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枯草芽孢桿菌為接種微生物,對菲與苯并芘都可進行吸附或生物降解,48h液相PAHs濃度達到平衡時,微生物對菲消除了98%,對苯并芘消除85%;接種的樣品48h吸附等溫線均呈線形,能較好地符合線性方程;在接種微生物情況下,沉積物與土壤對菲和苯并芘吸附特征均發(fā)生較大變化,對菲的吸附量增大約35倍,而對苯并芘的吸附量卻降低了2/3左右;未接種微生物的土壤和沉積物對菲解吸率為20%,接種的樣品組為2.9%,而對苯并芘的解吸結(jié)果與菲相反,未接種的對照組為4%,接種的樣品組為3%。脲酶屬于土壤中研究得比較深入的一種水解酶類,枯草芽孢桿菌是對尿素在土壤中轉(zhuǎn)化及尿素利用率有重大影響的。大腸桿菌的生產(chǎn)量逐年遞增,可見其收益價值。堆肥尿素芽孢桿菌菌株
大腸桿菌表達系統(tǒng)在現(xiàn)代的生物技術(shù)方面的應(yīng)用:利用大腸桿菌表達系統(tǒng)可溶性表達人乳t瘤病毒HPV18蛋白,經(jīng)過純化和重組過程獲得HPV18病毒樣顆粒,研究其免疫原性和誘發(fā)中和抗體生成的水平。把堿性磷酸脂酶基因phoA信號肽的疏水區(qū)置換為多聚Leu殘基,明顯提高分泌效率,這一結(jié)果為天然信號肽優(yōu)化改造的設(shè)計提供了很好的參考依據(jù)。膜蛋白基因在大腸桿菌中表達的技術(shù)逐漸成為研究的熱點領(lǐng)域。外源蛋白質(zhì)在菌體表面表達的優(yōu)點是大腸桿菌可用于制備疫苗,進行生物催化和作為探針篩選藥物。橙色棕囊藻桿菌菌種金黃色葡萄球利用70%的乙醇可以在幾分鐘之內(nèi)將其快速殺死。
大腸桿菌表達系統(tǒng)是目前應(yīng)用很廣的蛋白表達系統(tǒng)。它具有:遺傳背景清楚。易于培養(yǎng)和控制。轉(zhuǎn)化操作簡單。表達水平高。成本低。周期短等特點。同時是常用也是經(jīng)濟實惠的蛋白表達系統(tǒng),在基因表達技術(shù)中發(fā)展至早。Escherich于1885年發(fā)現(xiàn)大腸桿菌。1976年Struhl、1977年Vapnek及1978年Chang等分別將酵母DN段、粗糙鏈孢霉DN段和哺乳動物cDN段導(dǎo)入大腸桿菌,引起其表型的改變,證明了外源基因在大腸桿菌中可以使現(xiàn)有功能的活性表達。這些研究為大腸桿菌表達系統(tǒng)的發(fā)展奠定了理論基礎(chǔ)。1980年,Guarante等在Science雜志上發(fā)表了以質(zhì)粒、乳糖操縱子為基礎(chǔ)建立起來的大腸桿菌表達系統(tǒng)。這一發(fā)展構(gòu)成大腸桿菌系統(tǒng)的雛形。
