CASA系統(tǒng)雖然有諸多優(yōu)點,但是很多因素都會影響到CASA儀器的使用及準確性。CASA系統(tǒng)進行**分析應(yīng)注意以下幾點:3.1標本的采集與制作(1)采集前禁欲2?7天,禁欲時間過長、過短對**質(zhì)量都有一定影響。(2)容器要清潔。(3)特殊情況下,*可使用專門為采集**設(shè)計的無毒性避孕套,普通的乳膠避孕套因含有損害精子活力的物質(zhì)不可使用。(4)注意保溫(20?37℃),并于30分鐘內(nèi)送檢驗科。(5)標本置于37℃水浴.精子運動參數(shù)具有溫度敏感性,因此要求計數(shù)池應(yīng)于分析儀恒溫板上預(yù)溫。(6)密切注意**液化的情況,確保液化時間準確,因**樣本隨放置時間的延長,精子活動力及活動率有減少的趨勢。標本液化后取混勻樣本**1滴滴在樣品池中間,然后進行分析。(7)檢測精子活動力,標本密度應(yīng)控制在2×106/ml到50×106/ml之間。具有高密度(如高于50×106/ml)精子的標本,通常會增加碰撞的頻率,并可能由此出現(xiàn)錯誤的結(jié)果。在這種情況下,建議用同源精漿稀釋標本。IVOS具有高分辨率和高靈敏度的特點,能夠捕捉到微小的細節(jié)和變化,進一步提高了精子分析的準確性。廣州Hamilton Thorne精子分析精確溫度控制
精液顯微鏡檢查
(1)精子存活率:排精后30~60分鐘,正常精子存活率應(yīng)為80%~90%,精子存活率降低是導(dǎo)致不育的重要原因。(2)精子活動力:指精子活動狀態(tài),也是指活動精子的質(zhì)量。世界衛(wèi)生組織(WHO)推薦將精子活動力分為4級:①精子活動好,運動迅速,活潑有力,直線向前運動;②精子活動較好,運動速度尚可,游動方向不定,呈直線或非直線運動,帶有回旋;③精子運動不良,運動遲緩,原地打轉(zhuǎn)或抖動,向前運動能力差;④死精子,精子完全不活動。正常精子活動力應(yīng)在③級以上,若>40%的精子活動不良(③、④)級,常是導(dǎo)致男性不育的重要原因。精子活動力低,主要見于精索靜脈曲張、泌尿生殖系統(tǒng)非特異性***,應(yīng)用某些藥物如抗瘧藥、雄***等所致。 美國水生動物精子分析WOBIVOS和CEROS集成了智能化的分析軟件,能夠自動識別和計算精子的各項參數(shù),減少了人工操作的誤差。
精子計數(shù)是在顯微鏡下計算一次排出的精液中精子的數(shù)量將精子計數(shù)值乘以精液量就可得出一次**的量。
精液液化后將樣本按一定比例稀釋和固定后,滴于血細胞計數(shù)板上,在顯微鏡下計數(shù)紅細胞計數(shù)區(qū)內(nèi)的所有精子數(shù)并換算為每m1內(nèi)所含精子數(shù)。此外還可用電子細胞計數(shù)儀經(jīng)調(diào)整閾值設(shè)置后計數(shù)精子數(shù)量。
將已經(jīng)液化的精液標本均勻混合,用白細胞計數(shù)吸管吸精液至0.5刻度,再吸稀釋液至11刻度,振蕩三分鐘,然后置于血球計數(shù)板內(nèi),計數(shù)二大格(每格面積1平方毫米)之精子數(shù),在尾數(shù)后加5個“0”即得每毫升精液內(nèi)精子數(shù)。例如計數(shù)為1280個,則每毫升精子應(yīng)為128,000,000。精液稀釋液之配制:重碳酸鈉5克、福爾馬林1毫升、蒸餾水加至100毫升。稀釋液內(nèi)重碳酸鈉有消化粘液的作用,福爾馬林有使精子制動的作用。如精液之稠度過高而不易吸取時,可以精液1毫升混勻于稀釋液19毫升內(nèi),稀釋后進行計數(shù)。如精子的數(shù)目極少,亦可改為稀釋10倍計數(shù)。每次排精75%的精子是從附睪尾部所貯存的,還有25%是由輸精管道的其他部分來的,因此單憑一次排精的精子計數(shù)來衡量睪丸生精機能是不***的。只有在排精后間隔4-5天以后多次精液檢查,才能比較正確地從這些精子計數(shù)來反映睪丸的生精機能。
