精子手工計數(shù)原理及操作方法

1.原理：將精液用適當(dāng)?shù)南♂屢鹤饕欢肯♂尯螅靹蜃⑷胗嫈?shù)池內(nèi)計數(shù)，再算出每毫升精液中精子數(shù)。2.方法（按照***版第四版《全國臨床檢驗操作規(guī)程》）1).于小試管內(nèi)加精子稀釋液0.38ml,取液化精液20μl,加入稀釋液內(nèi)混勻。2).充分搖勻后,滴入改良Neubauer計數(shù)板的計數(shù)池內(nèi),靜置1~2分鐘,待精子下沉后,以精子頭部作為基準(zhǔn)進行計數(shù)。

3.計算1).如每個**中方格內(nèi)精子少于10個,應(yīng)計數(shù)所有25個中方格內(nèi)的精子數(shù)。2).如每個**中方格內(nèi)精子在10~40個,應(yīng)計10個中方格內(nèi)的精子數(shù)。3).如每個**中方格內(nèi)精子多于40個,應(yīng)計數(shù)5個中方格內(nèi)的精子數(shù)。公式：精子數(shù)=計數(shù)結(jié)果/計數(shù)中方格×25×1/計數(shù)池高度×20×103/ml=計數(shù)結(jié)果/計數(shù)中方格×1/計數(shù)池高度×5×103/ml 精子分析儀與人工方法相比具有客觀，高效，高精度的優(yōu)點。上海精子分析STR

男科實驗室中通常所指的質(zhì)量包含三個方面：實驗室內(nèi)部質(zhì)量、醫(yī)生處置的質(zhì)量以及結(jié)果的質(zhì)量［3］。1．實驗室內(nèi)部質(zhì)量與**分析有關(guān)的實驗室內(nèi)部質(zhì)量主要是工作人員的素質(zhì)和所采用儀器的質(zhì)量。工作人員應(yīng)經(jīng)過特殊的培訓(xùn)?儀器必須處于正常狀態(tài)、確保準(zhǔn)確的結(jié)果?操作應(yīng)符合規(guī)程［4］。CASA系統(tǒng)本身的質(zhì)量難于評定。硬件?如顯微鏡、影像攝影機和計算機經(jīng)檢查便可確定其可靠性。但軟件并非如此?軟件中存在不確定的因素?算法是軟件中**重要的部分?通常制造者保守這些秘密；因此?有關(guān)軟件的數(shù)學(xué)上、信息性的、統(tǒng)計學(xué)的或生物測量方面的檢查實驗室難于進行。北京計算機輔助精子分析WOB該設(shè)備還具備良好的售后服務(wù)，Hamilton Thorne公司提供培訓(xùn)和技術(shù)支持，確保用戶能夠充分利用設(shè)備的功能。

七、精子形態(tài)檢查[正常參考值]畸形精子：＜10%-15%； 凝集精子：＜10%；未成熟精細胞：＜1%。[臨床意義]1．精索靜脈曲張病人的畸形精子增多，提示精子在不成熟時已進入精液，或靜脈回流不暢造成陰囊內(nèi)溫度過高和睪丸組織缺氧，或血液帶有毒性代謝產(chǎn)物從腎或腎上腺靜脈逆流至睪丸，上述原因均有損于精子形態(tài)。2. 精液中凝集精子增多，提示生殖道***或免疫功能異常。3. 睪丸曲細精管生精功能受到藥物或其他因素影響或傷害時，精液中可出現(xiàn)較多病理性未成熟精細胞。

八、精液細胞檢查[正常參考值]白細胞(WBC)：＜5個/HP(高倍鏡視野)；紅細胞(RBC)：0-偶見/HP。[臨床意義]1．精液中白細胞增多，常見于精囊炎、前列腺炎及結(jié)核等。2．精液中紅細胞增多，常見于精囊結(jié)核、前列腺*等。3. 精液中若查到*細胞，對生殖系*有診斷意義。

