杭州細(xì)胞支原體檢測試劑
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發(fā)布時間：2024-06-26
支原體污染是細(xì)胞培養(yǎng)中普遍的問題之一，細(xì)胞庫中或正在使用的細(xì)胞中，支原體的污染率約為15%-35%。并對培養(yǎng)細(xì)胞的生理和代謝造成諸多影響：
01/ 爭奪營養(yǎng)：支原體的污染會阻礙細(xì)胞生長和增殖
02/ 改變蛋白質(zhì)、RNA 或 DNA 合成的水平
03/ 改變基因表達(dá)、細(xì)胞信號傳導(dǎo)和形態(tài)
04/ 損害膜和細(xì)胞器
05/ 導(dǎo)致突變和染色體變化
06/ 時間、金錢和有價值的細(xì)胞丟失：支原體的污染會導(dǎo)致嚴(yán)重的經(jīng)濟(jì)損失以及研究時間損失
07/ 實(shí)驗(yàn)結(jié)果的不可靠性
08/ 生物安全問題
細(xì)胞培養(yǎng)中支原體污染的后果？杭州細(xì)胞支原體檢測試劑
細(xì)胞培養(yǎng)中支原體污染會對實(shí)驗(yàn)結(jié)果產(chǎn)生多方面的影響，具體包括：
1. 細(xì)胞生長受影響：支原體污染可能導(dǎo)致細(xì)胞生長速度減慢，甚至停滯。
2. 細(xì)胞形態(tài)改變：支原體感*的細(xì)胞可能會出現(xiàn)形態(tài)的改變，如細(xì)胞體積增大、形態(tài)不規(guī)則等。
3. 細(xì)胞功能改變：支原體污染會影響細(xì)胞的代謝、增殖、分化等生理功能。
4. 細(xì)胞產(chǎn)物改變：支原體感*可能影響細(xì)胞產(chǎn)生的蛋白質(zhì)、細(xì)胞因子等生物活性物質(zhì)的表達(dá)和分泌。
5. 實(shí)驗(yàn)結(jié)果不準(zhǔn)確：支原體污染會干擾實(shí)驗(yàn)結(jié)果的準(zhǔn)確性，導(dǎo)致實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)不可靠。
6. 實(shí)驗(yàn)重復(fù)性差：支原體污染的細(xì)胞培養(yǎng)批次間差異大，影響實(shí)驗(yàn)的重復(fù)性。
7. 影響后續(xù)實(shí)驗(yàn)：支原體污染的細(xì)胞培養(yǎng)產(chǎn)物用于后續(xù)實(shí)驗(yàn)，如轉(zhuǎn)染、基因編輯等，可能會影響實(shí)驗(yàn)效果。
8. 影響細(xì)胞培養(yǎng)產(chǎn)物的質(zhì)量：支原體污染會影響細(xì)胞培養(yǎng)產(chǎn)物的質(zhì)量，如疫苗、生物制品等。
9. 增加研究成本：支原體污染需要花費(fèi)額外的時間和成本進(jìn)行檢測、處理和重復(fù)實(shí)驗(yàn)。
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支原體檢測的樣本既可以是細(xì)胞，也可以是培養(yǎng)基。在細(xì)胞培養(yǎng)中，支原體污染是常見的問題，因此需要對細(xì)胞和培養(yǎng)基進(jìn)行檢測。細(xì)胞庫、病毒種子批、對照細(xì)胞以及臨床用細(xì)胞等都需要進(jìn)行支原體檢查，這通常包括培養(yǎng)法和指示細(xì)胞培養(yǎng)法（DNA染色法）。同時，病毒類疫苗的病毒收獲液、原液也采用培養(yǎng)法檢查支原體，必要時，也可以采用指示細(xì)胞培養(yǎng)法篩選培養(yǎng)基。
