褐藻寡糖噴施后,黃瓜果實的抗氧化酶G-POD4基因表達水平上升,T2組是CK組的倍。噴施組SOD1基因表達水平均升高,其中T3組較CK組升高了倍,效果明顯。褐藻寡糖噴施后,分別檢測葉片和根中WRKY家族轉(zhuǎn)錄因子的表達變化。在黃瓜葉片中,第Ⅰ類WRKY家族基因,WRKY2、WRKY4、WRKY23、WRKY39響應褐藻寡糖表達上調(diào),第Ⅱ類WRKY家族基因有15個基因響應褐藻寡糖表達上調(diào),第Ⅲ類WRKY家族基因基因中WRKY20、WRKY22、WRKY34、WRKY35在12h或24h出現(xiàn)表達上調(diào)的峰值。在黃瓜根中,第Ⅰ類WRKY家族基因,WRKY2、WRKY23、WRKY39響應褐藻寡糖表達上調(diào),第Ⅱ類基因中有14個基因響應褐藻寡糖表達上調(diào),第Ⅲ類WRKY家族基因有6個基因響應褐藻寡糖表達上調(diào)。 褐藻寡糖誘導植物體內(nèi)產(chǎn)生各種抗性物質(zhì)來緩解逆境因素對植物造成的損傷,從而達到抗逆的目的。上海好的褐藻寡糖
褐藻寡糖對SOD活性的影響SOD是植物體內(nèi)重要抗逆酶類之一,能夠催化O-2·歧化反應,生成H2O2和O2,H2O2在POD、CAT和谷胱甘肽過氧化物酶催化下轉(zhuǎn)化為水而去除,各種環(huán)境脅迫均能不同程度提高其活力,以增強植物去除O-2·能力。隨著低溫脅迫時間延長,水處理組細胞損傷加劇,SOD活力不斷上升,去除O-2·能力逐漸增強。噴施ADO后進行低溫脅迫,0.05%,0.20%,0.30%ADO組SOD活力短時間內(nèi)迅速上升,說明ADO對煙C的SOD活力產(chǎn)生了誘導作用,隨著時間變化O-2·產(chǎn)生和去除達到動態(tài)平衡,其SOD活力緩慢回落,以0.20%濃度ADO誘導效果比較好,SOD活力6h后誘導增強至空白對照的6倍,這對于提高煙C去除O-2·能力具有重要作用。0.10%濃度ADO在6~24h之內(nèi)沒有明顯改變SOD活力大小,維持在比較恒定水平,但48hSOD活力迅速上升,表明細胞內(nèi)O-2·含量增加,細胞受到了損傷破壞。高濃度1.00%ADO會破壞煙C葉片細胞結(jié)構(gòu),造成保內(nèi)物質(zhì)滲漏,加劇低溫下葉片損傷,超出了植株自身修復能力,產(chǎn)生了毒副作用,SOD活力逐漸降低。海南褐藻寡糖測定方法褐藻寡糖在植物生長中的使用,可以增強植物對外界環(huán)境的適應能力。
為了研究褐藻寡糖與細胞的結(jié)合機制與作用規(guī)律,利用激光共聚焦技術(shù)對標記的寡糖與煙c細胞進行結(jié)合,觀察其動態(tài)結(jié)合過程,研究發(fā)現(xiàn),褐藻寡糖能夠與植物的細胞壁進行結(jié)合,又可以穿過細胞壁進入細胞內(nèi)部與細胞膜進行結(jié)合。通過將蛋白酶以及蛋白變性劑SDS對膜蛋白進行處理后研究發(fā)現(xiàn)能夠?qū)烟堑慕Y(jié)合產(chǎn)生影響。表明褐藻寡糖的結(jié)合是與膜上的蛋白有關(guān)。通過封閉細胞膜上的鈣離子通道,對其進行阻斷后結(jié)合寡糖,研究發(fā)現(xiàn),褐藻寡糖與細胞膜的結(jié)合與鈣離子通道無關(guān)。
