沙土保藏法（1）取河沙加入10％稀鹽酸，加熱煮沸30分鐘，以去除其中的有機(jī)質(zhì)。（2）倒去酸水，用自來(lái)水沖洗至中性。（3）烘干，用40目篩子過(guò)篩，以去掉粗顆粒，備用。（4）另取非耕作層的不含腐植質(zhì)的瘦黃土或紅土，加自來(lái)水浸泡洗滌數(shù)次，直至中性。（5）烘干，碾碎，通過(guò)100目篩子過(guò)篩，以去除粗顆粒。（6）按一份黃土、三份沙的比例（或根據(jù)需要而用其他比例，甚至可全部用沙或全部用土）摻合均勻，裝入10×100mm的小試管或安瓿管中，每管裝1g左右，塞上棉塞，進(jìn)行滅菌，烘干。（7）抽樣進(jìn)行無(wú)菌檢查，每10支沙土管抽一支，將沙土倒入肉湯培養(yǎng)基中，37℃培養(yǎng)48小時(shí)，若仍有雜菌，則需全部重新滅菌，再作無(wú)菌試驗(yàn)，直至證明無(wú)菌，方可備用。（8）選擇培養(yǎng)成熟的（一般指孢子層生長(zhǎng)豐滿的，營(yíng)養(yǎng)細(xì)胞用此法效果不好）優(yōu)良菌種，以無(wú)菌水洗下，制成孢子懸液。（9）于每支沙土管中加入約0．5ml（一般以剛剛使沙土潤(rùn)濕為宜）孢子懸液，以接種針拌勻。（10）放入真空干燥器內(nèi)，用真空泵抽干水分，抽干時(shí)間越短越好，務(wù)使在12小時(shí)內(nèi)抽干。（11）每10支抽取一支，用接種環(huán)取出少數(shù)沙粒，接種于斜面培養(yǎng)基上，進(jìn)行培養(yǎng)，觀察生長(zhǎng)情況和有無(wú)雜菌生長(zhǎng)。 微生物菌劑在改善土壤理化性質(zhì)方面發(fā)揮積極作用。蓮藕用微生物菌劑

    菌劑、菌肥較大的區(qū)別在于產(chǎn)品中營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)及有機(jī)物料的含量，使用中需結(jié)合實(shí)際需求選擇對(duì)路產(chǎn)品。誤區(qū)3：認(rèn)為一種產(chǎn)品中菌的種類越多、菌種數(shù)量越大越好復(fù)合菌劑的使用效果會(huì)受到不同菌種生長(zhǎng)習(xí)性的影響，盲目的復(fù)合，極易造成菌種間的拮抗，影響效果發(fā)揮。產(chǎn)品使用后起作用的只有活菌，因此菌衡量的標(biāo)準(zhǔn)為“有效活菌數(shù)（CFU）”，有效活菌數(shù)量越大效果越好。此外，菌的純度也至關(guān)重要，當(dāng)產(chǎn)品中霉菌雜菌數(shù)及雜菌率超標(biāo)時(shí)也會(huì)影響應(yīng)用。市場(chǎng)上少數(shù)不合格產(chǎn)品中含有致病菌，不僅修復(fù)不了土壤，還會(huì)導(dǎo)致病害發(fā)生。誤區(qū)4：一個(gè)季節(jié)使用一次就可以，一次使用作用可持續(xù)多年部分微生物菌種施入土壤后會(huì)大量繁殖，當(dāng)數(shù)量達(dá)到一定程度后成為優(yōu)勢(shì)菌群，但外部環(huán)境的改變會(huì)導(dǎo)致有益菌死亡，從而影響有益菌群在土壤微生物系統(tǒng)中的地位，要繼續(xù)保持其地位，就需要在作物的生長(zhǎng)期多次使用微生物肥料來(lái)補(bǔ)充有益菌。誤區(qū)5：不注重菌的種類，認(rèn)為一種菌可以解決多種問(wèn)題少數(shù)用戶缺乏對(duì)癥用菌的意識(shí)，選購(gòu)產(chǎn)品時(shí)只注重是否含菌，而不關(guān)注菌的種類，使用不對(duì)癥的菌品種后，達(dá)不到所需目的。對(duì)于現(xiàn)階段在農(nóng)業(yè)部獲得登記的微生物品種，它們具有不同的功能。官方微生物菌劑出廠價(jià)微生物菌劑助力作物根系擴(kuò)展，增強(qiáng)吸收能力。

