個(gè)步驟,操作者應(yīng)隨時(shí)注意探索經(jīng)驗(yàn)、以期能掌握培養(yǎng)基的很終pH,保證培養(yǎng)基的質(zhì)量。pH調(diào)正后,還應(yīng)將培養(yǎng)基煮沸數(shù)分鐘,以利培養(yǎng)基沉淀物的析出。
配制培養(yǎng)基應(yīng)遵循的幾個(gè)原則:1、目的明確:培養(yǎng)不同的微生物必須采用不同的培養(yǎng)條件;培養(yǎng)目的不同,原料的選擇和配比不同;2、營(yíng)養(yǎng)協(xié)調(diào):微生物細(xì)胞組成元素的調(diào)查或分析,是設(shè)計(jì)培養(yǎng)基時(shí)的重要參考依據(jù),微生物細(xì)胞內(nèi)各種成分間有一較穩(wěn)定的比例。3、理化適宜:指培養(yǎng)基的pH值、滲透壓、水活度和氧化還原電勢(shì)等物理化學(xué)條件較為適宜。4、經(jīng)濟(jì)節(jié)約:配制培養(yǎng)基時(shí)應(yīng)盡量利用廉價(jià)且易于獲得的原料作為培養(yǎng)基成份,特別是在發(fā)酵工業(yè)中,以降低生產(chǎn)成本。全自動(dòng)培養(yǎng)基制備儀主要特點(diǎn):儀器蓋設(shè)計(jì)保護(hù)鎖,超過100度自動(dòng)加鎖,使實(shí)驗(yàn)環(huán)境更安全。
濕熱滅菌:濕熱滅菌在高壓鍋或培養(yǎng)基制備器中進(jìn)行,高壓滅菌一般采用121℃±3℃滅菌15min,具體培養(yǎng)基按食品微生物學(xué)檢驗(yàn)標(biāo)準(zhǔn)中的規(guī)定進(jìn)行滅菌。培養(yǎng)基體積不應(yīng)超過1000mL,否則滅菌時(shí)可能會(huì)造成過度加熱。所有的操作應(yīng)按照標(biāo)準(zhǔn)或使用說明的規(guī)定進(jìn)行。滅菌效果的控制是關(guān)鍵問題。加熱后采用適當(dāng)?shù)姆绞嚼鋮s,以防加熱過度。這對(duì)于大容量和敏感培養(yǎng)基十分重要,例如含有煌綠的培養(yǎng)基。過濾除菌:過濾除菌可在真空或加壓的條件下進(jìn)行。使用孔徑為0.2μm的無菌設(shè)備和濾膜。消毒過濾設(shè)備的各個(gè)部分或使用預(yù)先消毒的設(shè)備。一些濾膜上附著有蛋白質(zhì)或其他物質(zhì)(如物品),為了達(dá)到有效過濾,應(yīng)事先將濾膜用無菌水潤(rùn)濕。有的培養(yǎng)基還含有素和色素,用于單種微生物培養(yǎng)和鑒定。江蘇培養(yǎng)基制備器
液體培養(yǎng)基,固體培養(yǎng)基的對(duì)應(yīng)詞,是微生物或動(dòng)植物細(xì)胞的液狀培養(yǎng)基。江蘇培養(yǎng)基制備器
加棉塞:分裝完畢后,需要用棉塞堵住管口或瓶口。堵棉塞的主要目的是過濾空氣,避免污染。棉塞應(yīng)采用普通新鮮、干燥的棉花制作,不要用脫脂棉,以免因脫脂棉吸水使棉塞無法使用。制作棉塞時(shí),要根據(jù)棉塞大小將棉花鋪展成適當(dāng)厚度,揪取手掌心大小一塊,鋪在左手拇指與食指圈成的圓孔中,用右手食指插入棉花中部,同時(shí)左手食指與姆指稍稍緊握,就會(huì)形成1個(gè)長(zhǎng)棒形的棉塞。棉塞作成后,應(yīng)迅速塞入管口或瓶口中,棉塞應(yīng)緊貼內(nèi)壁不留縫隙,以防空氣中微生物沿皺折侵入。棉塞不要過緊過松,塞好后,,以手提棉塞、管、瓶不下落為合適。棉塞的2/3應(yīng)在管內(nèi)或瓶?jī)?nèi),上端露出少許棉花便于拔取。塞好棉塞的試管和錐形瓶應(yīng)蓋上厚紙用繩捆札,準(zhǔn)備滅菌。江蘇培養(yǎng)基制備器