HEPES使用方法有兩種：(1)HEPES可按所需的濃度直接加入到配制的培養(yǎng)液中，再過濾除菌。每1000ml培養(yǎng)液中加入2.38克HEPES，待溶后用lNNaOH調(diào)pH至7.2，濾過除菌后使用。此時HEPES的使用濃度為10mmol/L。(2)亦可配成100x貯存液(lmol/L)，使用前取99ml培養(yǎng)液加入lml貯存液，**終應用濃度仍為10mmol/L。lmol/L(100x)HEPES貯存液配制方法：取23.8gHEPES溶于90ml雙蒸水中，用lNNaOH調(diào)pH至7.5一8.0，然后用水定容至100ml，過濾除菌，分裝小瓶(2ml/瓶)，4℃或-20℃保存。需要注意的是，HEPES緩沖液的使用終濃度為10-50mmol/L，對細胞無毒性作用。一般情況下，濃度為20mmol/L的HEPES即可達到緩沖能力?，F(xiàn)在市售HEPES為約10g包裝的小瓶，大家根據(jù)實際情況正確靈活配制就OK了國內(nèi)AVT注射用HEPES已登記。湖南HEPES現(xiàn)貨

（5）緩沖溶液在穩(wěn)定性方面各顯利弊：①Tris-HCl緩沖溶液pH值受外界影響較大，一般現(xiàn)用現(xiàn)配。同時需要注意Tris是一級脂肪胺，分子結(jié)構(gòu)中的氨基易與醛類化合物發(fā)生縮合反應，是一些生化實驗的抑制劑。②硼酸鹽緩沖液有一定毒性，不宜用做注射液或者口服液的緩沖液。③雖然磷酸鹽緩沖溶液穩(wěn)定性很好，但磷酸根具有一定的絡(luò)合能力會抑制一些與金屬離子有關(guān)的生化反應。④HEPES緩沖溶液是較理想的生物緩沖劑，但其有多種生物學效應，如：縮短血液凝固時間、減緩平滑肌收縮頻率以及阻斷細胞膜上的陰離子通道等，在一定程度上會影響患者身體狀態(tài)，使用時應需注意。湖南HEPES現(xiàn)貨AVT穩(wěn)定供貨注射級HEPES。

注射級氨丁三醇緩沖液優(yōu)點如下：1.Tris堿的堿性較強，所以可以只用這一種緩沖體系配制pH范圍由酸性到堿性的大范圍pH值的緩沖液，應用范圍廣；2.Tris緩沖液對生物化學過程干擾很小，不與鈣、鎂離子及重金屬離子發(fā)生沉淀；3.Tris在水中溶解度高，對很多酶的反應是惰性的；4.Tris緩沖能力高，在pH7.5-9.0之間有較強的緩沖能力；5.Tris緩沖劑應用***，在生物化學、分子生物學、體外診斷、化妝品、涂料等領(lǐng)域發(fā)揮重要作用。注射級HEPES！

生物緩沖劑HEPES粉末事實證明，HEPES優(yōu)于碳酸鹽緩沖液等其他緩沖液，可以避免二氧化碳釋放導致細胞微細化生長，因此在細胞培養(yǎng)中頻繁使用。HEPES的PH值隨溫度下降而下降，但磷酸鹽與碳酸氫鹽緩沖液的解離常數(shù)pK幾乎不隨溫度變化。HEPES的行為與水相似，溫度降低解離常數(shù)降低，HEPES可用于維持酶在低溫下的結(jié)構(gòu)和功能。HEPES為白色結(jié)晶粉末，純度高、質(zhì)量好，主要含量在99.50%以上，鐵離子在5ppm以下，硫酸鹽在0.05%以下，重金屬殘留量在10ppm以下。提供少量試用樣品粉末，可自行配置于溶液中檢測使用。GMP條件下生產(chǎn)艾偉拓穩(wěn)定供貨注射級HEPES。

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生化實驗室常用的緩沖系主要有磷酸、檸檬酸、碳酸、醋酸、巴比妥酸、Tris（三羥甲基氨基甲烷）等系統(tǒng)，生化實驗或研究工作中要慎重地選擇緩沖體系，因為有時影響實驗結(jié)果的因素并不是緩沖液的pH值，而是緩沖液中的某種離子。如硼酸鹽、檸檬酸鹽、磷酸鹽和三羥甲基甲烷等緩沖液都可能產(chǎn)生不需要的化學反應。硼酸鹽：硼酸鹽與許多化合物形成復鹽、如蔗糖。檸檬酸鹽：檸檬酸鹽離子容易與鈣結(jié)合，所以存在有鈣離子的情況下不能使用。磷酸鹽：在有些實驗，它是酶的抑止劑或甚至是一個代謝物，重金屬易以磷酸鹽的形式從溶液中沉淀出來。而且它在pH7.5以上時緩沖能力很小。三羥甲基氨基甲烷：它可以和重金屬一起作用，但在有些系統(tǒng)中也起抑制作用。其主要缺點時溫度效應。這點往往被忽視，在室溫pH是7.8的Tris緩沖液，4℃時是8.4，37℃時是7.4，因此，4℃配制的緩沖液在37℃進行測量時，其氫離子濃度就增加了10倍。在pH7.5以下，其緩沖能力極為不理想。湖南HEPES現(xiàn)貨

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