細(xì)胞凍存經(jīng)驗(yàn)談:選對(duì)凍存培養(yǎng)基才是王道：研究人員經(jīng)常需要冷凍細(xì)胞并保存，以供后續(xù)實(shí)驗(yàn)或臨床使用?；具^程相當(dāng)簡(jiǎn)單：慢慢冷凍細(xì)胞，將凍存管放入液氮中，并在需要時(shí)快速解凍。凍存培養(yǎng)基能支持細(xì)胞并防止冰晶形成。不過，Malfavon的體驗(yàn)告訴我們，使用不同的凍存培養(yǎng)基，結(jié)果那可是大不同。一些經(jīng)驗(yàn)老道的研究人員自己制備凍存培養(yǎng)基。不過，那些面對(duì)脆弱細(xì)胞（比如原代和多能細(xì)胞）的研究人員，則更喜歡購(gòu)買標(biāo)準(zhǔn)化的商業(yè)產(chǎn)品。一些非常敏感的細(xì)胞系也許能從添加物中受益，以避免細(xì)胞在解凍時(shí)凋亡。無血清細(xì)胞凍存液使用方法：直接將含細(xì)胞混合液的凍存管放入-80℃以下冰箱，長(zhǎng)期冷凍保存。杭州重慶無血清細(xì)胞凍存液

無血清細(xì)胞凍存液：產(chǎn)品介紹：無血清細(xì)胞凍存液是一款針對(duì)細(xì)胞凍存和復(fù)蘇所研發(fā)的即用型細(xì)胞凍存液。該凍存液采用獨(dú)特的凍存配方，包括DMSO在內(nèi)的凍存保護(hù)劑復(fù)合物，**降低了細(xì)胞在凍存過程中冰晶對(duì)于細(xì)胞的損傷。凍存液中添加了葡萄糖，氨基酸等各種細(xì)胞營(yíng)養(yǎng)成分，***提高了細(xì)胞的活力和復(fù)蘇率。無血清細(xì)胞凍存液不含牛血清，無任何動(dòng)物源組分，可維持干細(xì)胞低分化狀態(tài)，并且可減少各類***和支原體污染的風(fēng)險(xiǎn)，確保細(xì)胞凍存安全。與傳統(tǒng)細(xì)胞凍存液相比，本產(chǎn)品重懸細(xì)胞后可直接凍存于-80℃，無需程序降溫。唐山正規(guī)無血清細(xì)胞凍存液價(jià)格凍存要求發(fā)生改變，因?yàn)閮龃婕?xì)胞要進(jìn)行臨床應(yīng)用。

無血清凍存液使用方法：1、收集懸浮細(xì)胞或貼壁細(xì)胞，離心去除上清培養(yǎng)液。2、加入適量的細(xì)胞凍存液，重懸細(xì)胞，調(diào)節(jié)密度至1-5x10*↑/mL。3、將加有凍存液的細(xì)胞懸液分裝至凍存管中。4、將凍存管直接轉(zhuǎn)移至-80C水箱中冷凍保存。5、儲(chǔ)存條件：2-8C保存，年有效：-20C保存，兩年有效。無血清凍存液注意事項(xiàng)：1、請(qǐng)選擇對(duì)數(shù)生長(zhǎng)期細(xì)胞進(jìn)行凍存。2、凍存液加入細(xì)胞后，請(qǐng)盡快放入-80C冰箱凍存。3、本產(chǎn)品凍存細(xì)胞可以在-80°C冰箱保存3年以上。4、若需長(zhǎng)期凍存細(xì)胞，請(qǐng)轉(zhuǎn)移至液氮罐中貯存。5、凍存液中含DMSO成分，為了您的安全和健康，請(qǐng)穿實(shí)驗(yàn)服并戴一次性手套。

