牛肉膏蛋白胨液體培養(yǎng)基(又稱營養(yǎng)肉湯,用于培養(yǎng)細菌):成分:牛肉膏3g、蛋白胨10g、NaCl5g,蒸餾水(或去離子水)1000mL,pH7.4士0.2。制法:將各成分溶解于水中,于20~25℃條件下以1mol/LNaOH溶液用pH計校正pH7.4,分裝三角瓶(裝量以三角瓶容積的1/2~2/3為宜),或試管(分裝量以試管高度的1/4左右為宜),0.1MPa滅菌15~20min后備用。化學(xué)分類:天然培養(yǎng)基指一類利用動、植物或微生物體包括其提取物制成的培養(yǎng)基。如牛肉膏蛋白胨培養(yǎng)基、麥芽汁培養(yǎng)基等。組合培養(yǎng)基又稱為合成培養(yǎng)基或綜合培養(yǎng)基,是一類按微生物的營養(yǎng)要求精確設(shè)計后用多種高純化學(xué)試劑配制成的培養(yǎng)基。如葡萄糖銨鹽培養(yǎng)基、淀粉硝酸鹽培養(yǎng)基等。半組合培養(yǎng)基指一類主要以化學(xué)試劑配制,同時還加有某種或某些天然成分的培養(yǎng)基。例如,馬鈴薯蔗糖培養(yǎng)基。在配制用于觀察和定量測定微生物生長狀況的合成培養(yǎng)基時,常需在培養(yǎng)基中加入少量螯合劑。中國臺灣培養(yǎng)基制備器售后
培養(yǎng)基的分裝:培養(yǎng)基的分裝,應(yīng)按使用的目的和要求,分裝于試管、燒瓶等適當(dāng)容器內(nèi)。分裝量不得超容器裝盛量的2/3。容器口可用墊有防濕紙的棉塞封堵,其外還須用防水紙包扎(現(xiàn)試管一般多有用螺旋蓋者)。分裝時好好能使用半自動或電動的定量分裝器。分裝瓊脂斜面培養(yǎng)基時,分裝量應(yīng)以能形成2/3底層和1/3斜面的量為洽當(dāng)。分裝容器應(yīng)預(yù)先清洗干凈并經(jīng)干烤消毒,以利于培養(yǎng)基的徹底滅菌。每批培養(yǎng)基應(yīng)另外分裝20ml培養(yǎng)基于一小玻璃瓶中,隨該批培養(yǎng)基同時滅菌,以為測定該批培養(yǎng)基好終pH之用。黑龍江Systec培養(yǎng)基制備器在發(fā)酵工業(yè)中,培養(yǎng)基用量很大,利用低成本的原料更體現(xiàn)出其經(jīng)濟價值。
培養(yǎng)基制備器-培養(yǎng)基使用規(guī)程:1.目的:規(guī)范本中心微生物實驗室培養(yǎng)基的使用和管理。2.適用范圍,本規(guī)程適用于培養(yǎng)基的儲存、融化和廢棄等。3.職責(zé),3.1檢驗人員:按照本規(guī)程規(guī)范使用培養(yǎng)基、定期檢查培養(yǎng)基是否失效。3.2科室負責(zé)人:負責(zé)指導(dǎo)、監(jiān)督檢驗人員規(guī)范使用培養(yǎng)基。4.使用程序,4.1培養(yǎng)基的儲存,4.1.1除特殊說明和標準規(guī)定,通常情況下基礎(chǔ)培養(yǎng)基(如營養(yǎng)瓊脂培養(yǎng)基)應(yīng)在4℃冰箱中保存不超過3個月,或在室溫(20℃)下保存不超過一個月。
