微生物發(fā)酵培養(yǎng)基配制注意事項：①養(yǎng)分濃度和配比合適：微生物只有在培養(yǎng)基中養(yǎng)分濃度合適的情況下才能生長良好是合適的。當養(yǎng)分濃度過低時，不能滿足微生物正常生長的需要。②微生物培養(yǎng)基pH條件控制：培養(yǎng)基的pH必須控制在一定范圍內，以滿足不同種類微生物的生長繁殖或產生代謝物。各種微生物生長繁殖或代謝產物產生的較佳pH條件不同。通常細菌和放線菌適合在7~7.5pH范圍內生長，酵母菌和霉菌一般在4.5~6pH范圍內生長。③微生物培養(yǎng)基原料來源選擇：培養(yǎng)基配制時，應盡可能使用低廉易得的原料作為培養(yǎng)基成分。尤其在發(fā)酵行業(yè)，培養(yǎng)基用量大，使用成本較低原料實現(xiàn)產品附加價值。例如在微生物單細胞蛋白的工業(yè)化生產過程中，制糖業(yè)含蔗糖廢液、乳業(yè)含乳糖廢液、大豆廢液工業(yè)和黑色廢物、造紙工業(yè)中含有戊糖和己糖的亞硫酸鹽紙漿等經常被作為培養(yǎng)基原料使用。④成品培養(yǎng)基滅菌處理、為了獲得微生物的純培養(yǎng)物，必須避免被細菌污染，所以對使用的設備和工作場所進行消毒和消毒。對于微生物培養(yǎng)基要進行嚴格的滅菌處理。液體培養(yǎng)基，80%～90%是水，其中配有可溶性的或不溶性的營養(yǎng)成分的培養(yǎng)基。培養(yǎng)基制備儀定制

培養(yǎng)基的分裝：大批量配制時使用的自動分配器須經校準和確認。每次使用前后，均要對分配器的管道系統(tǒng)進行沖洗，在分裝無菌培養(yǎng)基前，則要采用無菌硅膠管。固體培養(yǎng)基一般分裝在250ml、500ml錐形瓶中，高壓滅菌后根據需要分裝平皿或試管。平皿：傾注平皿，應在無菌室中放置3—4h，如用塑料平皿須在35℃培養(yǎng)箱中倒置30—60min。讓水蒸汽自然蒸發(fā)。斜面：制備低層斜面分裝于試管，約占容積1/5，滅菌后趁熱斜放在細玻璃棒和木桿上，使成斜度，分裝使注意管口和瓶塞上勿沾有培養(yǎng)基，如沾有培養(yǎng)基應用布抹去，以避免污染。黑龍江培養(yǎng)基制備儀安裝調試液體培養(yǎng)基，固體培養(yǎng)基的對應詞，是微生物或動植物細胞的液狀培養(yǎng)基。

培養(yǎng)基的滅菌：一般培養(yǎng)基可采用121°C高壓蒸汽滅菌15分鐘的方法。在各種培養(yǎng)基制備方法中，如無特殊規(guī)定，即可用此法滅菌。某些熱敏成分，如糖類，應另行配成20%或更高的濃液，以過濾或間歇滅菌法消毒，以后再用無菌操作技術、定量加于培養(yǎng)基。明膠培養(yǎng)基亦應用較低溫度滅菌。血液、體液和等則應以無菌操作技術抽取和加入于經冷卻約50°C左右的培養(yǎng)基中。瓊脂斜面培養(yǎng)基應在滅菌后立即取出，冷至55℃-60℃時，擺置成適當斜面，待其自然凝固。

培養(yǎng)基制備的九個步驟關注要點：步驟一：稱取數(shù)量：用1/100的電子天平稱出培養(yǎng)基所需的藥物。首先參照配方計算出配制相應培養(yǎng)基需要各成分的數(shù)量，然后用電子天平準確稱取重量。步驟二：培養(yǎng)基溶化：將培養(yǎng)基納入燒杯容器中，加小適量的水，緩慢加水并用玻璃棒小幅度攪拌。倘若培養(yǎng)基中不含瓊脂，則不需要對培養(yǎng)基加熱；相反含有瓊脂，就需要用本生燈/電磁爐加熱煮沸。步驟三：調培養(yǎng)基pH：雖然培養(yǎng)基中含有緩沖物質，可以盡量使培養(yǎng)基的pH值保持在標準范圍內，但如果配制的培養(yǎng)基不能要求，則必須進行必要的調整。如果您有校準過的pH計，則可以使用pH計。步驟四：培養(yǎng)基過濾：如果對配制的培養(yǎng)基沒有特殊要求，這一步可以省略。步驟五：培養(yǎng)基分裝：準備好的培養(yǎng)基根據用途不同分為燒瓶、試管等容器，分裝試管量大采用自動分液器，分裝試管量小，可以用漏斗分液。確定這批培養(yǎng)基的較終pH值。步驟六：培養(yǎng)基滅菌處理：分裝完成的培養(yǎng)基應馬上滅菌。培養(yǎng)基一般都含有碳水化合物、含氮物質、無機鹽（包括微量元素）以及維生素和水等。

培養(yǎng)基的化學成分包括水、無機鹽、碳源、氮源（生長因子）等。（1）碳源：能為微生物的代謝提供碳元素的物質。如CO2、NaHCO3等無機碳源；糖類、石油、花生粉餅等有機碳源。異養(yǎng)微生物只能利用有機碳源。單質碳不能作為碳源。（2）氮源：能為微生物的代謝提供氮元素的物質。如N2、NH3、NO3-、NH4+（無機氮源）蛋白質、氨基酸、尿素、牛肉膏、蛋白胨（有機氮源）等。只有固氮微生物才能利用N2。培養(yǎng)基還要滿足微生物生長對PH、特殊營養(yǎng)物質以及氧氣的要求。例如，培養(yǎng)乳酸桿菌時需要在培養(yǎng)基中添加維生素，培養(yǎng)霉菌時須將培養(yǎng)基的pH調至酸性，培養(yǎng)細菌是需要將pH調至中性或微堿性，培養(yǎng)厭氧型微生物是則需要提供無氧的條件。異養(yǎng)微生物的合成能力較弱，不能以CO2作為碳源或主要碳源，故應在培養(yǎng)基中至少添加一種有機物。廣東實驗室培養(yǎng)基制備儀

控制培養(yǎng)基的條件，控制培養(yǎng)基的pH配制培養(yǎng)基必須根據微生物的特點調節(jié)pH。培養(yǎng)基制備儀定制

培養(yǎng)基的稱量和溶解：小心稱量所需量的脫水合成培養(yǎng)基（必要時佩戴口罩或在通風柜中操作，以防吸入含有有毒物質的培養(yǎng)基粉末），先加入適量的水，充分混合（注意避免培養(yǎng)基結塊），然后加水至所需的量后適當加熱，并重復或連續(xù)攪拌使其快速分散，必要時應完全溶解。含瓊脂的培養(yǎng)基在加熱前應浸泡幾分鐘。注意：培養(yǎng)基的加熱溶解或高溫滅菌盛放使用的容器不得為銅鍋或鐵鍋，以防有微量銅或鐵混入培養(yǎng)基中，使細菌不易生長。較好使用不銹鋼鍋加熱溶化，可放入大燒杯或大燒瓶中置高壓蒸汽滅菌器或流動蒸汽消毒器中蒸煮溶化。在鍋中溶化時、可先用溫水加熱并隨時攪動、以防焦化、如發(fā)現(xiàn)有焦化現(xiàn)象、該培養(yǎng)基即不能使用，應重新制備。培養(yǎng)基制備儀定制

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