九、精液酸堿度(pH)檢查[正常參考值]7.2-8.0。[臨床意義]1.精液pH值<7.0,多見于少精或無精癥,常反映輸精管道阻塞、先天性精囊缺如或附睪病變等。2.精液pH值>8.0,常見于急性***,如精囊炎、前列腺炎等。十、男性生育力指數(shù)測定[計算公式]I=M(N×V)/(A×106)式中I為男性生育力指數(shù);M為活動精子百分率;N為每毫升的精子數(shù);V為精子運動的速度;A為畸形精子的百分率。[正常參考值]正常人生育力指數(shù)>l。[臨床意義]1.生育指數(shù)為0,表明完全無生育能力。2.生育指數(shù)為0-1之間,表明有不同程度的生育障礙。在精子研發(fā)的歷程中,計算機輔助精子檢測經(jīng)歷了黑白圖像機、彩色圖像檢測。目前先進的是熒光精子圖像檢測。
CASA,即計算機輔助精子分析,是一種利用技術(shù)手段對精子活力、濃度和形態(tài)進行精確評估的方法。WHO第五版指南強調(diào),相比人工檢測,CASA提供更準確的數(shù)據(jù)和精子動力學(xué)參數(shù),如前向運動和超活化運動,以及獲能精子特征參數(shù)。研究顯示,CASA檢測的精子參數(shù)與體內(nèi)外受精成功率和受孕時間有***關(guān)聯(lián)。使用CASA分析儀,通常通過相差顯微鏡識別活動精子,適用于精子動力學(xué)分析。但要確??煽拷Y(jié)果,操作者需注意標本制備、幀頻率、精子濃度等因素。每份樣本至少需要分析200個活動精子的運動軌跡,更多精子樣本有助于分類和變異性的分析。國內(nèi)已有自主研發(fā)的精子分析儀,通常進行兩次分析,每次至少200個精子,結(jié)果通過統(tǒng)計學(xué)分析得出。CASA在評估精子濃度時,需精確測量精子體積,確保**完全液化并充分混勻。計數(shù)板的精確性和計數(shù)一致性是關(guān)鍵,每次檢測需滿足5個視野和200條以上精子的比較低要求。對于高濃度**,可能需要稀釋以減少誤差。形態(tài)分析方面,CASA能夠定量評估精子頭部、中段和主段,尾部缺陷可通過活力評估。對于碎片過多或黏稠的**,可能需要洗滌以減少背景干擾。CASA中涉及一系列術(shù)語,如VCL(曲線速度)、VSL(直線速度)等,它們反映了精子運動的不同特性。精子分析儀參數(shù),平均路徑速率(VAP)?:精子頭沿其平均路徑移動時的時均速率。廣州Hamilton Thorne精子分析精確溫度控制
?精子分析可以分析參數(shù)有,曲線速率(VCL)?:精子頭沿其實際曲線運動的時均速率。廣州Hamilton Thorne精子分析精確溫度控制
醫(yī)生為了鑒定男性生育能力,常囑男方作精液檢查,正常精液顏色為灰白色或乳白色。如節(jié)欲時間長者,可呈淡黃色,若出現(xiàn)鮮紅色. 暗紅色,則提示患者有炎癥或生殖道損傷。每次排精量為2~6毫升,常受排精次數(shù)與頻率的影響。新鮮精液呈稠厚膠凍狀,1小時之內(nèi)應(yīng)液化為稀薄的液體,用一根小玻璃棒插入精液中再提起,所形成的精液絲長度一般不超過2厘米,否則視為異常。精液呈弱堿性,PH值為7.2~7.8。正常精子數(shù)應(yīng)超過2000萬/毫升。排精后1小時內(nèi)活動精 >=50%。世界衛(wèi)生組織推薦精子活動力分為四級:0級:不活動;1級:精子原地擺動;2級:有中等的前向運動;3級:前向運動活躍,快速直線運動。正常的精子活動力為2~3級的精子>=40%~50%.精子形態(tài):畸形精子小于50%。分析男性生育能力不能單從精液的一項指標定論,應(yīng)對精子數(shù)量 活力 活動率 液化時間 畸形率等多方面進行綜合能力分析。 采集精液前5~7天內(nèi)必須停止性生活,并且不得有**、夢遺等情況,還應(yīng)禁煙戒酒,忌服對生精功能有影響的藥物等。廣州Hamilton Thorne精子分析精確溫度控制