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液體培養(yǎng)基,固體培養(yǎng)基的對(duì)應(yīng)詞,是微生物或動(dòng)植物細(xì)胞的液狀培養(yǎng)基。它具有進(jìn)行通氣培養(yǎng)、振蕩培養(yǎng)的優(yōu)點(diǎn)。在靜止的條件下,在菌體或培養(yǎng)細(xì)胞的周圍,形成透過(guò)養(yǎng)分的壁障,養(yǎng)分的攝入受到阻礙。由于在通氣或在振蕩的條件下,可消除這種阻礙以及增加供氧量,所以有利于細(xì)胞生長(zhǎng),提高生產(chǎn)量。培養(yǎng)基的配制:配料:配方換算→在容器中加入少量水→按照配方稱取各種藥品,依次加入→加足所需水量一藥一勺,取藥后立即蓋上瓶蓋。溶解:淀粉溶解:少量冷水調(diào)成糊狀,加熱溶解,特別是加有瓊脂的培養(yǎng)基,一定要煮沸,瓊脂的熔解溫度95~97℃,且需要邊加熱邊攪拌以防止燒焦。調(diào)PH:用1N的鹽酸或的1NNaOH把培養(yǎng)基調(diào)節(jié)到所要求的值。過(guò)濾:濾紙或棉花進(jìn)行過(guò)濾。培養(yǎng)基制備器分裝好的培養(yǎng)基應(yīng)立即進(jìn)行滅菌。江西進(jìn)口分裝機(jī)
種子培養(yǎng)基:種子培養(yǎng)基是供孢子發(fā)芽、生長(zhǎng)和大量繁殖菌絲體,并使菌體長(zhǎng)得粗壯,成為活力強(qiáng)的“種子”。所以種子培養(yǎng)基的營(yíng)養(yǎng)成分要求比較豐富和完全,氮源和維生素的含量也要高些,但總濃度以略稀薄為好,這樣可達(dá)到較高的溶解氧,供大量菌體生長(zhǎng)繁殖。種子培養(yǎng)基的成分要考慮在微生物代謝過(guò)程中能維持穩(wěn)定的pH,其組成還要根據(jù)不同菌種的生理特征而定。一般種子培養(yǎng)基都用營(yíng)養(yǎng)豐富而完全的天然有機(jī)氮源,因?yàn)橛行┌被崮艽碳ゆ咦影l(fā)芽。但無(wú)機(jī)氮源容易利用,有利于菌體迅速生長(zhǎng),所以在種子培養(yǎng)基中常包括有機(jī)及無(wú)機(jī)氮源。較后一級(jí)的種子培養(yǎng)基的成分好好能較接近發(fā)酵培養(yǎng)基,這樣可使種子進(jìn)入發(fā)酵培養(yǎng)基后能迅速適應(yīng),快速生長(zhǎng)。廣東分裝機(jī)報(bào)價(jià)培養(yǎng)基由于富含營(yíng)養(yǎng)物質(zhì),易被污染或變質(zhì)。
培養(yǎng)基防止污染應(yīng)該注意以下事項(xiàng):確認(rèn)工作細(xì)胞庫(kù)是否被污染,確認(rèn)毒種工作種子批是否被污染,確認(rèn)所用培養(yǎng)基及其添加成分(如小牛血清、NaHCO3等)是否被污染,均可用細(xì)菌、病菌及支原體無(wú)菌試驗(yàn)來(lái)確認(rèn)并排除。同時(shí)要對(duì)無(wú)菌試驗(yàn)培養(yǎng)基的靈敏度進(jìn)行驗(yàn)證。實(shí)際生產(chǎn)中,可以從配制好的培養(yǎng)液中取少量加入營(yíng)養(yǎng)瓊脂于恒溫培養(yǎng)箱內(nèi)培養(yǎng),48小時(shí)即可觀察有無(wú)污染。其它:高壓滅菌設(shè)備、過(guò)濾除菌設(shè)備均應(yīng)進(jìn)行驗(yàn)證,確保滅菌和除菌效果;前者應(yīng)在投產(chǎn)前及其后的每6個(gè)月進(jìn)行驗(yàn)證,后者應(yīng)在每次除菌前、后進(jìn)行驗(yàn)證工作(至少應(yīng)在除菌后進(jìn)行一次)。另外,應(yīng)將有毒區(qū)與無(wú)毒區(qū)嚴(yán)格分開(kāi),并有各自自立的空氣凈化系統(tǒng)及孵室,有毒區(qū)對(duì)無(wú)毒區(qū)應(yīng)保持相對(duì)負(fù)壓,防止病毒對(duì)培養(yǎng)細(xì)胞(尤其是細(xì)胞庫(kù))的污染。