褐藻寡糖應用于翅堿蓬種子的萌發(fā)和抗逆中,研究了褐藻寡糖對翅堿蓬種子萌發(fā)和不同鹽度下抗鹽脅迫能力的影響。結(jié)果表明,褐藻寡糖可有效提高翅堿蓬種子的萌發(fā)率,由清水對照組的66.67%提升至0.02mg/mL的78.33%,同時萌發(fā)的幼芽中可溶性糖含量也有較大提升;經(jīng)褐藻寡糖處理,鹽脅迫下翅堿蓬種子的萌發(fā)率、萌發(fā)芽長有明顯的提升,翅堿蓬幼芽中游離脯氨酸含量提升,在200mmol/L及以上鹽濃度下效果尤為明顯。結(jié)果顯示種子在褐藻寡糖的作用下抗鹽脅迫能力提高,在黃河三角洲的高鹽環(huán)境中可促進翅堿蓬幼苗的生長和抗逆能力的提升。翅堿蓬是黃河三角洲地區(qū)重要的耐鹽草本植物,但在當前的應用中存在著種植成活率低的問題,尤其是幼苗移植生長時期,幼苗后續(xù)成活率低,浪費了大量的人力物力財力。在翅堿蓬的生活史中,種子萌發(fā)和幼芽生長是基礎的部分,這兩個階段的生長狀況關(guān)系到翅堿蓬后續(xù)移植成活率的高低。褐藻寡糖能夠與植物的細胞壁進行結(jié)合,又可以穿過細胞壁進入細胞內(nèi)部與細胞膜進行結(jié)合。
前寡糖在植物促生長與誘導抗逆領域研究的現(xiàn)狀,本研究選擇不同來 源、不同分子量大小的褐藻寡糖、果膠寡糖和殼寡糖的寡糖片段,通過促生長與 抗逆作用對其生物活性進行比對篩選。以促進植物種子萌發(fā)和幼苗生長作為寡糖 片段的促生長指標,以大豆子葉法測定誘導產(chǎn)生植保素的合成作為寡糖片段的抗 逆指標,對寡糖種類、分子量水平和濃度大小與促生長和抗逆效應的影響進行研 究,以獲得具有優(yōu)良的促生長與抗逆性能的寡糖片段。褐藻寡糖 HZ3 在濃度為 0.1%時對豌豆促生長效果為明顯,能夠明顯的促進豌 豆根和芽的生長,增加根和芽的干重。較低濃度的褐藻寡糖能促進高粱種子萌發(fā)及幼苗生長,提高高粱葉片葉綠素的合成速率。海南褐藻寡糖測定方法
褐藻寡糖作為一種信號分子,還參與調(diào)節(jié)植物的生長發(fā)育能調(diào)控生物合成過程從而保護果實品質(zhì)提高果實的產(chǎn)量。上海好的褐藻寡糖
褐藻寡糖對翅堿蓬種子萌發(fā)率的影響:隨著褐藻寡糖濃度的升高,翅堿蓬種子的發(fā)芽率呈先升高后降低的趨勢,且在褐藻寡糖作用下翅堿蓬種子發(fā)芽率明顯高于清水對照組,其中0.02mg/mL濃度下的褐藻寡糖四日發(fā)芽率高,達到73.33%,遠高于清水對照組的60.00%;隨著培養(yǎng)時間增加,翅堿蓬萌發(fā)率均增高。第七日時褐藻寡糖作用下翅堿蓬種子發(fā)芽率均不低于清水組,其中0.02mg/mL濃度下的褐藻寡糖發(fā)芽率高,達到78.33%,遠高于清水對照組的66.67%(圖1)。褐藻寡糖對翅堿蓬種子萌發(fā)幼芽的影響:可溶性糖是鹽生植物的重要滲透調(diào)節(jié)劑(李悅等,2011),翅堿蓬幼芽內(nèi)可溶性糖含量增加,在高鹽度環(huán)境下有助于細胞維持滲透勢。同時幼芽中的可溶性糖含量上升可以為翅堿蓬幼苗的生長提供更好的營養(yǎng)支撐,更有利于翅堿蓬幼苗的后續(xù)生長。本研究發(fā)現(xiàn)褐藻寡糖對翅堿蓬幼芽中的可溶性糖含量有明顯的影響(圖2)。在褐藻寡糖的作用下,翅堿蓬幼芽中的可溶性糖含量明顯增加,并與前期測得的發(fā)芽率相對應。褐藻寡糖濃度為0.02mg/mL時,幼芽中可溶性糖含量高,相應的翅堿蓬種子萌發(fā)勢和萌發(fā)率也高。上海好的褐藻寡糖
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