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L-谷氨酰胺在細(xì)胞培養(yǎng)中重要嗎?它在溶液中不穩(wěn)定嗎?L-谷氨酰胺(L-Glutamine)是細(xì)胞生長(zhǎng)的必須氨基酸,可作為培養(yǎng)細(xì)胞的能量來源,參與蛋白質(zhì)的合成和核酸代謝。L-谷氨酰胺在溶液中狀態(tài)不穩(wěn)定,它的降解速率隨保存時(shí)間,保存溫度及保存環(huán)境pH值等變化而變化。L-丙胺酰-谷氨酰胺(L-alanyl-L-glutamine)是細(xì)胞培養(yǎng)中普遍使用的L-谷氨酰胺的替代品,其在水溶液中穩(wěn)定性高,即可保持長(zhǎng)時(shí)間穩(wěn)定的營(yíng)養(yǎng)供給,也降低了分解產(chǎn)物造成的細(xì)胞毒性。L-丙胺酰-谷氨酰胺溶液(L-alanyl-L-glutamineslution)可作為哺乳動(dòng)物貼壁細(xì)胞或懸浮細(xì)胞培養(yǎng)添加劑。與谷氨酰胺相比,L-丙胺酰-谷氨酰胺不會(huì)自行降解成氨而導(dǎo)致細(xì)胞毒性,作為添加物培養(yǎng)條件更加可控,可有效提高細(xì)胞活力。酵母浸粉葡萄糖肉湯 肉浸液瓊脂 芽孢桿菌培養(yǎng)基 嗜熱脂肪桿菌恢復(fù)肉湯 硫酸錳營(yíng)養(yǎng)瓊脂培養(yǎng)基。強(qiáng)化梭菌瓊脂
通常用心、腦或其他臟器浸液配制厭氧菌培養(yǎng)基,并常需加入硫乙醇酸鈉、半胱氨酸、肉渣、還原鐵、活性炭等還原劑或除氧材料。在液體培養(yǎng)基中還可加入刃天青或亞甲基藍(lán)作為氧化還原指示劑,以觀察培養(yǎng)基的含氧程度。心、腦浸液、肝塊、肉渣中含有不飽和脂肪酸,能吸收培養(yǎng)基中的氧。硫乙醇酸鈉、半胱氨酸是較強(qiáng)的還原劑,能消耗溶解在培養(yǎng)基中的氧。干燥的活性炭和脫脂棉同樣能吸收培養(yǎng)基中的氧。所以培養(yǎng)基中加入還原劑和吸收材料,目的都是為造成培養(yǎng)基的缺氧環(huán)境,使培養(yǎng)基保持較低的氧化還原電勢(shì)。此外,還可在培養(yǎng)基表面加一層液體石蠟,以隔絕培養(yǎng)基與大氣的接觸。強(qiáng)化梭菌瓊脂細(xì)胞類培養(yǎng)基則可分為無血清培養(yǎng)基和含血清培養(yǎng)基兩類。
胰島素(Insulin)作用普遍,包括調(diào)節(jié)脂肪和蛋白質(zhì)的代謝以及促進(jìn)細(xì)胞生長(zhǎng)等。胰島素功能的發(fā)揮源于其對(duì)細(xì)胞的作用,進(jìn)而引起組織乃至機(jī)體的整體反應(yīng)。一般可將胰島素在細(xì)胞水平的作用分為三大類:代謝作用、促生長(zhǎng)作用、以及代謝和促生長(zhǎng)混合作用。胰島素對(duì)細(xì)胞的代謝調(diào)節(jié)作用主要是通過其與細(xì)胞膜上的胰島素受體(Insulin receptor, IR)相互作用而介導(dǎo),而胰島素對(duì)細(xì)胞的促生長(zhǎng)作用則是通過其與細(xì)胞膜上胰島素的樣生長(zhǎng)的因子受體(IGF Receptor, IG)相互作用而介導(dǎo)的。在無血清細(xì)胞培養(yǎng)液中,常添加胰島素來維持細(xì)胞生長(zhǎng),調(diào)節(jié)細(xì)胞對(duì)葡萄糖、氨基酸和脂肪酸的攝取、利用和貯存,同時(shí)抑制糖原、蛋白質(zhì)和脂肪的分解。
在培養(yǎng)基中加人某種抑制劑和指示劑,抑制某些細(xì)菌生長(zhǎng),促進(jìn)目的菌的繁殖,并使所生長(zhǎng)的細(xì)菌菌落具有一定特征,以助鑒別挑選,這類培養(yǎng)基稱為選擇性鑒別培養(yǎng)基。如SS瓊脂,在該培養(yǎng)基配方中含有乳糖(反應(yīng)底物)、中性紅和檸檬酸鐵銨(指示劑)、燦爛綠及膽鹽等(抑菌劑)。燦爛綠和膽鹽等抑菌劑能抑制革蘭氏陽(yáng)性菌及部分大腸埃希菌的生長(zhǎng),而對(duì)沙門菌及志賀菌基本無影響,而且大腸埃希菌能發(fā)酵乳糖產(chǎn)酸,使菌落變紅色,沙門菌和志賀菌不發(fā)酵乳糖,其菌落為無色。如細(xì)菌產(chǎn)生硫化氫,則與檸檬酸鐵銨反應(yīng)生成硫化亞鐵沉淀,菌落中心呈黑色或褐色。以此達(dá)到鑒別的目的。制備培養(yǎng)基需要考慮生長(zhǎng)細(xì)胞所需的營(yíng)養(yǎng)、酸堿度和水分含量等因素。
