前沿性檢查:目前不作為生育力低下男性初步評估的常規(guī)方法。這一部分包括了非常專業(yè)化的、主要用于研究的方法和其他新興檢測技術(shù)。有研究認(rèn)為,氧化應(yīng)激可能是影響人類精子功能和妊娠結(jié)局的重要因素;新的證據(jù)也表明了精子DNA完整性和染色質(zhì)組裝與生育力的關(guān)系。前沿性檢查一節(jié)中詳細(xì)介紹了精子氧化應(yīng)激和活性氧實(shí)驗(yàn)、精子染色質(zhì)檢測(苯胺藍(lán)和色霉素A3染色)的具體實(shí)驗(yàn)操作及討論。手冊重寫了計(jì)算機(jī)輔助精子分析(CASA)部分,強(qiáng)調(diào)了CASA對于檢測精子濃度的局限性與質(zhì)控要求,增加了CASA檢測精子超活化運(yùn)動(dòng)的內(nèi)容。對精子跨膜離子流和轉(zhuǎn)運(yùn)的功能分析,可更好地了解男性不育因素和男性生殖***疾病。為此,手冊新增了檢測精子跨膜離子流和轉(zhuǎn)運(yùn)的內(nèi)容。電腦全自動(dòng)精子采集分析儀是一款高科技醫(yī)療設(shè)備,它巧妙地融合了現(xiàn)代計(jì)算機(jī)技術(shù)和自動(dòng)控制技術(shù)。美國狗精子分析精確溫度控制
醫(yī)生為了鑒定男性生育能力,常囑男方作精液檢查,正常精液顏色為灰白色或乳白色。如節(jié)欲時(shí)間長者,可呈淡黃色,若出現(xiàn)鮮紅色. 暗紅色,則提示患者有炎癥或生殖道損傷。每次排精量為2~6毫升,常受排精次數(shù)與頻率的影響。新鮮精液呈稠厚膠凍狀,1小時(shí)之內(nèi)應(yīng)液化為稀薄的液體,用一根小玻璃棒插入精液中再提起,所形成的精液絲長度一般不超過2厘米,否則視為異常。精液呈弱堿性,PH值為7.2~7.8。正常精子數(shù)應(yīng)超過2000萬/毫升。排精后1小時(shí)內(nèi)活動(dòng)精 >=50%。世界衛(wèi)生組織推薦精子活動(dòng)力分為四級(jí):0級(jí):不活動(dòng);1級(jí):精子原地?cái)[動(dòng);2級(jí):有中等的前向運(yùn)動(dòng);3級(jí):前向運(yùn)動(dòng)活躍,快速直線運(yùn)動(dòng)。正常的精子活動(dòng)力為2~3級(jí)的精子>=40%~50%.精子形態(tài):畸形精子小于50%。分析男性生育能力不能單從精液的一項(xiàng)指標(biāo)定論,應(yīng)對精子數(shù)量 活力 活動(dòng)率 液化時(shí)間 畸形率等多方面進(jìn)行綜合能力分析。 采集精液前5~7天內(nèi)必須停止性生活,并且不得有**、夢遺等情況,還應(yīng)禁煙戒酒,忌服對生精功能有影響的藥物等。廣州Hamilton Thorne精子分析重復(fù)性高CASA系統(tǒng)減少了人為因素對檢測結(jié)果的影響,提高了檢測的客觀性和可重復(fù)性?。
精子分析儀工作原理
以灰度識(shí)別CASA為例,采用高分辨率的攝影技術(shù)與顯微鏡結(jié)合,**標(biāo)本液化后吸入計(jì)數(shù),通過顯微鏡放大后,用圖像采集系統(tǒng)獲取精子動(dòng)、靜態(tài)圖像后輸入計(jì)算機(jī)。根據(jù)設(shè)定的精子大小和灰度、精子運(yùn)動(dòng)移位及運(yùn)動(dòng)參數(shù),對采集圖像進(jìn)行精子密度、活動(dòng)力、活動(dòng)率、運(yùn)動(dòng)特征等幾十項(xiàng)檢驗(yàn)項(xiàng)目動(dòng)態(tài)分析,由計(jì)算機(jī)處理后,打印出“**分析檢查報(bào)告以及精子動(dòng)態(tài)特征分布圖”。一次能對1000個(gè)精子進(jìn)行動(dòng)態(tài)檢測分析,2-3分鐘即可完成檢測 [1]。
優(yōu)點(diǎn):
操作簡便,用量少,檢測速度快,重復(fù)性優(yōu)于人工檢測,并且能夠快速、準(zhǔn)確的測定精子密度、活力、精子分級(jí)等,還可提供精子運(yùn)動(dòng)狀態(tài)的多種參數(shù)等。
缺點(diǎn):
影響分析結(jié)果的因素較多,除**本身性質(zhì)所含的固有誤差外,不同的精子計(jì)數(shù)池的相對準(zhǔn)確性和精確性可產(chǎn)生明顯不一致的效果。
