培養(yǎng)基各成份的混合和溶化：培養(yǎng)基所用化學(xué)藥品均應(yīng)是化學(xué)純的。使用的蒸煮鍋不得為銅鍋或鐵鍋，以防有微量銅或鐵混入培養(yǎng)基中，使細(xì)菌不易生長(zhǎng)。好好使用不銹鋼鍋加熱溶化．也可放入大燒杯或大燒瓶中置高壓蒸汽滅菌器或流動(dòng)蒸汽消毒器中蒸煮溶化。在鍋中溶化時(shí)、可先用溫水加熱并隨時(shí)擾動(dòng)，以防焦化、如發(fā)現(xiàn)有焦化現(xiàn)象、該培養(yǎng)基即不能使用，應(yīng)重新制備。待大部分固體成分溶化后，再用較小火力使所有成分完全溶化．迄至煮沸。如為瓊脂培養(yǎng)基，應(yīng)先用一部分水將瓊脂溶化，用另一部分水溶化其它成分，然后將兩溶液充分混合。在加熱溶化過程中，因蒸發(fā)而丟失的水分，較后必須加以補(bǔ)足。培養(yǎng)基由于富含營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)，易被污染或變質(zhì)。中國(guó)香港Systec培養(yǎng)基制備器

高壓滅菌造成培養(yǎng)基結(jié)焦焦化問題：在實(shí)驗(yàn)過程中，檢測(cè)人員發(fā)現(xiàn)在高壓滅菌后的培養(yǎng)基有結(jié)焦焦化現(xiàn)象。微生物認(rèn)為造成這種現(xiàn)象是：控制培養(yǎng)基在容器中不要超過百分之八十，避免填充過多。注意控制高壓滅菌時(shí)間過長(zhǎng)（115-116度）二十分鐘即可，溫度不超過121度，而且滅菌后的培養(yǎng)基在高溫環(huán)境中不要長(zhǎng)時(shí)間存放。以上原因都會(huì)導(dǎo)致培養(yǎng)基結(jié)焦焦化。貯存：培養(yǎng)基在30℃下放置1天，無污染的即可使用。一般用牛皮紙包裹好存放于2-8℃冰箱中備用。浙江Systec培養(yǎng)基制備器對(duì)一些需嚴(yán)格滅菌的培養(yǎng)基（如組織培養(yǎng)基），較長(zhǎng)時(shí)間的貯存，必須放在3~6℃的冰箱內(nèi)。

高層斜面：制備高層斜面分裝于試管，約占試管容積的1/3，滅菌后趁熱放置成高層短斜面，待其凝固后應(yīng)用。分裝好的培養(yǎng)基或緩沖液等及時(shí)密封后必須在配制當(dāng)天（2h內(nèi)較佳）進(jìn)行滅菌處理。液體、半固體培養(yǎng)基一般在高壓滅前分裝，約裝試管容積的1/3，在滅菌后還要加其他成分的液體、半固體培養(yǎng)基，滅菌后再分裝于滅菌試管或錐形瓶中。通過無菌技術(shù)為測(cè)試制備的每一批培養(yǎng)基其PH在放冷至室溫（25°）后，都應(yīng)測(cè)定。一個(gè)扁平的pH計(jì)用于培養(yǎng)基表面pH值的測(cè)定，浸入式的pH計(jì)用于液體的測(cè)定。各供應(yīng)商提供的培養(yǎng)基的pH應(yīng)該在規(guī)定的±0.2的范圍內(nèi)，除非通過驗(yàn)證得到更寬的范圍。