葡萄球菌屬因其聚成葡萄串一樣而得名。是常見的化膿性球菌。醫(yī)務(wù)人員帶菌率高達70%以上。而且可能是耐藥性菌株,可成為院內(nèi)傳染的重要傳染源。葡萄球菌呈球形或橢圓形。直徑約0.5--1μm。經(jīng)常以葡萄串狀排列,有時可能散在、成雙、短鏈狀存在。沒有鞭毛、沒有芽孢,體外培養(yǎng)一般不形成莢膜,在體內(nèi)卻可形成莢膜。革蘭染色呈陽性。衰老、死亡、被吞噬細胞吞噬、青霉素等藥物作用下,菌體可革蘭染色陰性。葡萄球菌對營養(yǎng)要求不高,普通培養(yǎng)基生長良好。需氧或兼性厭氧。在18--40℃均可生長。耐鹽性強。在含有10%氯化鈉培養(yǎng)基中能生長,可用高鹽培養(yǎng)基分離菌種。普通瓊脂平板上形成圓形,表面光滑濕潤,不透明菌落。典型菌株產(chǎn)生脂溶性的金黃色的色素而使菌落呈金黃色。在血瓊脂平板上,因金黃色葡萄球菌能產(chǎn)生溶素,在菌落周圍形成明顯的透明溶血環(huán)。銅綠假單胞菌是假單胞菌目中的一種。
銅綠假單胞桿菌在緩慢的凍結(jié)條件下,能使細胞內(nèi)水份在凍結(jié)前透出細胞。貯存在-130攝氏度以下的低溫中能減少冰晶的形成。細胞復(fù)蘇時速度要快,使之迅速通過細胞較容易受損的-5~0攝氏度,細胞仍能生長,活力受損不大目前常用的保護劑為二甲亞砜(DMSO)和甘油,它們對細胞無毒性,分子量小,溶解度大,易穿透細胞。合適的銅綠假單胞桿菌溫度通常在45~68攝氏度之間(預(yù)備實驗可2攝氏度間隔進行)。另外,由于在60~68攝氏度間,也有很高的活性,因此可在此溫度范圍內(nèi)設(shè)定銅綠假單胞桿菌溫度,進行2StepPCR。銅綠假單胞桿菌溫度為68攝氏度時,每kbp大體可設(shè)定30秒~1分鐘;當(dāng)溫度設(shè)定在68攝氏度以下時,時間設(shè)定可稍長一些。金黃色葡萄球是導(dǎo)致人類傳染的主要葡萄球菌,凝固酶陽性。紅色多形孢菌菌株
銅綠假單胞菌的菌體有時呈球桿狀或線狀,成對或短鏈狀排列。堆肥尿素芽孢桿菌菌株
大腸桿菌耐藥性產(chǎn)生的原因:內(nèi)在原因1940年,Abraham和Chain從大腸桿菌中分離和鑒定出了一種能水解青霉素的酶,這一發(fā)現(xiàn)說明了耐藥性不只是反復(fù)用藥的結(jié)果,而且也是大腸桿菌增強在不利環(huán)境中生存能力的自身防衛(wèi)系統(tǒng)的重要組成部分,這也是大腸桿菌容易產(chǎn)生耐藥性的自身原因。藥物誘發(fā)作用:由于養(yǎng)殖戶把使用藥物當(dāng)作控制大腸桿菌的主要手段,并且在實際生產(chǎn)中有時用藥不合理,如隨意加大劑量,或低劑量長時間使用,投藥途徑不當(dāng)、不注意輪換用藥,這些錯誤的用藥的方子法和用藥程序是造成大腸桿菌產(chǎn)生耐藥性的主要原因、在某些養(yǎng)殖場畜禽發(fā)病后一旦懷疑由大腸桿菌引起,不管何種藥物,只要是抗s素便用,但很少能收到有效的療養(yǎng)效果。某些肉雞場為防止疫病的發(fā)生,便采用飼料或飲水中長期添加藥物的預(yù)防方法,還有一些養(yǎng)殖場為防止產(chǎn)生高的藥物殘留而小劑量反復(fù)用藥也會導(dǎo)致細菌逐步產(chǎn)生耐藥性。此外,有試驗表明聯(lián)合用藥是加快大腸桿菌產(chǎn)生耐藥性的又一原因、聯(lián)合用藥有時的確能起到盡快控制該病的目的,但用藥劑量不足或用藥時間過長,不只增加了用藥開支費用,而且擴大了細菌耐藥范圍,使其對更多的藥物產(chǎn)生耐藥性。堆肥尿素芽孢桿菌菌株
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