培養(yǎng)基的類型:1、根據(jù)對培養(yǎng)基組成物質(zhì)的化學成分是否完全了解來區(qū)分,可以將培養(yǎng)基分為天然培養(yǎng)基、合成培養(yǎng)基和半合成培養(yǎng)基。(1)天然培養(yǎng)基:天然培養(yǎng)基是指利用各種動、植物或微生物的原料,其成分難以確切知道。用作這種培養(yǎng)基的主要原料有:牛肉膏、麥芽汁、蛋白胨、酵母膏、玉米粉、麩皮、各種餅粉、馬鈴薯、牛奶、血清等。用這些物質(zhì)配成的培養(yǎng)基雖然不能確切知道它的化學成分,但一般來講,營養(yǎng)是比較豐富的,微生物生長旺盛,而且來源多方面,配制方便,所以較為常用,尤其適合于配制實驗室常用的培養(yǎng)基。這種培養(yǎng)基的穩(wěn)定性常受生產(chǎn)廠或批號等因素的影響。(2)合成培養(yǎng)基合成培養(yǎng)基是一類化學成分和數(shù)量完全知道的培養(yǎng)基,它是用已知化學成分的化學藥品配制而成。這類培養(yǎng)基化學成分精確、重復性強,但價格昂貴,而微生物又生長緩慢,所以它只適用于做一些科學研究,例如營養(yǎng)、代謝的研究。(3)半合成培養(yǎng)基。液體培養(yǎng)基在靜止的條件下,在菌體或培養(yǎng)細胞的周圍,形成透過養(yǎng)分的壁障,養(yǎng)分的攝入受到阻礙。吉林全自動培養(yǎng)基制備儀
培養(yǎng)基的使用:1.瓊脂培養(yǎng)基的融化:將培養(yǎng)基放到沸水浴中或采用其他有相同效果的方法(如高壓鍋中的蒸汽)融化。經(jīng)過高壓滅菌的培養(yǎng)基盡量減少重新加熱的時間,避免過度加熱。培養(yǎng)基融化后立即移開,室溫靜置片刻(約2min),以免玻璃容器發(fā)生破裂。融化后的培養(yǎng)基放入47℃~50℃恒溫水浴鍋中保溫,冷卻到47℃~50℃所需的時間取決于培養(yǎng)基的類型、體積和在水鍋里的分裝量。融化后內(nèi)培養(yǎng)基應盡快使用,放置時間一般不超過4h。剩余的培養(yǎng)基固后不得再次融化使用。特別是靈敏性培養(yǎng)基,應根據(jù)相關標準,縮短融化后放置的時間。吉林全自動培養(yǎng)基制備儀牛肉膏蛋白胨培養(yǎng)基就是很常用的基礎培養(yǎng)基,它可作為一些特殊培養(yǎng)基的基本成分。
培養(yǎng)基制備的九個步驟關注要點:步驟一:稱取數(shù)量:用1/100的電子天平稱出培養(yǎng)基所需的藥物。首先參照配方計算出配制相應培養(yǎng)基需要各成分的數(shù)量,然后用電子天平準確稱取重量。步驟二:培養(yǎng)基溶化:將培養(yǎng)基納入燒杯容器中,加小適量的水,緩慢加水并用玻璃棒小幅度攪拌。倘若培養(yǎng)基中不含瓊脂,則不需要對培養(yǎng)基加熱;相反含有瓊脂,就需要用本生燈/電磁爐加熱煮沸。步驟三:調(diào)培養(yǎng)基pH:雖然培養(yǎng)基中含有緩沖物質(zhì),可以盡量使培養(yǎng)基的pH值保持在標準范圍內(nèi),但如果配制的培養(yǎng)基不能要求,則必須進行必要的調(diào)整。如果您有校準過的pH計,則可以使用pH計。步驟四:培養(yǎng)基過濾:如果對配制的培養(yǎng)基沒有特殊要求,這一步可以省略。步驟五:培養(yǎng)基分裝:準備好的培養(yǎng)基根據(jù)用途不同分為燒瓶、試管等容器,分裝試管量大采用自動分液器,分裝試管量小,可以用漏斗分液。確定這批培養(yǎng)基的較終pH值。步驟六:培養(yǎng)基滅菌處理:分裝完成的培養(yǎng)基應馬上滅菌。
