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來源： 發(fā)布時間：2024-06-24

注意事項：染色時：①染色時必須嚴格按照染色操作說明書進行染色。②在染色過程中，前一個染液浸染完成后，在進行下一個染液的步驟之前，必須徹底充分水洗，使前一個染液沖洗干凈后再進行下一步驟。③每次滴加染液前，務(wù)必吸干組織上多余的水分，避免多余的水把染液稀釋了，造成染色不佳。④在滴加染液時，務(wù)必使染液完全覆蓋組織，但不能溢出圈外，避免浪費試劑。在染色時，用有色鉛筆在組織周圍劃一個圈，這樣在滴加染液時就不會使染液溢出。切取的材料應(yīng)小而薄，便于固定液迅速滲入內(nèi)部。上?？诒玫奶窃旧噭┖心募冶阋?/p>

糖原染色在使用過程中需要注意以下幾個方面：PAS染色時需于暗處加蓋反應(yīng)，染色時間10～20min（染色時間長短取決于試劑的質(zhì)量和環(huán)境溫度，SO濃度高，染色時間適當縮短；環(huán)境溫度高，染色時間也應(yīng)適當縮短，反之則需適當延長反應(yīng)時間）。染色過程中不能接觸伊紅，以免造成顏色誤差[4]。作糖原染色時，較好作消化對照，即取兩張連續(xù)切片，其中一張脫蠟至水后，用1％淀粉酶于37℃消化30min，水洗后與不經(jīng)消化處理的切片一起置0.5％高碘酸液氧化，如經(jīng)消化處理的切片染色陰性，不經(jīng)消化處理的切片染色陽性，即肯定為糖原[6]。偏重亞硫酸鈉（鉀）溶液配置后，不能保存，因此，必須現(xiàn)配現(xiàn)用，用過一次即應(yīng)廢棄。各種試劑必須是化學純或者分析純。器皿、染色缸必須潔凈而干燥。上?？诒玫奶窃旧噭┖心募冶阋死没瘜W試劑與細胞內(nèi)的某些物質(zhì)進行化學反應(yīng)。

糖原染色：1、概況PAS染色法（PeriodicAcid-Schiffstain）在組織學上，主要用來檢測組織中的糖類。過碘酸把糖類相鄰兩個碳上的羥基氧化成醛基，再用Schiff試劑和醛基反應(yīng)使呈現(xiàn)紫紅色。2、原理PAS染色又稱過碘酸雪夫染色，糖原染色。一般用來顯示糖元和其它多糖物質(zhì)。過碘酸能使細胞內(nèi)的多糖乙二醇基氧化成二醛，再與Schiff氏液的無色品紅結(jié)合，紅色，定位于胞漿上。3、應(yīng)用隨著醫(yī)學實驗技術(shù)的發(fā)展，糖原染色應(yīng)用的范圍更加普遍，如用以證明與鑒別細胞內(nèi)空泡狀的性質(zhì)，心肌病變及其他心血管疾病的診斷，糖原累積病診斷和研究，糖尿病的診斷和研究，用于某些的診斷等~

糖元染色試劑盒細胞生物學研究有以下幾個方面。細胞生物學的研究內(nèi)容十分普遍,主要包括。①細胞核、染色體以及基因表達的研究。②生物膜與細胞器的研究。③細胞骨架體系的研究。④細胞增殖及其調(diào)控。⑤細胞分化及其調(diào)控。⑥細胞的衰老與編程性死亡(凋亡)⑦細胞的起源與進化。⑧細胞工程。PAS染色，全稱過碘酸雪夫染色（PeriodicAcid-SchiffStain），主要用來顯示糖原和其他多糖物質(zhì)，因此也稱作糖原染色。另外，此染色方法還可以顯示中性黏液性物質(zhì)和某些酸性物質(zhì)，以及軟骨、垂體、色素、淀粉樣物質(zhì)、基底膜、霉菌等。PAS法的檢測原理在于：過碘酸（也成為高碘酸）是一種強氧化劑。對鹽基性染料有親合力，因此在HE染色中、切片上的粘液呈污穢藍色。

GUS染色步驟：1.將準備好的材料浸泡在GUS染色液中，于25-37℃保溫1小時至過夜。2.葉片等綠色材料轉(zhuǎn)入70%乙醇中脫色2-3次，至陰性對照材料呈白色。3.肉眼或顯微鏡下觀察，白色背景上的藍色小點即為GUS表達位點。注：用于染色的植物材料的制備方法要因涉及的特定組織和部位的不同而異。例如，擬南芥的根、花和葉片以及幼苗的根就可以不作任何預處理而直接染色。但是像和馬鈴薯這些植物的莖和葉就必須在染色前切成薄片（1-3mm）。當操作大的組織和樣品時，可以選用真空滲入法來幫助底物和酶滲入細胞。在滴加染液時，務(wù)必使染液完全覆蓋組織，但不能溢出圈外，避免浪費試劑。正規(guī)糖原染色試劑盒廠家批發(fā)價

多糖主要指糖原，它是一種膠樣液態(tài)存在于肝細胞、骨骼肌、心肌等處。上?？诒玫奶窃旧噭┖心募冶阋?/p>

糖原染色（PAS）：（1）原理：過碘酸將血細胞內(nèi)的糖原氧化，生成醛基。醛基與雪夫液中的無色品紅結(jié)合，形成紫色化合物，定位于細胞質(zhì)中。（2）操作方法：干燥涂片，滴加甲醛固定液固定10分鐘，流水沖洗，晾干。滴加過碘酸溶液作用20分鐘，流水沖洗，晾干。滴加雪夫液作用60分鐘，流水沖洗，晾干。滴加甲基綠溶液復染10分鐘，流水沖洗，晾干鏡檢。（4）臨床意義：根據(jù)染色陽性程度和陽性物形態(tài)鑒別主要用于急性淋巴細胞白血病和急性非淋巴細胞白血病鑒別，還有助于紅白血病與巨幼細胞貧血和溶血性貧血的鑒別診斷上?？诒玫奶窃旧噭┖心募冶阋?/p>

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