對LST(月桂基硫酸鹽胰蛋白胨肉湯)培養(yǎng)基進行滅菌時,有時發(fā)酵管內(nèi)會有氣泡。為防止發(fā)酵管內(nèi)產(chǎn)生氣泡,可以采取以下幾項措施:(1)小倒管浸滿培養(yǎng)基(不留氣泡)后再加入到盛LST的試管中。(2)滅菌鍋關(guān)閉放氣閥前,將鍋內(nèi)氣體排干凈。(3)試管塞不要塞得太緊(使用硅膠塞的時候),勿使用橡皮塞。(4)不要過早打開滅菌鍋,要等滅菌鍋內(nèi)氣體和溫度都降到與室溫一致或相差不大時再打開滅菌鍋。如果以上情況都做到還有氣泡,可用水做培養(yǎng)基組的對照試驗,若培養(yǎng)基組有氣泡,而對照組沒有氣泡,可確定是培養(yǎng)基自身的原因。微生物只有在營養(yǎng)物質(zhì)濃度及其比例合適時才能良好生長。
基礎(chǔ)培養(yǎng)基各種微生物的營養(yǎng)要求雖不相同,但多數(shù)微生物需要的基本營養(yǎng)物質(zhì)相同。按一般微生物生長繁殖所需要的基本營養(yǎng)物質(zhì)配制的培養(yǎng)基即成為基礎(chǔ)培養(yǎng)基。牛肉膏蛋白胨培養(yǎng)基就是很常用的基礎(chǔ)培養(yǎng)基,它可作為一些特殊培養(yǎng)基的基本成分,再根據(jù)某種微生物的特殊要求,在基礎(chǔ)培養(yǎng)基中添加所需營養(yǎng)物質(zhì)。根據(jù)培養(yǎng)基的特殊用途可分為基礎(chǔ)培養(yǎng)基、加富培養(yǎng)基、選擇培養(yǎng)基和鑒別培養(yǎng)基等?;A(chǔ)培養(yǎng)基:含有細菌生長繁殖所需的基本營養(yǎng)物質(zhì),可供大多數(shù)細菌生長。在牛肉浸液中加入適量的蛋白胨、氯化鈉、磷酸鹽,調(diào)節(jié)pH7.2~7.6,經(jīng)滅菌處理后,即為基礎(chǔ)液體培養(yǎng)基;如再加入0.3%~0.5%的瓊脂,則為基礎(chǔ)半固體培養(yǎng)基;加入1%~2%的瓊脂,則為基礎(chǔ)固體培養(yǎng)基。牛肉膏蛋白胨培養(yǎng)基就是很常用的基礎(chǔ)培養(yǎng)基,它可作為一些特殊培養(yǎng)基的基本成分,再根據(jù)某種微生物的特殊要求,在基礎(chǔ)培養(yǎng)基中添加所需營養(yǎng)物質(zhì)。培養(yǎng)基的不正確制備會導(dǎo)致培養(yǎng)基出現(xiàn)質(zhì)量問題。青海培養(yǎng)基滅菌 培養(yǎng)基制備器
培養(yǎng)基制備器小倒管浸滿培養(yǎng)基(不留氣泡)后再加入到盛LST的試管中。中國臺灣培養(yǎng)基制備器售后
培養(yǎng)基防止污染應(yīng)該注意以下事項:確認工作細胞庫是否被污染,確認毒種工作種子批是否被污染,確認所用培養(yǎng)基及其添加成分(如小牛血清、NaHCO3等)是否被污染,均可用細菌、病菌及支原體無菌試驗來確認并排除。同時要對無菌試驗培養(yǎng)基的靈敏度進行驗證。實際生產(chǎn)中,可以從配制好的培養(yǎng)液中取少量加入營養(yǎng)瓊脂于恒溫培養(yǎng)箱內(nèi)培養(yǎng),48小時即可觀察有無污染。其它:高壓滅菌設(shè)備、過濾除菌設(shè)備均應(yīng)進行驗證,確保滅菌和除菌效果;前者應(yīng)在投產(chǎn)前及其后的每6個月進行驗證,后者應(yīng)在每次除菌前、后進行驗證工作(至少應(yīng)在除菌后進行一次)。另外,應(yīng)將有毒區(qū)與無毒區(qū)嚴格分開,并有各自自立的空氣凈化系統(tǒng)及孵室,有毒區(qū)對無毒區(qū)應(yīng)保持相對負壓,防止病毒對培養(yǎng)細胞(尤其是細胞庫)的污染。中國臺灣培養(yǎng)基制備器售后