無血清細(xì)胞凍存液使用方法：選擇凍存處于對(duì)數(shù)生長(zhǎng)期的細(xì)胞有助于提高復(fù)蘇細(xì)胞存活率。1）按照常用方法收集懸浮細(xì)胞或貼壁細(xì)胞于試管中。2）按照培養(yǎng)細(xì)胞密度和所用細(xì)胞凍存管的尺寸計(jì)算所需凍存細(xì)胞數(shù)。（參考：5×105至5×106cells/ml）。3）取相當(dāng)于所需細(xì)胞數(shù)的細(xì)胞懸浮液量，置于離心管中，離心收集培養(yǎng)細(xì)胞（參考離心條件：1,000~2,000rpm，4℃，3~5min）。移去離心管中的上清液。4）加入適量的無血清型細(xì)胞凍存液于離心管中，使細(xì)胞濃度為5×105至5×106cells/ml。緩慢地混合均勻，制成細(xì)胞混合液。5）將離心管中的細(xì)胞混合液分裝于已標(biāo)示完全的冷凍保存管中。6）直接將含細(xì)胞混合液的凍存管放入-80℃以下冰箱，長(zhǎng)期冷凍保存。細(xì)胞保藏中心，用于細(xì)胞株的長(zhǎng)期保存。

無血清細(xì)胞凍存液的用途：無血清細(xì)胞凍存液，含多種保護(hù)劑成分。一些保護(hù)劑，易于穿透細(xì)胞，避免細(xì)胞內(nèi)部水分子形成冰晶損傷細(xì)胞，同時(shí)另一些保護(hù)劑不能穿透細(xì)胞，但可以在冰晶形成之前，優(yōu)先結(jié)合細(xì)胞外的水分子，降低細(xì)胞外溶液的電解質(zhì)濃度，減少陽離子進(jìn)入細(xì)胞的數(shù)量，為多種保護(hù)劑組合，在細(xì)胞內(nèi)外進(jìn)行雙重保護(hù)，較大提高了細(xì)胞復(fù)蘇存活率。無血清細(xì)胞凍存液不含牛血清，無動(dòng)物源組份。2-8℃即可穩(wěn)定保存，無需冷凍，即取即用。凍存細(xì)胞，無需程序降溫。凍存細(xì)胞復(fù)蘇率在90%以上。無血清細(xì)胞凍存液，用于各種動(dòng)物細(xì)胞株（tumour細(xì)胞和常規(guī)細(xì)胞），凍存細(xì)胞可在-80℃長(zhǎng)期保存。金華正規(guī)無血清細(xì)胞凍存液廠家推薦

無血清凍存液注意事項(xiàng)：本產(chǎn)品凍存細(xì)胞可以在-80°C冰箱保存3年以上。杭州重慶無血清細(xì)胞凍存液

細(xì)胞凍存的注意事項(xiàng)：1、各種細(xì)胞對(duì)凍存速度的要求也不一樣；上皮細(xì)胞和成纖維細(xì)胞耐受性可能大些，骨髓干細(xì)胞－2~－3℃/分鐘合適；胚胎細(xì)胞耐受性較小，不宜太快。總之在一開始時(shí)，下降速度不能超過－10℃/分鐘。2、用什么防護(hù)劑合適和用量多大，要依細(xì)胞而定，初代培養(yǎng)細(xì)胞用DMSO較好，一般細(xì)胞可用甘油；用量以較小為好。有人認(rèn)為人皮膚上皮細(xì)胞貯存在20%-30%甘油中很好。3、原則上細(xì)胞在液氮中可貯存多年，但為妥善起見，凍存一年后，應(yīng)再?gòu)?fù)蘇培養(yǎng)一次，然后再繼續(xù)凍存。4、將凍存管放入液氮容器或從中取出時(shí)，要做好防護(hù)工作，以免凍壞。5、注意自身的安全，對(duì)于來自人源性或病毒傳染的細(xì)胞株應(yīng)特別小心。操作過程中，應(yīng)避免引起氣溶膠的產(chǎn)生，小心有毒性試劑例如DMSO，并避免尖銳物品傷人等。杭州重慶無血清細(xì)胞凍存液