配制培養(yǎng)基的原則:根據(jù)培養(yǎng)目的需要選擇適宜的營養(yǎng)物質(zhì)。由于微生物營養(yǎng)類型復(fù)雜,不同微生物有不同的營養(yǎng)要求。因此,要根據(jù)不同微生物的營養(yǎng)需求選擇適宜的營養(yǎng)物質(zhì),配制針對性強(qiáng)的培養(yǎng)基。自養(yǎng)微生物有較強(qiáng)的合成能力,能以簡單的無機(jī)物如co2和無機(jī)鹽合成復(fù)雜的細(xì)胞物質(zhì)。因此,培養(yǎng)自養(yǎng)微生物的培養(yǎng)基應(yīng)由簡單的無機(jī)物組成。異養(yǎng)微生物的合成能力較弱,不能以CO2作為碳源或主要碳源,故應(yīng)在培養(yǎng)基中至少添加一種有機(jī)物。注意營養(yǎng)物質(zhì)的濃度與配比要合適:微生物只有在營養(yǎng)物質(zhì)濃度及其比例合適時才能良好生長。營養(yǎng)物質(zhì)濃度過低不能滿足現(xiàn)生長需要,過高又抑制其生長。例如,適量的蔗糖是異養(yǎng)微生物的良好碳源和能源,但高濃度蔗糖則抑制菌體生長。金屬離子是微生物生長所不可缺少的礦質(zhì)養(yǎng)分,但濃度擴(kuò)大,尤其是重金屬離子,反而抑制其生長,甚至產(chǎn)生殺菌作用。培養(yǎng)基一般都含有碳水化合物、含氮物質(zhì)、無機(jī)鹽(包括微量元素)以及維生素和水等。遼寧不銹鋼內(nèi)桶培養(yǎng)基制備器
在制備培養(yǎng)基時,通常要考慮以下因素:1.緩沖能力碳算鹽緩沖系統(tǒng)由于毒性小、成本低、對培養(yǎng)物有營養(yǎng)作用,因此比其他緩沖系統(tǒng)用得多。在pH值條件下的緩沖能力差。2.滲透壓多數(shù)培養(yǎng)細(xì)胞對滲透壓有很寬的耐受范圍,一般常用冰點降低或蒸汽壓升高測定。如果自己配培養(yǎng)基,可通過測定滲透壓防止3.粘度培養(yǎng)基的粘度主要受血清含量的影響,在多數(shù)情況下,對細(xì)胞生長沒有什么影響。在攪拌條件下,用羧甲基纖維素增加培養(yǎng)基的粘度,可減輕細(xì)胞損害。這對在低血清濃度或無血清下條件下培養(yǎng)細(xì)胞顯得尤為重要。貴州培養(yǎng)基制備器培養(yǎng)基制備器小倒管浸滿培養(yǎng)基(不留氣泡)后再加入到盛LST的試管中。
培養(yǎng)基配置原則:選擇適宜的營養(yǎng)物質(zhì),總體而言,所有微生物生長繁殖均需要培養(yǎng)基含有碳源、氮源、無機(jī)鹽、生長因子、水及能源,但由于微生物營養(yǎng)類型復(fù)雜,不同微生物對營養(yǎng)物質(zhì)的需求是不一樣的,因此首先要根據(jù)不同微生物的營養(yǎng)需求配制針對性強(qiáng)的培養(yǎng)基。自養(yǎng)型微生物能從簡單的無機(jī)物合成自身需要的糖類、脂類、蛋白質(zhì)、核酸、維生素等復(fù)雜的有機(jī)物,因此培養(yǎng)自養(yǎng)型微生物的培養(yǎng)基完全可以(或應(yīng)該)由簡單的無機(jī)物組成。在該培養(yǎng)基配制過程中并未專門加入其他碳源物質(zhì),而是依靠空氣中和溶于水中的CO2為氧化硫硫桿菌提供碳源。就微生物主要類型而言,有細(xì)菌、放線菌、酵母菌、霉菌、原生動物、藻類及病毒之分,培養(yǎng)它們所需的培養(yǎng)基各不相同。在實驗室中常用牛肉膏蛋白胨培養(yǎng)基(或簡稱普通肉湯培養(yǎng)基)培養(yǎng)細(xì)菌,用高氏I號合成培養(yǎng)基培養(yǎng)放線菌,培養(yǎng)酵母菌一般用麥芽汁培養(yǎng)基,培養(yǎng)霉菌則一般用查氏合成培養(yǎng)基。
