培養(yǎng)基在使用前通過高壓或過濾滅菌。防止污染應(yīng)該注意以下事項(xiàng):確認(rèn)工作細(xì)胞庫是否被污染,確認(rèn)毒種工作種子批是否被污染,確認(rèn)所用培養(yǎng)基及其添加成分(如小牛血清、NaHCO3等)是否被污染,均可用細(xì)菌、及支原體無菌試驗(yàn)來確認(rèn)并排除。同時要對無菌試驗(yàn)培養(yǎng)基的靈敏度進(jìn)行驗(yàn)證。實(shí)際生產(chǎn)中,可以從配制好的培養(yǎng)液中取少量加入營養(yǎng)瓊脂于恒溫培養(yǎng)箱內(nèi)培養(yǎng),48小時即可觀察有無污染。其它:高壓滅菌設(shè)備、過濾除菌設(shè)備均應(yīng)進(jìn)行驗(yàn)證,確保滅菌和除菌效果;前者應(yīng)在投產(chǎn)前及其后的每6個月進(jìn)行驗(yàn)證,后者應(yīng)在每次除菌前、后進(jìn)行驗(yàn)證工作(至少應(yīng)在除菌后進(jìn)行一次)。另外,應(yīng)將有毒區(qū)與無毒區(qū)嚴(yán)格分開,并有各自獨(dú)自的空氣凈化系統(tǒng)及孵室,有毒區(qū)對無毒區(qū)應(yīng)保持相對負(fù)壓,防止病毒對培養(yǎng)細(xì)胞(尤其是細(xì)胞庫)的污染。培養(yǎng)基,是指供給微生物、植物或動物生長繁殖的,由不同營養(yǎng)物質(zhì)組合配制而成的營養(yǎng)基質(zhì)。浙江培養(yǎng)基制備器哪個品牌好
利用三角培養(yǎng)瓶制備培養(yǎng)基:包扎,分裝好后,塞上棉塞,在用牛皮紙將棉塞包裹好,防止滅菌時水份進(jìn)入把棉塞弄濕。滅菌,按配方上要求的溫度、壓力進(jìn)行高壓蒸汽滅菌。如果滅菌的溫度太高,營養(yǎng)成分會被破壞,培養(yǎng)基中的糖、氨基酸會使培養(yǎng)基的顏色變深。擺斜面,滅菌后需要擺斜面的試管要趁熱斜著擺放,使其凝固成為一個斜面,約占試管長度的1/2。貯存,培養(yǎng)基在30℃下放置,無污染的即可使用。一般用牛皮紙包裹好存放于2-8℃冰箱中備用。培養(yǎng)基是細(xì)胞生長的必需營養(yǎng)物質(zhì),利用三角培養(yǎng)瓶制備培養(yǎng)基可按照以上步驟操作,在使用前需確保培養(yǎng)基的無菌性,以免影響細(xì)胞正常繁殖。內(nèi)蒙古瓊脂培養(yǎng)基制備器對一些需嚴(yán)格滅菌的培養(yǎng)基(如組織培養(yǎng)基),較長時間的貯存,必須放在3~6℃的冰箱內(nèi)。
培養(yǎng)基的性能測試:外觀控制:制備好的培養(yǎng)基應(yīng)有相應(yīng)的顏色,一般的培養(yǎng)基應(yīng)澄清、無渾濁、無沉淀。使用前應(yīng)檢查培養(yǎng)基的顏色是否發(fā)生變化,是否蒸發(fā)/脫水。污染控制:從每批制備好的培養(yǎng)基中選取部分進(jìn)行污染測試(空白試驗(yàn)),確定無微生物生長方可使用。同一種培養(yǎng)基的配方在不同著作中常會有某些差別。因此,除所用的是標(biāo)準(zhǔn)方法,應(yīng)嚴(yán)格按其規(guī)定進(jìn)行配制外,一般均應(yīng)盡量收集有關(guān)資料,加以比較核對,再依據(jù)自己的使用目的,加以選用,記錄其來源。每次制備培養(yǎng)基均應(yīng)有記錄,包括培養(yǎng)基名稱,配方及其來源,和各種成份的牌號,很終pH值、消毒的溫度和時間制備的日期和制備者等,記錄應(yīng)復(fù)制一份,原記錄保存?zhèn)洳椋瑥?fù)制記錄隨制好的培養(yǎng)基一同存放、以防發(fā)生混亂。
培養(yǎng)基的類型-根據(jù)培養(yǎng)基的物理狀態(tài)來區(qū)分,可以分為固體培養(yǎng)基、液體培養(yǎng)基和半固體培養(yǎng)基。1)液體培養(yǎng)基所配制的培養(yǎng)基是液態(tài)的,其中的成分基本上溶于水,沒有明顯的固形物,液體培養(yǎng)基營養(yǎng)成分分布均勻,易于控制微生物的生長代謝狀態(tài)。2)固體培養(yǎng)基在液體培養(yǎng)基中加入適量的凝固劑即成固體培養(yǎng)基。常用作凝固劑的物質(zhì)有瓊脂、明膠、硅膠等,以瓊脂較為常用。固體培養(yǎng)基在實(shí)際中用得十分多方面。在實(shí)驗(yàn)室中,它被用作微生物的分離、鑒定、檢驗(yàn)雜菌、計(jì)數(shù)、保藏、生物測定等。3)半固體培養(yǎng)基如果把少量的凝固劑加入到液體培養(yǎng)基中,就制成了半固體培養(yǎng)基。以瓊脂為例,它的用量在0.2~1%之間。這種培養(yǎng)基有時可用來觀察微生物的動力,有時用來保藏菌種。培養(yǎng)酵母菌一般用麥芽汁培養(yǎng)基,培養(yǎng)霉菌則一般用查氏合成培養(yǎng)基。
