常用培養(yǎng)基的制備及注意事項一、實驗?zāi)康牧私馀囵B(yǎng)基的配制原理；掌握配制培養(yǎng)基的一般方法和步驟；了解常見滅菌、清毒基本原理及方法；掌握干熱天菌、高壓蒸汽滅菌及過濾除菌的操作方法。二、實驗原理培養(yǎng)基是人工按一定比例配制的供微生物生長繁殖和合成代謝產(chǎn)物所需要的營養(yǎng)物質(zhì)的混合物。培養(yǎng)基的原材料可分為碳源、氮源、無機(jī)鹽、生長因素和水。根據(jù)微生物的種類和實驗?zāi)康牟煌囵B(yǎng)基也有不同的種類和配制方法。牛肉膏蛋白胨培養(yǎng)基是一種應(yīng)用較普遍和較普通的細(xì)菌基礎(chǔ)培養(yǎng)基，有時又稱為普通培養(yǎng)基。由于這種培養(yǎng)基中含有一般細(xì)胞生長繁殖所需要的較基本的營養(yǎng)物質(zhì)，所以可供微生物生長繁殖之用。干熱天菌、高壓蒸汽滅菌方法主要是通過升溫使蛋白質(zhì)變性從而達(dá)到殺死微生物的效果。培養(yǎng)基制備器鋁制表面光滑平坦;易于清潔，無孔隙和裂縫，以防培養(yǎng)基流進(jìn)去。陜西培養(yǎng)基制備器多少錢

制作斜面培養(yǎng)基和平板培養(yǎng)基：培養(yǎng)基滅菌后，如制作斜面培養(yǎng)基和平板培養(yǎng)基，須趁培養(yǎng)基未凝固時進(jìn)行。(1)制作斜面培養(yǎng)基。在實驗臺上放1支長0.5-1米左右的木條,厚度為1厘米左右，將試管頭部枕在木條上，使管內(nèi)培養(yǎng)基自然傾斜，凝固后即成斜面培養(yǎng)基。(2)制作平板培養(yǎng)基。將剛剛滅過菌的盛有培養(yǎng)基的錐形瓶和培養(yǎng)皿放在實驗臺上，點燃酒精燈，右手托起錐形瓶瓶底，左手拔下棉塞，將瓶口在酒精燈上稍加灼燒，左手打開培養(yǎng)皿蓋，右手迅速將培養(yǎng)基倒入培養(yǎng)皿中，每皿約倒入10毫升，以鋪滿皿底為度。鋪放培養(yǎng)基后放置15分鐘左右，待培養(yǎng)基凝固后，再5個培養(yǎng)皿一疊，倒置過來，平放在恒溫箱里，24小時后檢查，如培養(yǎng)基末長雜菌，即可用來培養(yǎng)微生物。陜西培養(yǎng)基制備器多少錢在配制用于觀察和定量測定微生物生長狀況的合成培養(yǎng)基時，常需在培養(yǎng)基中加入少量螯合劑。

培養(yǎng)基制備程序：全自動培養(yǎng)基制備器可以快速的準(zhǔn)備好滅菌，放入滅菌鍋，“水套系統(tǒng)”里加入夾層水（滅菌鍋與滅菌鍋腔體之間的夾套水用于有效的熱傳導(dǎo)），加入培養(yǎng)基原料，準(zhǔn)備啟動滅菌程序。培養(yǎng)基可以直接在培養(yǎng)基制備器內(nèi)懸浮溶解。強(qiáng)力磁力攪拌培養(yǎng)基在內(nèi)腔里混合的均勻性得到確保，并避免凝結(jié)。培養(yǎng)基還可以選擇使用水浴模式預(yù)先溶解。沒有經(jīng)過專門培訓(xùn)的人員由于直觀的圖形化界面也能夠簡單的進(jìn)行操作。用戶對于多達(dá)50個滅菌參數(shù)可以自定義設(shè)置，它們可以被儲存起來并隨時調(diào)用。