培養(yǎng)基的滅菌:一般培養(yǎng)基可采用121°C高壓蒸汽滅菌15分鐘的方法。在各種培養(yǎng)基制備方法中,如無特殊規(guī)定,即可用此法滅菌。某些熱敏成分,如糖類,應(yīng)另行配成20%或更高的濃液,以過濾或間歇滅菌法消毒,以后再用無菌操作技術(shù)、定量加于培養(yǎng)基。明膠培養(yǎng)基亦應(yīng)用較低溫度滅菌。血液、體液和等則應(yīng)以無菌操作技術(shù)抽取和加入于經(jīng)冷卻約50°C左右的培養(yǎng)基中。瓊脂斜面培養(yǎng)基應(yīng)在滅菌后立即取出,冷至55℃-60℃時,擺置成適當(dāng)斜面,待其自然凝固。液體培養(yǎng)基在靜止的條件下,在菌體或培養(yǎng)細(xì)胞的周圍,形成透過養(yǎng)分的壁障,養(yǎng)分的攝入受到阻礙。
培養(yǎng)基是人工配制的供人們進(jìn)行培養(yǎng)、分離、鑒別微生物的營養(yǎng)基質(zhì)。市面上專門自動培養(yǎng)基平皿分裝器一般適用于大量平板分裝,其分裝速度可以達(dá)到每小時幾百個平板以上,不適于實驗室小規(guī)模分裝用。目前實驗室培養(yǎng)基的配制及分裝是先將它置于搪瓷杯或燒杯內(nèi)加熱溶解、溶化,然后再將手工培養(yǎng)基分次倒入漏斗分裝至試管中,應(yīng)用此裝置不能批量、定量分裝,易污染,分裝工作常需反復(fù)多次,耗時費力,效率低下。本實用新型所要解決的技術(shù)問題是,針對現(xiàn)有技術(shù)中培養(yǎng)基分裝器存在操作復(fù)雜、分裝效率低、易污染等缺陷,提供一種易操作、分裝效率高且安全衛(wèi)生的培養(yǎng)基分裝器。全自動培養(yǎng)基制備儀主要特點:容器可自行拆卸更換和消毒,操作方便。貴州培養(yǎng)基制備器
培養(yǎng)基的不正確制備會導(dǎo)致培養(yǎng)基出現(xiàn)質(zhì)量問題。遼寧不銹鋼內(nèi)桶培養(yǎng)基制備器
制作牛肉膏蛋白胨固體培養(yǎng)基:(1)方法步驟:計算、稱量、溶化、滅菌、倒平板。(2)倒平板操作的步驟:①將滅過菌的培養(yǎng)皿放在火焰旁的桌面上,右手拿裝有培養(yǎng)基的錐形瓶,左手拔出棉塞。②右手拿錐形瓶,將瓶口迅速通過火焰。③用左手的拇指和食指將培養(yǎng)皿打開一條稍大于瓶口的縫隙,右手將錐形瓶中的培養(yǎng)基(約10~20mL)倒入培養(yǎng)皿,左手立即蓋上培養(yǎng)皿的皿蓋。④等待平板冷卻凝固,大約需5~10min。然后,將平板倒過來放置,使培養(yǎng)皿蓋在下、皿底在上。倒平板操作的討論1.培養(yǎng)基滅菌后,需要冷卻到50℃左右時,才能用來倒平板。你用什么辦法來估計培養(yǎng)基的溫度?提示:可以用手觸摸盛有培養(yǎng)基的錐形瓶,感覺錐形瓶的溫度下降到剛剛不燙手時,就可以進(jìn)行倒平板了。遼寧不銹鋼內(nèi)桶培養(yǎng)基制備器