外泌體是一種存在于細(xì)胞外的多囊泡體，可通過(guò)細(xì)胞內(nèi)吞泡膜向內(nèi)凹陷形成多泡內(nèi)涵體，內(nèi)涵體與細(xì)胞膜融合后釋放其中的小囊泡。外泌體的直徑在40-110nm之間，其中包含RNA、蛋白質(zhì)、microRNA等多種物質(zhì)，存在于血液、唾液、尿液、腦脊液和母乳等多種體液中。外泌體從發(fā)現(xiàn)至今已有30多年的歷史，雖然較初被認(rèn)為可能是細(xì)胞的“垃圾”，所以才被排出來(lái)，但是近年來(lái)研究表明外泌體具有功能活性并可進(jìn)行細(xì)胞間信息傳遞。如今，研究已經(jīng)發(fā)現(xiàn)外泌體在抗原提呈細(xì)胞中呈遞抗原程中、一些病癥細(xì)胞發(fā)生的發(fā)展、神經(jīng)細(xì)胞信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)過(guò)程中都發(fā)揮著重要作用。利用化合物沉淀將法外泌體沉淀出來(lái)。外泌體的提取、分離方法：尺寸排阻色譜法和超濾法。成都正規(guī)外泌體提取試劑供應(yīng)商

外泌體的提取主要包括以下幾種方式：一是超速離心法，這是目前外泌體提取較常用的方法。此種方法得到的外泌體量多，但是純度不足，電鏡鑒定時(shí)發(fā)現(xiàn)外泌體聚集成塊，由于微泡和外泌體沒(méi)有非常統(tǒng)一的鑒定標(biāo)準(zhǔn)，也有一些研究認(rèn)為此種方法得到的是微泡不是外泌體。二是過(guò)濾離心，這種操作簡(jiǎn)單、省時(shí)，不影響外泌體的生物活性，但同樣存在純度不足的問(wèn)題。三是密度梯度離心法，用此種方法分離到的外泌體純度高，但是前期準(zhǔn)備工作繁雜，耗時(shí)，量少。四是免疫磁珠法，這種方法可以保證外泌體形態(tài)的完整，特異性高、操作簡(jiǎn)單、不需要昂貴的儀器設(shè)備，但是非中性pH和非生理性鹽濃度會(huì)影響外泌體生物活性，不便進(jìn)行下一步的實(shí)驗(yàn)。五是PS親和法，該方法將PS（磷脂酰絲氨酸）與磁珠結(jié)合，利用親和原理捕獲外泌體囊泡外的PS。該方法與免疫磁珠法相似，獲得的外泌體形態(tài)完整，純度較高。由于不使用變性劑，不影響外泌體的生物活性，外泌體可用于細(xì)胞共培養(yǎng)和體內(nèi)注射。2016.9《ScientificReports》雜志發(fā)表了該方法較新數(shù)據(jù)，表明PS法可提取相當(dāng)高純度的外泌體。六是色譜法，這種方法分離到的外泌體在電鏡下大小均一，但是需要特殊的設(shè)備，應(yīng)用不普遍。南京正規(guī)外泌體提取試劑服務(wù)電話(huà)同時(shí)對(duì)超速離心機(jī)的設(shè)備要求以及操作程序的培訓(xùn)較大提高了提取成本。

外泌體的提取分離：1、超速離心法（差速離心）。超離法是常用的外泌體純化手段，采用低速離心、高速離心交替進(jìn)行（如圖所示），可分離到大小相近的囊泡顆粒。超離法因操作簡(jiǎn)單，獲得的囊泡數(shù)量較多而廣受歡迎，但過(guò)程比較費(fèi)時(shí)，且回收率不穩(wěn)定（可能與轉(zhuǎn)子類(lèi)型有關(guān)），純度也受到質(zhì)疑；此外，重復(fù)離心操作還有可能對(duì)囊泡造成損害，從而降低其質(zhì)量。2、密度梯度離心。在超速離心力作用下，使蔗糖溶液形成從低到高連續(xù)分布的密度階層，是一種區(qū)帶分離法。通過(guò)密度梯度離心，樣品中的外泌體將在1.13-1.19g/ml的密度范圍富集。此法獲得的外泌體純度較高，但步驟繁瑣，耗時(shí)。