此外，支原體檢測的培養(yǎng)基推薦使用支原體肉湯培養(yǎng)基和精氨酸支原體肉湯培養(yǎng)基等，這些培養(yǎng)基可用于檢測藥品和生物制品中的支原體。在進(jìn)行支原體檢測時，需要取培養(yǎng)物樣品接種到適宜支原體生長的微生物培養(yǎng)基或瓊脂平板上。
因此，支原體檢測的樣本既可以是細(xì)胞，也可以是培養(yǎng)基，具體取決于檢測的目的和方法。
支原體檢測的應(yīng)用場景非常廣*，以下是一些主要的應(yīng)用領(lǐng)域：
1. 細(xì)胞培養(yǎng)：在實(shí)驗(yàn)室和生物制品工廠中，細(xì)胞培養(yǎng)過程容易受到支原體污染。支原體污染可能導(dǎo)致細(xì)胞功能改變，影響實(shí)驗(yàn)結(jié)果和生物制品的質(zhì)量。因此，支原體檢測在細(xì)胞培養(yǎng)的質(zhì)量控制中至關(guān)重要?？蒲兄谐Ｓ玫葴財U(kuò)增的方法簡單便捷。
2. 生物制品生產(chǎn)：在生物制品的生產(chǎn)過程中，如疫苗、生物藥物等，需要確保產(chǎn)品無支原體污染，以保證其安全性和有效性。監(jiān)管機(jī)構(gòu)要求在生產(chǎn)的關(guān)鍵階段進(jìn)行支原體檢測。通常采用qPCR的方式進(jìn)行。
支原體污染的來源有哪些？
支原體污染一旦發(fā)生，不僅對細(xì)胞培養(yǎng)造成嚴(yán)重影響，甚至可能導(dǎo)致實(shí)驗(yàn)結(jié)果失真。而且支原體污染在細(xì)胞培養(yǎng)實(shí)驗(yàn)中相當(dāng)常見。因此，預(yù)防措施是確保細(xì)胞培養(yǎng)環(huán)境和實(shí)驗(yàn)結(jié)果可靠性的重要手段。
01/ 良好的無菌技術(shù)及實(shí)驗(yàn)操作，保證操作不會引入新的污染
02/ 保持實(shí)驗(yàn)空間的清潔
03/ 確保從可靠的來源獲取細(xì)胞，減少不同細(xì)胞之間的交叉?zhèn)魅?/span>
04/ 防止交叉污染
05/ 減少氣溶膠生成
06/ 謹(jǐn)慎使用抗*素
07/ 定期支原體篩查
08/ 丟棄或處理受到支原體污染的細(xì)胞
09/ 保持良好的記錄
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在科研中，支原體檢測是確保細(xì)胞培養(yǎng)純凈性的重要環(huán)節(jié)。以下是一些在科研中常見的支原體檢測方法：
1. 支原體培養(yǎng)法：這是一種傳統(tǒng)的檢測方法，通過將細(xì)胞培養(yǎng)物接種到特定的培養(yǎng)基中，觀察是否有支原體生長。這是直接的檢測方法，但耗時較長，通常需要數(shù)周時間。
2. DNA染色法：使用熒光染料（如Hoechst或DAPI）染色細(xì)胞核，然后通過熒光顯微鏡觀察。這種方法操作簡便，可以快速得到結(jié)果，但特異性不高，可能會有假陽性。
3. 聚合酶鏈反應(yīng)（PCR）法：這是一種分子生物學(xué)技術(shù)，通過設(shè)計特異性的引物，擴(kuò)增支原體DNA，從而檢測支原體的存在。PCR法具有高靈敏度和特異性，已成為日常細(xì)胞培養(yǎng)維護(hù)的可靠方法。
4. 核酸擴(kuò)增技術(shù)（NAT）：NAT技術(shù)通過擴(kuò)增并檢測特定的支原體基因組保守序列來進(jìn)行支原體污染檢測，具有快速、簡便的特點(diǎn)。
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