培養(yǎng)基的類型-根據(jù)培養(yǎng)基的用途來區(qū)分,可分為選擇培養(yǎng)基、增殖培養(yǎng)基、鑒別培養(yǎng)基等。1)選擇培養(yǎng)基在培養(yǎng)基中加入某種物質(zhì)以殺死或抑制不需要的菌種生長的培養(yǎng)基,稱之為選擇培養(yǎng)基。如鏈霉素、氯霉素等抑制原核微生物的生長;而制霉菌素、灰黃霉素等能抑制真核微生物的生長;結(jié)晶紫能抑制革蘭氏陽性細菌的生長等。2)增殖培養(yǎng)基在自然界中,不同種的微生物常生活在一起,為了分離我們所需要的微生物,在普通培養(yǎng)基中加入一些某種微生物特別喜歡的營養(yǎng)物質(zhì),以增加這種微生物的繁殖速度,逐漸淘汰其它微生物,這種培養(yǎng)基稱為增殖培養(yǎng)基,這種培養(yǎng)基常用于菌種篩選和選擇增菌中。在某種程度上講,增殖培養(yǎng)基也是一種選擇培養(yǎng)基。3)鑒別培養(yǎng)基在培養(yǎng)基中加入某種試劑或化學藥品,使難以區(qū)分的微生物經(jīng)培養(yǎng)后呈現(xiàn)出明顯差別,因而有助開快速鑒別某種微生物。脫水培養(yǎng)基,又稱預制干燥培養(yǎng)基,指含有除水分外的一切成分的商品培養(yǎng)基。
培養(yǎng)基的分裝:大批量配制時使用的自動分配器須經(jīng)校準和確認。每次使用前后,均要對分配器的管道系統(tǒng)進行沖洗,在分裝無菌培養(yǎng)基前,則要采用無菌硅膠管。固體培養(yǎng)基一般分裝在250ml、500ml錐形瓶中,高壓滅菌后根據(jù)需要分裝平皿或試管。平皿:傾注平皿,應在無菌室中放置3—4h,如用塑料平皿須在35℃培養(yǎng)箱中倒置30—60min。讓水蒸汽自然蒸發(fā)。斜面:制備低層斜面分裝于試管,約占容積1/5,滅菌后趁熱斜放在細玻璃棒和木桿上,使成斜度,分裝使注意管口和瓶塞上勿沾有培養(yǎng)基,如沾有培養(yǎng)基應用布抹去,以避免污染。培養(yǎng)基配成后一般需測試并調(diào)節(jié)pH,還須進行滅菌,通常有高溫滅菌和過濾滅菌。云南瓊脂培養(yǎng)基 培養(yǎng)基制備儀
培養(yǎng)基根據(jù)使用范圍可分為細菌培養(yǎng)基、放線菌培養(yǎng)基、酵母菌培養(yǎng)基、培養(yǎng)基等。吉林全自動培養(yǎng)基制備儀
培養(yǎng)基配制方法:正確制備培養(yǎng)基是微生物檢驗的較基礎步驟之一,使用脫水培養(yǎng)基和其他成分,尤其是含有有毒物質(zhì)(如膽鹽或其他選擇劑)的成分時,應遵守良好實驗室規(guī)范和生產(chǎn)廠商提供的使用說明。培養(yǎng)基的不正確制備會導致培養(yǎng)基出現(xiàn)質(zhì)量問題。使用商品化脫水合成培養(yǎng)基制備培養(yǎng)基時,應嚴格按照廠商提供的使用說明配制。如重量(體積)、pH、制備日期、滅菌條件和操作步驟等。實驗室使用各種基礎成分制備培養(yǎng)基時,應按照配方準確配制,并記錄相關信息,如:培養(yǎng)基名稱和類型及試劑級別、每個成分物質(zhì)含量、制造商、批號、pH、培養(yǎng)基體積(分裝體積)、無菌措施(包括實施的方式、溫度及時間)、配置日期、人員等,以便溯源。吉林全自動培養(yǎng)基制備儀
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