2015年，隨著精細(xì)醫(yī)學(xué)概念的提出，越來(lái)越多的人開(kāi)始關(guān)注如何能做到疾病的精確診斷和治病。外泌體作為一個(gè)新型的研究熱點(diǎn)，由于它在體內(nèi)存在的普遍性和獲取的便捷性，已經(jīng)成為了疾病診斷治病的潛在有效方式，在精細(xì)醫(yī)學(xué)發(fā)展上有著光明的前景。多泡內(nèi)體的腔內(nèi)囊泡，要么分選進(jìn)溶酶體將物質(zhì)降解，要么作為外泌體分泌到胞外環(huán)境中。將膜分選到不同的腔內(nèi)囊泡群中的機(jī)制尚不清楚。該研究發(fā)現(xiàn)物質(zhì)被分選到內(nèi)體膜上的不同子域中，并且外泌體相關(guān)結(jié)構(gòu)域向內(nèi)體腔的轉(zhuǎn)移不取決于ESCRT（運(yùn)輸所需的內(nèi)體分選復(fù)合體）的功能，但是需要鞘脂神經(jīng)酰胺。純化的外體富含神經(jīng)酰胺，并且在神經(jīng)鞘磷脂酶被壓制后外泌體釋放減少。這些結(jié)果確定了內(nèi)體內(nèi)膜運(yùn)輸和外泌體形成的途徑。外泌體提?。撼瑸V膜也可用于分離外泌體。

外泌體的提取主要包括以下幾種方式。一是超速離心法，這是目前外泌體提取較常用的方法。此種方法得到的外泌體量多，但是純度不足，電鏡鑒定時(shí)發(fā)現(xiàn)外泌體聚集成塊，由于微泡和外泌體沒(méi)有非常統(tǒng)一的鑒定標(biāo)準(zhǔn)，也有一些研究認(rèn)為此種方法得到的是微泡不是外泌體。二是過(guò)濾離心，這種操作簡(jiǎn)單、省時(shí)，不影響外泌體的生物活性，但同樣存在純度不足的問(wèn)題。三是密度梯度離心法，用此種方法分離到的外泌體純度高，但是前期準(zhǔn)備工作繁雜，耗時(shí)，量少。外泌體檢測(cè)作為一種新型的液體活檢熱點(diǎn)技術(shù)已被許多臨床科研機(jī)構(gòu)普遍地應(yīng)用于一些病癥和疾病的無(wú)創(chuàng)診斷用無(wú)菌針管吸取上層含有外泌體的液體，置于80℃儲(chǔ)存?zhèn)溆?。武漢正規(guī)外泌體提取試劑廠家直銷(xiāo)

外泌體提純?cè)噭┖械奶厣c優(yōu)勢(shì)：外泌體被純化并且不含任何其他RNA結(jié)合蛋白。成都正規(guī)外泌體提取試劑供應(yīng)商

外泌體的提取、分離方法：聚合物沉淀法。聚合物沉淀法用于分離病毒和其他的生物大分子已有50多年歷史，近幾年，將其作為一種新的方法來(lái)分離外泌體。目前，市場(chǎng)已經(jīng)有應(yīng)用聚乙二醇(polyethyleneglycol,PEG)溶液提取外泌體的試劑盒，較常見(jiàn)的是SystemBiosciences公司的ExoQuick?和ExoQuick-TC?kits，該試劑盒操作簡(jiǎn)單不需要特殊的儀器，但是價(jià)格昂貴。提取外泌體的試劑盒主要成分是PEG8000(30%~50%),將試劑盒與體液或細(xì)胞培養(yǎng)液4℃孵育過(guò)夜，之后再低速離心。成都正規(guī)外泌體提取試劑供應(yīng)商