滅菌:分裝好的培養(yǎng)基應(yīng)立即進(jìn)行滅菌。滅菌的方法種類如下:1.高壓蒸汽滅菌法:大多數(shù)熱培養(yǎng)基都可用此法,小量分裝時(shí),用121℃、15min;滅菌量大時(shí),用121℃、30min滅菌;含糖類的培養(yǎng)基只能113℃~115℃、15min滅菌,避免糖類遭破壞。2.煮沸滅菌:對(duì)含有不耐高溫物質(zhì)的培養(yǎng)基,可使用此方法。3.過(guò)濾除菌:以過(guò)濾的方法除菌,用無(wú)菌操作技術(shù),定量加入培養(yǎng)基。血液、物品可用無(wú)菌操作技術(shù)抽取,加入冷卻到50℃左右的培養(yǎng)基中。培養(yǎng)基含有不耐熱的物質(zhì)時(shí),可用此法。培養(yǎng)基既是提供細(xì)胞營(yíng)養(yǎng)和促使細(xì)胞增殖的基礎(chǔ)物質(zhì),也是細(xì)胞生長(zhǎng)和繁殖的生存環(huán)境。
培養(yǎng)基的分類:培養(yǎng)基的分裝,應(yīng)按使用的目的和要求,分裝于試管、燒瓶等適當(dāng)容器內(nèi)。分裝量不得超過(guò)容器裝盛量的2/3。容器口可用墊有防濕紙的棉塞封堵,其外還須用防水紙包扎(現(xiàn)試管一般多有用螺旋蓋者)。分裝時(shí)較好能使用半自動(dòng)或電動(dòng)的定量分裝器。分裝瓊脂斜面培養(yǎng)基時(shí),分裝量應(yīng)以能形成2/3底層和1/3斜面的量為洽當(dāng)。分裝容器應(yīng)預(yù)先清洗干凈并經(jīng)干烤消毒,以利于培養(yǎng)基的徹底滅菌。每批培養(yǎng)基應(yīng)另外分裝20ml培養(yǎng)基于一小玻璃瓶中,隨該批培養(yǎng)基同時(shí)滅菌,以為測(cè)定該批培養(yǎng)基較終pH之用。培養(yǎng)基根據(jù)培養(yǎng)功能可分為基礎(chǔ)培養(yǎng)基、選擇培養(yǎng)基、加富培養(yǎng)基、鑒別培養(yǎng)基等。廣東分裝機(jī)報(bào)價(jià)
全自動(dòng)培養(yǎng)基制備分裝系統(tǒng):運(yùn)行過(guò)程順滑無(wú)聲;大程度的削減了噪音。江西進(jìn)口分裝機(jī)
含瓊脂的培養(yǎng)基有時(shí)在平板上不凝固或凝固不好問(wèn)題:在此種情況下,建議對(duì)于需要高壓滅菌的培養(yǎng)基,倒入平板前先搖一搖。主要是瓊脂培養(yǎng)基的分子量比較大,在冷卻過(guò)程中容易沉淀到底,造成瓊脂不能均勻分布。對(duì)于無(wú)需高壓滅菌的培養(yǎng)基,不能直接煮沸溶解后倒入平板、需要重復(fù)三至五次煮沸溶解過(guò)程,因一次無(wú)法保證瓊脂完全溶解。微生物培養(yǎng)基成分中含有染料或指示劑;不同批次的粉狀培養(yǎng)基含水量不同。一般要求≤6。含水量越高,顏色越深;研磨時(shí)間越長(zhǎng),顏色越深等三個(gè)原因。江西進(jìn)口分裝機(jī)
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