培養(yǎng)基配制:配制用水,培養(yǎng)基的大部分是水,所以水的質(zhì)量直接影響培養(yǎng)基的質(zhì)量。按Waymouth標(biāo)準(zhǔn),水的電阻應(yīng)為200萬歐姆,一般實(shí)驗(yàn)室里以玻璃蒸餾器制備的雙蒸水或三蒸水可以符合使用條件。培養(yǎng)基:培養(yǎng)基有天然、人工兩種。一般實(shí)驗(yàn)室使用的是RPMI-1640粉末培養(yǎng)基,以雙蒸或三蒸水配制。NaHCO3(或HCl)調(diào)pH至7.2-7.4,若pH值超過7.6或遠(yuǎn)低于6.8,則大多數(shù)細(xì)胞不能生長。RPMI-1640不耐高壓滅菌,使用前需經(jīng)滅菌0.22μm孔徑濾膜濾過處理。血清:培養(yǎng)中常使用小牛血清(或胎牛血清)。血清亦不能高壓滅菌,無菌的小牛血清需在56℃水浴30分鐘滅活補(bǔ)體,置4℃冰箱存放待用。配制時含量視培養(yǎng)細(xì)胞種類、時間而定,一般用10—15%。由于血清成分復(fù)雜、條件不易控制,可選用無血清培養(yǎng)基。平板培養(yǎng)基要除去冷凝水,否則將影響平板分離培養(yǎng)效果。內(nèi)蒙古瓊脂培養(yǎng)基制備器
培養(yǎng)基的實(shí)驗(yàn)室制備:正確制備培養(yǎng)基時微生物檢驗(yàn)的較基礎(chǔ)步驟之一。浙江培養(yǎng)基制備器哪個品牌好
微生物檢驗(yàn)培養(yǎng)基制備的要點(diǎn):調(diào)培養(yǎng)基pH,雖然中海培養(yǎng)基中含有緩沖物質(zhì),可以盡量使培養(yǎng)基的pH值保持在標(biāo)準(zhǔn)范圍內(nèi),但如果配制的培養(yǎng)基不能要求,則必須進(jìn)行必要的調(diào)整。如果您有校準(zhǔn)過的pH計(jì),則可以使用pH計(jì)。如果沒有,可以使用精確的pH試紙,然后根據(jù)需要使用1mol/L氫氧化鈉或1mol/L鹽酸進(jìn)行微調(diào)。使用0.1氫氧化鈉或0.1mol/L鹽酸進(jìn)行調(diào)整至所需的pH值。培養(yǎng)基有酸性或堿性,pH值一般為7.4~7.6。對于需要用氫氧化鈉高壓滅菌的介質(zhì),將pH調(diào)至比要求值高0.1~0.2個單位,因?yàn)橛脷溲趸c調(diào)節(jié)時,高壓滅菌后介質(zhì)的pH值要降低0.1~0.2。如果微生物培養(yǎng)基中含有碳酸鈣,則無需調(diào)整pH值。浙江培養(yǎng)基制備器哪個品牌好
賽鍶鈦氪(上海)貿(mào)易有限公司是一家集研發(fā)、生產(chǎn)、咨詢、規(guī)劃、銷售、服務(wù)于一體的貿(mào)易型企業(yè)。公司成立于2016-04-06,多年來在滅菌器,培養(yǎng)基制備器,培養(yǎng)基分裝機(jī),滅菌柜行業(yè)形成了成熟、可靠的研發(fā)、生產(chǎn)體系。公司主要經(jīng)營滅菌器,培養(yǎng)基制備器,培養(yǎng)基分裝機(jī),滅菌柜等產(chǎn)品,產(chǎn)品質(zhì)量可靠,均通過機(jī)械及行業(yè)設(shè)備行業(yè)檢測,嚴(yán)格按照行業(yè)標(biāo)準(zhǔn)執(zhí)行。目前產(chǎn)品已經(jīng)應(yīng)用與全國30多個省、市、自治區(qū)。賽鍶鈦氪(上海)貿(mào)易有限公司每年將部分收入投入到滅菌器,培養(yǎng)基制備器,培養(yǎng)基分裝機(jī),滅菌柜產(chǎn)品開發(fā)工作中,也為公司的技術(shù)創(chuàng)新和人材培養(yǎng)起到了很好的推動作用。公司在長期的生產(chǎn)運(yùn)營中形成了一套完善的科技激勵政策,以激勵在技術(shù)研發(fā)、產(chǎn)品改進(jìn)等。賽鍶鈦氪(上海)貿(mào)易有限公司嚴(yán)格規(guī)范滅菌器,培養(yǎng)基制備器,培養(yǎng)基分裝機(jī),滅菌柜產(chǎn)品管理流程,確保公司產(chǎn)品質(zhì)量的可控可靠。公司擁有銷售/售后服務(wù)團(tuán)隊(duì),分工明細(xì),服務(wù)貼心,為廣大用戶提供滿意的服務(wù)。