    -50—-80℃、干冰酒精快速凍結(jié)（約-70℃）和液氮（-196℃）等保藏法。冷凍干燥保藏法先使微生物在極低溫度（-70℃左右）下快速冷凍，然后在減壓下利用升華現(xiàn)象除去水分（真空干燥）。有些方法如濾紙保藏法、液氮保藏法和冷凍干燥保藏法等均需使用保護(hù)劑來(lái)制備細(xì)胞懸液，以防止因冷凍或水分不斷升華對(duì)細(xì)胞的損害。保護(hù)性溶質(zhì)可通過(guò)氫和離子鍵對(duì)水和細(xì)胞所產(chǎn)生的親和力來(lái)穩(wěn)定細(xì)胞成分的構(gòu)型。保護(hù)劑有牛乳、血清、糖類、甘油、二甲亞砜等。器材細(xì)菌、酵母菌，放線菌和霉菌；肉膏蛋白胨斜面培養(yǎng)基，滅菌脫脂牛乳，滅菌水，化學(xué)純的液體石蠟，甘油，五氧化二磷，河沙，瘦黃土或紅土，冰塊、食鹽，干冰，95％酒精，10％鹽酸，無(wú)水氯化鈣；滅菌吸管，滅菌滴管，滅菌培養(yǎng)皿，管形安瓿管，淚滴形安瓿管（長(zhǎng)頸球形底），40目與100目篩子，油紙，濾紙條（0．5×1．2cm），干燥器，真空泵，真空壓力表，噴燈，L形五通管，冰箱，低溫冰箱（-30℃），液氮冷凍保藏器。操作步驟各保藏法的應(yīng)用范圍及優(yōu)缺點(diǎn)下列各法可根據(jù)實(shí)驗(yàn)室具體條件與需要選做。斜面低溫保藏法將菌種接種在適宜的固體斜面培養(yǎng)基上，待菌充分生長(zhǎng)后，棉塞部分用油紙包扎好，移至2—8℃的冰箱中保藏。

    不需特殊設(shè)備，且不需經(jīng)常移種。缺點(diǎn)是保存時(shí)必須直立放置，所占位置較大，同時(shí)也不便攜帶。從液體石蠟下面取培養(yǎng)物移種后，接種環(huán)在火焰上燒灼時(shí)，培養(yǎng)物容易與殘留的液體石蠟一起飛濺，應(yīng)特別注意。3．濾紙保藏法（1）將濾紙剪成0．5×1．2cm的小條，裝入0．6×8cm的安瓿管中，每管1—2張，塞以棉塞，1．05kg/cm2>，121．3℃滅菌30分鐘。（2）將需要保存的菌種，在適宜的斜面培養(yǎng)基上培養(yǎng)，使充分生長(zhǎng)。（3）取滅菌脫脂牛乳1—2ml滴加在滅菌培養(yǎng)皿或試管內(nèi)，取數(shù)環(huán)菌苔在牛乳內(nèi)混勻，制成濃懸液。（4）用滅菌鑷子自安瓿管取濾紙條浸入菌懸液內(nèi)，使其吸飽，再放回至安瓿管中，塞上棉塞。（5）將安瓿管放入內(nèi)有五氧化二磷作吸水劑的干燥器中，用真空泵抽氣至干。（6）將棉花塞入管內(nèi)，用火焰熔封，保存于低溫下。（7）需要使用菌種，復(fù)活培養(yǎng)時(shí)，可將安瓿管口在火焰上燒熱，滴一滴冷水在燒熱的部位，使玻璃破裂，再用鑷子敲掉口端的玻璃，待安瓿管開(kāi)啟后，取出濾紙，放入液體培養(yǎng)基內(nèi)，置溫箱中培養(yǎng)。細(xì)菌、酵母菌、絲狀真“菌”均可用此法保藏，前兩者可保藏2年左右，有些絲狀真“菌”甚至可保藏14—17年之久。此法較液氮、冷凍干燥法簡(jiǎn)便，不需要特殊設(shè)備。 微生物菌劑富含活性菌，有效改善土壤微生物環(huán)境，促進(jìn)作物生長(zhǎng)。