CASA系統(tǒng)在男性生殖能力檢驗(yàn)應(yīng)用中的功能要求和參數(shù)設(shè)置CASA是將現(xiàn)代化的計(jì)算機(jī)技術(shù)和先進(jìn)的圖象處理技術(shù)應(yīng)用于精子質(zhì)量的臨床檢驗(yàn),通過對精子動(dòng)(靜)態(tài)圖象中精子特性的***分析,為臨床提供有關(guān)精子質(zhì)量各項(xiàng)指標(biāo)的準(zhǔn)確數(shù)據(jù)。CASA系統(tǒng)一般包括硬件和計(jì)算機(jī)軟件支持系統(tǒng)幾個(gè)部分:(1)相差顯微鏡、恒溫裝置和**技術(shù)板(Makler板、Macro板或MicroCell計(jì)數(shù)池等);(2)高速、高分辨率的攝像機(jī)和電視監(jiān)視器組成的攝像系統(tǒng);(3)計(jì)算機(jī)分析處理系統(tǒng)及打印機(jī)打印輸出。?HAMILTON THORNE精子分析儀可分析參數(shù),前向性(STR)?:平均路徑的直線性。
通過比較進(jìn)行質(zhì)量評估
1.室內(nèi)比較是采用同一個(gè)標(biāo)本在同一參數(shù)下?經(jīng)CASA多次測定后?應(yīng)用適當(dāng)?shù)慕y(tǒng)計(jì)學(xué)方法對測得數(shù)值進(jìn)行比較。在男科實(shí)驗(yàn)室中對CASA系統(tǒng)的質(zhì)量控制通常使用影像磁帶或完全相同的凍存**標(biāo)本進(jìn)行日間比較。當(dāng)室內(nèi)比較作為結(jié)果質(zhì)量的一種評估時(shí)?計(jì)算機(jī)中數(shù)值的在線獲得是極具優(yōu)勢的。
2.室間比較要求標(biāo)本向其他幾個(gè)實(shí)驗(yàn)室運(yùn)送文獻(xiàn)中的一些報(bào)道闡述了該方面的經(jīng)驗(yàn)但是運(yùn)動(dòng)精子是不能在不受限制的條件下運(yùn)輸?shù)膶⑵渲糜谝旱羞\(yùn)送需進(jìn)一步考慮更多的因素(解凍技術(shù)、標(biāo)本的處理等)這些因素會(huì)影響活動(dòng)力參數(shù);到目前為止室間比較的研究還未見滿意報(bào)道;Jorgensen等進(jìn)行了研究嘗試克服實(shí)驗(yàn)室間運(yùn)送解凍標(biāo)本的困難其研究方式是:邀請四個(gè)實(shí)驗(yàn)室的實(shí)驗(yàn)人員攜帶各自的儀器到同一個(gè)地點(diǎn)以各自通常采用的實(shí)驗(yàn)方法進(jìn)行精子評估但未見明確的結(jié)論。3.對于精子活力測定CASA系統(tǒng)的測定與直觀評估的比較有文獻(xiàn)進(jìn)行了報(bào)道但結(jié)果并不相同。認(rèn)為直觀評估揭示標(biāo)準(zhǔn)數(shù)值且其差異是由CASA系統(tǒng)的錯(cuò)誤引起的該觀點(diǎn)是不正確的;無論從理論上還是實(shí)踐中CASA數(shù)值比直觀評估所獲得的數(shù)值更接近于真值;對直線前進(jìn)的精子比例而言這一點(diǎn)是非常正確的。 計(jì)算機(jī)輔助精子分析(computer- assisted sperm analysis)是2014年公布的泌尿外科學(xué)名詞。南京Hamilton Thorne精子分析負(fù)相差
精子分析儀與人工方法相比具有客觀,高效,高精度的優(yōu)點(diǎn)。美國狗精子分析精確溫度控制
精子手工計(jì)數(shù)原理及操作方法
1.原理:將精液用適當(dāng)?shù)南♂屢鹤饕欢肯♂尯?,混勻注入?jì)數(shù)池內(nèi)計(jì)數(shù),再算出每毫升精液中精子數(shù)。2.方法(按照***版第四版《全國臨床檢驗(yàn)操作規(guī)程》)1).于小試管內(nèi)加精子稀釋液0.38ml,取液化精液20μl,加入稀釋液內(nèi)混勻。2).充分搖勻后,滴入改良Neubauer計(jì)數(shù)板的計(jì)數(shù)池內(nèi),靜置1~2分鐘,待精子下沉后,以精子頭部作為基準(zhǔn)進(jìn)行計(jì)數(shù)。
3.計(jì)算1).如每個(gè)**中方格內(nèi)精子少于10個(gè),應(yīng)計(jì)數(shù)所有25個(gè)中方格內(nèi)的精子數(shù)。2).如每個(gè)**中方格內(nèi)精子在10~40個(gè),應(yīng)計(jì)10個(gè)中方格內(nèi)的精子數(shù)。3).如每個(gè)**中方格內(nèi)精子多于40個(gè),應(yīng)計(jì)數(shù)5個(gè)中方格內(nèi)的精子數(shù)。公式:精子數(shù)=計(jì)數(shù)結(jié)果/計(jì)數(shù)中方格×25×1/計(jì)數(shù)池高度×20×103/ml=計(jì)數(shù)結(jié)果/計(jì)數(shù)中方格×1/計(jì)數(shù)池高度×5×103/ml 美國狗精子分析精確溫度控制