培養(yǎng)基的制備：正確制備培養(yǎng)基時(shí)微生物檢驗(yàn)的較基礎(chǔ)步驟之一。使用脫水培養(yǎng)基和其他成分，尤其是含有有毒物質(zhì)(如膽鹽或其他選擇劑)的成分時(shí),應(yīng)遵守良好實(shí)驗(yàn)室規(guī)范和生產(chǎn)廠商提供的使用說明。培養(yǎng)基的不正確制備會(huì)導(dǎo)致培養(yǎng)基出現(xiàn)質(zhì)量問題。使用商品化脫水合成培養(yǎng)基制備培養(yǎng)基時(shí)，應(yīng)嚴(yán)格按照廠商提供的使用說明配置。記錄所有相關(guān)數(shù)據(jù)，如質(zhì)量/體積、pH、制備日期、滅菌條件和制備人員等。使用各別成分制備培養(yǎng)基時(shí),應(yīng)按照配方準(zhǔn)確配制,記錄所有細(xì)節(jié)信息,如;培養(yǎng)基名稱和類型及試劑級(jí)別、每個(gè)成分物質(zhì)含量、制造商、批號(hào)、pH、培養(yǎng)基體積(分裝體積)、無菌措施(包括實(shí)施的方式、溫度及時(shí)間)、配置日期、人員等,以便潮源。培養(yǎng)基的實(shí)驗(yàn)室制備：正確制備培養(yǎng)基時(shí)微生物檢驗(yàn)的較基礎(chǔ)步驟之一。

培養(yǎng)基的購(gòu)置：從培養(yǎng)基自身的質(zhì)量來看，不同生產(chǎn)廠家的產(chǎn)品，甚至同一廠家不同批號(hào)的產(chǎn)品都會(huì)存在差異。對(duì)培養(yǎng)基的供應(yīng)企業(yè)進(jìn)行評(píng)價(jià)后選擇合格的供應(yīng)商，這是培養(yǎng)基購(gòu)買過程中重要的步驟。應(yīng)選擇產(chǎn)品市場(chǎng)信譽(yù)度高、有質(zhì)量保證能力和服務(wù)保證能力的企業(yè);企業(yè)是否通過了質(zhì)量管理體系的認(rèn)證是較為客觀的評(píng)價(jià)指標(biāo)。要求生產(chǎn)企業(yè)提供：培養(yǎng)基成分名稱及產(chǎn)品編號(hào)、批號(hào)、使用前的pH、儲(chǔ)藏信息和有效期、性能評(píng)價(jià)和所用測(cè)試菌株、技術(shù)數(shù)據(jù)清單、質(zhì)控證書以及必要的安全/危害數(shù)據(jù)等材料。制備培養(yǎng)基的操作要點(diǎn)：固體培養(yǎng)基在液體培養(yǎng)基中加入適量的凝固劑即成固體培養(yǎng)基。自動(dòng)攪拌培養(yǎng)基制備器哪家好

培養(yǎng)基制備器血清的熱滅活非常容易造成沉淀物的增多，若非必要，可以無須做此步驟。中國(guó)香港Systec培養(yǎng)基制備器

倒平板:滅菌溶化的培養(yǎng)基冷卻到50℃左右后，倒入無菌干燥的培養(yǎng)皿中。培養(yǎng)基的溫度不能過高，否則容易在培養(yǎng)皿的內(nèi)蓋上形成太多的冷凝水；溫度太低，培養(yǎng)基又容易凝固成塊，無法制成平板。倒平板時(shí)，應(yīng)在靠近酒精燈火焰進(jìn)行，以免外界的雜菌落入平板內(nèi)，左手拿培養(yǎng)皿，右手拿三角瓶的底部，用左手的小指和手掌部位把三角瓶的棉塞拔下，灼燒瓶口，用大拇指和食指把培養(yǎng)皿蓋打開一條縫，至瓶口剛好伸入，倒入培養(yǎng)基，以鋪滿底為限，不超過培養(yǎng)皿高度的三分之一，迅速蓋好蓋，放在桌面上，輕輕地轉(zhuǎn)動(dòng)培養(yǎng)皿，使培養(yǎng)基分布均勻，冷凝后即可。中國(guó)香港Systec培養(yǎng)基制備器