生物菌肥是一種利用菌類進(jìn)行發(fā)酵以提高農(nóng)業(yè)生產(chǎn)效益的農(nóng)業(yè)生產(chǎn)技術(shù)，生物菌肥施用的效果和季節(jié)關(guān)系密切，下面我們來(lái)具體探討一下生物菌肥的施用季節(jié)及其效果。春季是農(nóng)作物生長(zhǎng)的重要季節(jié)，施用生物菌肥可以增強(qiáng)土壤中菌類的活性，改善土壤環(huán)境，調(diào)節(jié)土壤溫度、濕度等因素，有利于農(nóng)作物的根系生長(zhǎng)和吸收。同時(shí)，春季氣溫較低，土壤生物代謝緩慢，施用生物菌肥可以促進(jìn)土壤菌群的活性，提高土壤肥力。另外，春季是農(nóng)作物播種、移栽的季節(jié)，生物菌肥可增加土壤有機(jī)質(zhì)含量和有益微生物數(shù)量，提高土壤肥力。綜上所述，春季適當(dāng)施用生物菌肥，可以促進(jìn)農(nóng)作物生長(zhǎng)，提高產(chǎn)量。微生物菌劑中的微生物能夠分泌有機(jī)酸，促進(jìn)土壤礦物質(zhì)的溶解。蓮藕用微生物菌劑

微生物菌劑在促進(jìn)作物生長(zhǎng)和產(chǎn)量提高方面效果明顯。蓮藕用微生物菌劑

    乳酸菌還能夠抑制連作障礙產(chǎn)生的致病菌增殖。酵母菌群：合成促進(jìn)根系生長(zhǎng)及細(xì)胞分裂的活性化物質(zhì)，促進(jìn)其它有效微生物增殖所需要的基質(zhì)（食物）提供重要的給養(yǎng)保障。凝結(jié)芽孢桿菌：可降低環(huán)境中的氨氣、硫化氫等有害氣體。提高果實(shí)中氨基酸的含量。米曲霉：使秸稈中的有機(jī)質(zhì)成為植物生長(zhǎng)所需的營(yíng)養(yǎng)，提高土壤有機(jī)質(zhì)，改善土壤結(jié)構(gòu)。分解蛋白質(zhì)、纖維素、半纖維素、木質(zhì)素等，并將嗜熱、耐熱細(xì)菌、真“菌”、酵母菌菌株及相關(guān)分解酶復(fù)合而成，降解能力強(qiáng)，同時(shí)能夠達(dá)到升溫、除臭、消除病蟲害、雜草種子和提高養(yǎng)分的效果。黑曲霉：裂解大分子有機(jī)物和難溶無(wú)機(jī)物，便于作物吸收利用，改善土壤結(jié)構(gòu)，增強(qiáng)土壤肥力，提高作物產(chǎn)量。綠色木霉：是所產(chǎn)纖維素酶活性比較高的菌株之一，所產(chǎn)生的纖維素酶對(duì)作物有降解作用，效果非常好，同時(shí)又是一種資源豐富的拮抗微生物，具有保護(hù)和治“療”雙重功效，可有效防治土傳性“病”害。哈茨木霉：用來(lái)預(yù)防由腐霉菌、立枯絲核菌、鐮刀菌、黑根霉、柱孢霉、核盤菌、齊整小核菌等病原菌引起的植物病害。淡紫擬青霉：對(duì)多種線蟲都有防治效能，是防治根結(jié)線蟲有前途的生防制劑。蓮藕用微生物菌劑