1.基本檢查：是確定精液變量穩(wěn)定的常規(guī)方法，不僅是男科實驗室，任何開展精液檢查的實驗室都能遵循。精子計數(shù)依然推薦使用改良Neubauer血細胞計數(shù)板的方法，但計數(shù)的方法有了改變。明確推薦了伊紅笨胺黑染色法作為精子存活率診斷的優(yōu)先方法，伊紅染色和低滲腫脹實驗只作為備選方法。刪減了參考值下限的描述。對于精子活動率大于40%的樣本沒有必要做存活率評估。與第5版手冊中淡粉色判讀為活精子不同，明確了只有精子頭為白色的精子為活精子、淡粉色為死精子。臨床數(shù)據(jù)表明，鑒別快速前向運動精子非常重要。因此，關(guān)于精子活力分級，第6版手冊建議恢復(fù)到快速前向運動、慢速前向運動、非前向運動和不活動4個活力級別，但精子活動率的參考值范圍卻依然是按前向運動(PR)、非前向運動(NP)、不活動(IM)3個活力級別計算。第6版手冊強調(diào)，精子形態(tài)學(xué)評估的價值不僅在于其可用于判斷自然妊娠和輔助生殖技術(shù)(ART)結(jié)局的預(yù)后，還可以為男性生殖***包括睪丸和附睪功能判斷提供更多診斷信息。對于3%和5%的精子“正?！毙螒B(tài)率的判斷，則要求必須由訓(xùn)練有素的人員評估1500個精子來完成；對于無尾精子(只有頭部的精子)超過總精子數(shù)20%的精液，應(yīng)單獨計算并在報告中注明；Hamilton Thorne精子分析儀是一款功能強大、準(zhǔn)確可靠的精子質(zhì)量評估設(shè)備。

**分析是判斷男性生育能力的**基本和**重要的常規(guī)檢測方法。目前我國醫(yī)學(xué)實驗室普遍使用人工方法進行分析，結(jié)果缺少準(zhǔn)確性、客觀性和可比性。雖然WHO于近幾年多次修改并推薦**常規(guī)分析的標(biāo)準(zhǔn)方法，但仍不能充分克服人為主觀因素的影響。特別是對精子的活率和活力的分級主要依賴檢驗者的經(jīng)驗和主觀判斷，不同的技術(shù)人員分析的結(jié)果有時相差甚遠，對精子運動能力的判斷缺少嚴(yán)格的量化指標(biāo)。因此應(yīng)用一種統(tǒng)一、標(biāo)準(zhǔn)和快速的檢測方法替代人工方法十分必要。計算機計算機輔助**分析系統(tǒng)在**質(zhì)量檢測中的應(yīng)用49中國衛(wèi)生信息管理雜志第8卷第6期輔助精子分析（Computer-aidedSpermAnalysis,CASA）系統(tǒng)逐步取代了人工操作，在男性不育癥臨床診治及科研中CASA技術(shù)彌補了人工方法進行**分析的不足。HAMILTON THORNE精子分析儀可分析參數(shù)，直線性（LIN）?：曲線軌跡的直線性。南京Hamilton Thorne精子分析LIN

選擇合適的CASA檢測原理和設(shè)備，確保幀率要求，避免因設(shè)備問題影響檢測結(jié)果?。上海精子分析STR

在精子形態(tài)學(xué)檢查中，通過CASA系統(tǒng)對精子形態(tài)學(xué)特征進行分析，有些特征（細胞大小、形狀、光學(xué)密度、尾的存在以及其它）可由操作者選擇，這樣就會引起同一標(biāo)本在不同實驗室或不同分析者測得的結(jié)果一致性較差[10]。4結(jié)論和展望計算機輔助**分析具有較好的可靠性、重復(fù)性和穩(wěn)定性，與傳統(tǒng)的光學(xué)顯微鏡目測估計相比，更具有快速方便、對比性強、便于交流等明顯優(yōu)點[11]，常規(guī)**檢查無法測定精子微細運動特點，顯示CASA在男性不育癥診斷篩選中的優(yōu)越性。王益鑫亦發(fā)現(xiàn)，部分手工**檢查正常的不育患者，進行**全自動分析及生化檢測，均發(fā)現(xiàn)明顯異常[12]。因此，CASA系統(tǒng)在男性生殖能力檢驗方面具有重要的實際應(yīng)用意義。上海精子分析STR