培養(yǎng)基按成分分類有哪些?上海瑞楚生物科技有限公司小編介紹,根據(jù)培養(yǎng)基的組成成分,可分為天然培養(yǎng)基和合成培養(yǎng)基兩大類。天然培養(yǎng)基(native medium) 含有不完全明了化學(xué)成分的天然物質(zhì)。如蛋白胨、牛肉膏(粉)、肉浸液、玉米漿、血液、馬鈴薯等。用此類材料配成的培養(yǎng)基很難做到不同批號(hào)之間質(zhì)量的穩(wěn)定一致,因此在選用原料時(shí)務(wù)必注明其商品名稱、生產(chǎn)廠家及批號(hào),對(duì)不同來源的原料應(yīng)先做小樣試驗(yàn)。此種培養(yǎng)基成本較低,細(xì)菌繁殖較好,一般細(xì)菌培養(yǎng)以選用天然培養(yǎng)基為主。腸***產(chǎn)毒培養(yǎng)基 葡萄球菌選擇性瓊脂110 沙氏葡萄糖瓊脂培養(yǎng)基沙氏瓊脂培養(yǎng)基(SDA)。AB培養(yǎng)基基礎(chǔ)
使用說明稱取本品21.5g于1L蒸餾水或去離子水中加熱煮沸至完全溶解分裝115℃高壓滅菌30分鐘冷卻備用.強(qiáng)化梭菌瓊脂
1951年厄爾開發(fā)了供動(dòng)物細(xì)胞體外生長(zhǎng)的人工合成培養(yǎng)基(MEM)。合成培養(yǎng)基的種類相當(dāng)多。合成培養(yǎng)基成分已知,便于對(duì)實(shí)驗(yàn)條件的控制。但與天然培養(yǎng)基相比,有些天然的未知成分尚無法用已知的化學(xué)成分所替代,因此,細(xì)胞培養(yǎng)中使用的基礎(chǔ)合成培養(yǎng)基還必須加入一定量的天然培養(yǎng)基成分,以克服合成培養(yǎng)基的不足。普遍的作法是加入小牛血清。動(dòng)物血清成分復(fù)雜,各種生物大小分子混合在一起,有些成分至今尚未搞清楚。血清對(duì)細(xì)胞生長(zhǎng)很有效,但后期對(duì)培養(yǎng)產(chǎn)物的分離、提純以及檢測(cè)造會(huì)成一定困難。另外高質(zhì)量的動(dòng)物血清來源有限,成本高,限制了它的大量使用。無血清培養(yǎng)基不加動(dòng)物血清,在基礎(chǔ)培養(yǎng)基中加入細(xì)胞生長(zhǎng)有效因子等。強(qiáng)化梭菌瓊脂
上海瑞楚生物科技有限公司成立于2012-11-29,是一家專注于培養(yǎng)基,菌種,標(biāo)準(zhǔn)品,酶的****,公司位于寶安公路4997號(hào)2號(hào)樓5樓。公司經(jīng)常與行業(yè)內(nèi)技術(shù)**交流學(xué)習(xí),研發(fā)出更好的產(chǎn)品給用戶使用。公司主要經(jīng)營(yíng)培養(yǎng)基,菌種,標(biāo)準(zhǔn)品,酶,公司與培養(yǎng)基,菌種,標(biāo)準(zhǔn)品,酶行業(yè)內(nèi)多家研究中心、機(jī)構(gòu)保持合作關(guān)系,共同交流、探討技術(shù)更新。通過科學(xué)管理、產(chǎn)品研發(fā)來提高公司競(jìng)爭(zhēng)力。公司秉承以人為本,科技創(chuàng)新,市場(chǎng)先導(dǎo),和諧共贏的理念,建立一支由培養(yǎng)基,菌種,標(biāo)準(zhǔn)品,酶**組成的顧問團(tuán)隊(duì),由經(jīng)驗(yàn)豐富的技術(shù)人員組成的研發(fā)和應(yīng)用團(tuán)隊(duì)。上海瑞楚生物科技有限公司依托多年來完善的服務(wù)經(jīng)驗(yàn)、良好的服務(wù)隊(duì)伍、完善的服務(wù)網(wǎng)絡(luò)和強(qiáng)大的合作伙伴,目前已經(jīng)得到化工行業(yè)內(nèi)客戶認(rèn)可和支持,并贏得長(zhǎng)期合作伙伴的信賴。