消毒與滅菌的區(qū)別：消毒指使用較為溫和的物理或化學(xué)方法單殺死物體表面或內(nèi)部一部分對人體有害的微生物（不包括芽孢和孢子）。消毒方法常用煮沸消毒法，巴氏消毒法（對于一些不耐高溫的液體）還有化學(xué)藥劑（如酒精、氯氣、石炭酸等）消毒、紫外線消毒。滅菌則是指使用強(qiáng)烈的理化因素殺死物體內(nèi)外所有的微生物，包括芽孢和孢子。滅菌方法有灼燒滅菌、干熱滅菌、高壓蒸汽滅菌。滅菌方法：①接種環(huán)、接種針、試管口等使用灼燒滅菌法；②玻璃器皿、金屬用具等使用干熱滅菌法，所用器械是干熱滅菌箱；③培養(yǎng)基、無菌水等使用高壓蒸汽滅菌法，所用器械是高壓蒸汽滅菌鍋。④表面滅菌和空氣滅菌等使用紫外線滅菌法，所用器械是紫外燈。培養(yǎng)基制備器血清的熱滅活非常容易造成沉淀物的增多，若非必要，可以無須做此步驟。

血清解凍后發(fā)現(xiàn)有絮狀沉淀物出現(xiàn)，該如何處理：血清中沉淀物的出現(xiàn)有許多種原因，但好普遍的原因是由于血清中脂蛋白的變性所造成的，而血纖維蛋白（形成凝血的蛋白之一）在血渭解凍后，也會存在于血清中，亦是造成沉淀物的主要原因之一。但這些絮狀沉淀物并不影響血清本身的質(zhì)量。若想去除這些絮狀沉淀物，可以將血清分裝至無菌離心管內(nèi)，以400g稍微離心，上清液即可接著加入培養(yǎng)基內(nèi)一起過濾。不建議以過濾的方法去除這些絮狀沉淀物，因為它可能會阻塞過濾膜。何謂熱滅活：一般是以56℃,30分鐘來處理已解凍的血清，因為此加熱步驟可以使補體去活化，而補體所參與的反應(yīng)有：溶細(xì)胞活性，平滑肌的收縮，肥大細(xì)胞和血小板組胺的釋放，增強(qiáng)吞噬作用，淋巴細(xì)胞、巨噬細(xì)胞的趨化和啟動。要根據(jù)不同微生物的營養(yǎng)需求選擇適宜的營養(yǎng)物質(zhì)，配制針對性強(qiáng)的培養(yǎng)基。陜西培養(yǎng)基制備器多少錢

全自動培養(yǎng)基制備儀主要特點：容器可自行拆卸更換和消毒，操作方便。陜西培養(yǎng)基制備器多少錢

微生物檢驗培養(yǎng)基制備的要點：培養(yǎng)基溶化，將中海培養(yǎng)基納入燒杯容器中，加小適量的水，緩慢加水并用玻璃棒小幅度攪拌。倘若培養(yǎng)基中不含瓊脂，則不需要對培養(yǎng)基加熱；相反含有瓊脂，就需要用本生燈/電磁爐加熱煮沸。待培養(yǎng)基完全溶解后再加入適量的水?dāng)嚢杈鶆?。如?zhǔn)備的北京中海培養(yǎng)基較多，在不銹鋼鍋中融化加熱，可以用溫水加熱，需不停攪拌，防止焦化。如果不小心出現(xiàn)焦化現(xiàn)象，則制備好的培養(yǎng)基將無法使用，必須重新配制中海生物培養(yǎng)基。不要使用銅或鐵容器溶解制備培養(yǎng)基，因為銅或鐵容器可能會導(dǎo)致容器內(nèi)培養(yǎng)基中銅、鐵超標(biāo)，影響實驗結(jié)果，其中培養(yǎng)基中銅含量大于0.3毫克每升，細(xì)菌不適宜生長。鐵含量超過0.14毫克每升，防止細(xì)菌產(chǎn)生有毒的。容易發(fā)生反應(yīng)和沉淀的藥物應(yīng)單獨溶解，然后加入培養(yǎng)基中，如磷酸氫二鉀和硫酸鎂。陜西培養(yǎng)基制備器多少錢