培養(yǎng)基制備儀:培養(yǎng)基的種類繁多,但制備的方法大同小異,一般可分為6個步驟:用水、稱量、溶解復(fù)水、滅菌、pH測定、保存。1、必須選用專門純凈水或者經(jīng)消毒過后的無菌水。2、培養(yǎng)基進(jìn)行復(fù)水的容器不得用銅鍋或鐵鍋,放置離子混入培養(yǎng)基中,影響微生物的生長。3、容器的體積須大于復(fù)水后培養(yǎng)基總體積的2倍,預(yù)防出現(xiàn)溢出情況。4、在對培養(yǎng)基進(jìn)行加熱時,若培養(yǎng)基內(nèi)含有瓊脂粉成分,則需要將其充分浸泡一段時間。加熱的過程中不斷進(jìn)行攪拌防止出現(xiàn)培養(yǎng)基結(jié)底炭化從而造成成分損害。部分培養(yǎng)基則需要使用沸水進(jìn)行加熱,預(yù)防發(fā)生局部燒焦及沸騰溢出。5、瓊脂類培養(yǎng)基進(jìn)行再融化時應(yīng)使用沸水浴或流動蒸汽進(jìn)行加熱,較多只能加熱兩次,第二次再融化后仍未用完的培養(yǎng)基應(yīng)棄去。6、而當(dāng)對培養(yǎng)基實施滅菌時,需嚴(yán)格按照說明規(guī)范操作。但是也不能盲目按照說明的時間進(jìn)行,需結(jié)合實際情況,合理調(diào)節(jié)滅菌時間,防止出現(xiàn)培養(yǎng)基滅菌過度而造成的成分變性。脫水培養(yǎng)基,又稱預(yù)制干燥培養(yǎng)基,指含有除水分外的一切成分的商品培養(yǎng)基。甘肅不銹鋼內(nèi)桶培養(yǎng)基制備儀
殺毒滅菌方式主要有三種類型:⑴高壓蒸汽滅菌方式,此方法可用于大多數(shù)耐熱培養(yǎng)基。⑵煮沸滅菌法方式:此方法可用于含有不耐高溫物質(zhì)的培養(yǎng)基。⑶過濾除菌方式:過濾除菌,采用無菌技術(shù)定量添加培養(yǎng)基。血液和可以用無菌技術(shù)抽取并加入冷卻至約五十度的培養(yǎng)基中。當(dāng)培養(yǎng)基中含有不耐熱物質(zhì)時可以使用此方法。培養(yǎng)基倒入平板:將滅菌溶化的培養(yǎng)基冷卻至五十度后,倒入無菌干燥的培養(yǎng)皿中。微生物培養(yǎng)基制備的溫度不能太高,否則培養(yǎng)皿內(nèi)蓋容易形成過多的冷凝水。江蘇瓊脂滅菌 培養(yǎng)基制備儀培養(yǎng)基一般都含有碳水化合物、含氮物質(zhì)、無機(jī)鹽(包括微量元素)以及維生素和水等。
培養(yǎng)基的類型:1、根據(jù)對培養(yǎng)基組成物質(zhì)的化學(xué)成分是否完全了解來區(qū)分,可以將培養(yǎng)基分為天然培養(yǎng)基、合成培養(yǎng)基和半合成培養(yǎng)基。(1)天然培養(yǎng)基:天然培養(yǎng)基是指利用各種動、植物或微生物的原料,其成分難以確切知道。用作這種培養(yǎng)基的主要原料有:牛肉膏、麥芽汁、蛋白胨、酵母膏、玉米粉、麩皮、各種餅粉、馬鈴薯、牛奶、血清等。用這些物質(zhì)配成的培養(yǎng)基雖然不能確切知道它的化學(xué)成分,但一般來講,營養(yǎng)是比較豐富的,微生物生長旺盛,而且來源多方面,配制方便,所以較為常用,尤其適合于配制實驗室常用的培養(yǎng)基。這種培養(yǎng)基的穩(wěn)定性常受生產(chǎn)廠或批號等因素的影響。(2)合成培養(yǎng)基合成培養(yǎng)基是一類化學(xué)成分和數(shù)量完全知道的培養(yǎng)基,它是用已知化學(xué)成分的化學(xué)藥品配制而成。這類培養(yǎng)基化學(xué)成分精確、重復(fù)性強(qiáng),但價格昂貴,而微生物又生長緩慢,所以它只適用于做一些科學(xué)研究,例如營養(yǎng)、代謝的研究。(3)半合成培養(yǎng)基。
培養(yǎng)基的驗收:購買的培養(yǎng)基到貨后,應(yīng)有專人做好培養(yǎng)基接受和培養(yǎng)基驗收工作,應(yīng)仔細(xì)核對生產(chǎn)企業(yè)提供的關(guān)于培養(yǎng)基資料、培養(yǎng)基名稱、規(guī)格數(shù)量、外觀特征、批號、保質(zhì)期是否符合要求。每批培養(yǎng)基到貨物后都應(yīng)對培養(yǎng)基的質(zhì)量進(jìn)行檢測,滿足檢測方法規(guī)定的要求后方可投入使用。培養(yǎng)基是液體、半固體或固體形式的,含天然或合成成分,用于保證微生物繁殖或保持其活力的物質(zhì)。保存是否得當(dāng)、配制使用是否正確等都直接影響到檢測結(jié)果的準(zhǔn)確性。在發(fā)酵工業(yè)中,培養(yǎng)基用量很大,利用低成本的原料更體現(xiàn)出其經(jīng)濟(jì)價值。
培養(yǎng)基的重要性:培養(yǎng)基的質(zhì)量是微生物實驗室檢測工作的基礎(chǔ),事關(guān)檢測工作的準(zhǔn)確性、可靠性,在微生物實驗室檢測工作中舉足輕重。如果在工作中忽視任何一個環(huán)節(jié)的質(zhì)量問題,都將導(dǎo)致檢驗結(jié)果科學(xué)性、客觀性的偏離。因此,加強(qiáng)培養(yǎng)基的實驗室質(zhì)量控制,認(rèn)真地做好培養(yǎng)基的質(zhì)控工作,不斷完善和提高培養(yǎng)基的質(zhì)控水平,才能為微生物檢測實驗室提供高質(zhì)量的培養(yǎng)基。滅菌,一般培養(yǎng)基采用濕熱滅菌,即高壓蒸汽滅菌。第五,pH測定,微生物必須在適宜的pH范圍內(nèi)才能正常生長繁殖或體現(xiàn)其生物特性。固體培養(yǎng)基根據(jù)性質(zhì)又分為固化培養(yǎng)基、非可逆性固化培養(yǎng)基、天然固態(tài)培養(yǎng)基、濾膜。江蘇瓊脂滅菌 培養(yǎng)基制備儀
培養(yǎng)自養(yǎng)微生物的培養(yǎng)基應(yīng)由簡單的無機(jī)物組成。甘肅不銹鋼內(nèi)桶培養(yǎng)基制備儀
制作牛肉膏蛋白胨固體培養(yǎng)基:(1)方法步驟:計算、稱量、溶化、滅菌、倒平板。(2)倒平板操作的步驟:①將滅過菌的培養(yǎng)皿放在火焰旁的桌面上,右手拿裝有培養(yǎng)基的錐形瓶,左手拔出棉塞。②右手拿錐形瓶,將瓶口迅速通過火焰。③用左手的拇指和食指將培養(yǎng)皿打開一條稍大于瓶口的縫隙,右手將錐形瓶中的培養(yǎng)基(約10~20mL)倒入培養(yǎng)皿,左手立即蓋上培養(yǎng)皿的皿蓋。④等待平板冷卻凝固,大約需5~10min。然后,將平板倒過來放置,使培養(yǎng)皿蓋在下、皿底在上。倒平板操作的討論1.培養(yǎng)基滅菌后,需要冷卻到50℃左右時,才能用來倒平板。你用什么辦法來估計培養(yǎng)基的溫度?提示:可以用手觸摸盛有培養(yǎng)基的錐形瓶,感覺錐形瓶的溫度下降到剛剛不燙手時,就可以進(jìn)行倒平板了。甘肅不銹鋼內(nèi)桶培養(yǎng)基制備儀
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