前列腺ai患者尿液外泌體中的miR-574-3p、miR-141-5p和miR-21-5p的表達水平明顯上升，表明這些miRNAs可用于前列腺ai的早期篩查。膽管ai是惡性程度較高的消化系統(tǒng)中流，發(fā)展隱蔽且臨床癥狀及體征出現(xiàn)晚，故給早期診斷帶來困難。高通量小RNA測序篩查了來自膽管ai和膽囊ai患者外泌體中一系列差異表達的miRNA，小RNA長度在正常個體、膽管ai患者和膽囊ai患者之間的分布存在明顯差異，膽管ai患者的外泌體中miR-96-5p、miR-151a-5p、miR-191-5p、miR-4732-3p明顯升高，而膽囊ai患者的外泌體中miR-151a-5p略有升高，為膽管ai和膽囊ai提供了一套新的生物診斷標志物。在抗原呈遞細胞中的外泌體發(fā)揮作用的報道后，人們對外泌體的興趣增強。exosome diagnostics

所有真核細胞類型包括造血細胞、上皮細胞、神經(jīng)細胞、干細胞、脂肪細胞和病癥細胞均可在培養(yǎng)條件下分泌外泌體。體內(nèi)所有體液，包括血液、唾液、腦脊液、腹水，甚至尿液中都可以分離得到外泌體。這些外泌體傳輸多種信號分子，包括蛋白質(zhì)、信使核糖核酸（mRNA）和非編碼核糖核酸（RNA），其攜帶的分子可以被其他細胞吸收。因此，外泌體可以將生物信息轉(zhuǎn)移到相鄰細胞。這種細胞間通信不只涉及生理功能，還涉及一些疾病的發(fā)病機理，包括瘤、心血管疾病和神經(jīng)退行性疾病等。外泌體提取文獻隨著今后的研究發(fā)展，外泌體功能逐步清晰，并擴大臨床應用。

在20世紀80年代，外泌體被描述為從網(wǎng)織紅細胞分泌的內(nèi)體來源的囊泡。人們對這些細胞外囊泡的興趣逐漸增加，因為它們似乎參與了很多細胞過程。外泌體攜帶蛋白質(zhì)、脂質(zhì)和RNAs，介導體內(nèi)不同細胞類型之間的細胞間通訊，從而影響正常和病理狀態(tài)。只有近，科學家才認識到將外泌體與其他類型的細胞外囊泡分開的困難，這排除了特定功能對不同類型分泌的囊泡的明確歸因。為了闡明這個復雜但正在發(fā)展的科學領(lǐng)域，該綜述著重于外泌體和其他分泌的細胞外囊泡的定義。討論了它們的生物發(fā)生，分泌及其后續(xù)的命運，因為它們的功能依賴于這些重要過程。

密度梯度離心是基于差速超高速離心的改良技術(shù)。該方法需預先利用常用的梯度液介質(zhì)如蔗糖、碘克沙醇和氯化銫等，在離心管中構(gòu)筑從底部到頂部密度逐漸降低的密度梯度帶。根據(jù)密度梯度構(gòu)建和沉降方式的不同,又可以分為速率區(qū)帶離心法和等密度梯度離心法,前者主要根據(jù)顆粒的沉降速率分離,介質(zhì)密度均小于外泌體密度,離心時樣品在向超速離心管底部移動時,會通過密度不斷增加的密度梯度區(qū)帶,密度大的顆粒更容易穿過密度更高的梯度層,更快地到達管底,因此控制離心的時間很重要;等密度梯度離心法中的密度梯度區(qū)帶,則會根據(jù)樣品液中各種溶質(zhì)成分來進行組合,離心過程中,無論離心時間多久,不同密度顆粒jin會富集到具有相同密度的梯度區(qū)帶,而不會沉淀到底部。外泌體在化療藥物的促轉(zhuǎn)移過程中具有重要的作用。

為獲得外泌體的大小、濃度、形態(tài)及蛋白質(zhì)組成等信息，可以通過電鏡、動態(tài)光散射、納米顆粒跟蹤分析儀、蛋白質(zhì)免疫印跡、酶聯(lián)免疫吸附法、流式細胞儀等對外泌體進行表征。通過電鏡可獲得外泌體的形態(tài)信息，不同類型的顯微鏡由于操作環(huán)境不同，得到的外泌體形態(tài)存在差異。例如，在掃描電鏡、透射電鏡和原子力顯微鏡中，外泌體呈現(xiàn)囊泡獨有的茶托形，可能由于樣品在固定或染色過程中極度脫水，導致外泌體塌陷所致。與之相反，在冷凍電鏡中外泌體呈現(xiàn)圓形，由于不會脫水變性，所得的外泌體形態(tài)可能更加接近囊泡的真實狀態(tài)。另外，由于透射電鏡和原子力顯微鏡具有較高分辨率，也能夠提供外泌體磷脂雙分子層厚度、粒徑分布等信息。外泌體介導的細胞間交流可以改變瘤的生長、細胞遷移、抗病毒等生理過程。外泌體提取文獻

從外泌體中篩選的生物標志物，可用于疾病的診斷、預后及治理。exosome diagnostics

隨著科學研究的不斷深入，目前已經(jīng)發(fā)現(xiàn)外泌體是由通過細胞內(nèi)吞泡膜向內(nèi)凹陷形成多泡內(nèi)涵體，多泡內(nèi)涵體再與細胞膜融合后，釋放到細胞外基質(zhì)中的一種直徑約30~120nm的膜性囊泡。外泌體介導瘤細胞的化療抵抗。在瘤的治理過程中經(jīng)常會出現(xiàn)藥物耐受的情況，這會導致化療失敗，在這和過程中外泌體以多種途徑參與了化療抵抗這一過程。通常，發(fā)生EMT過程的瘤細胞可獲得抵抗凋亡能力，而抵抗凋亡通常使瘤表現(xiàn)為化療抵抗。瘤細胞來源的外泌體能通過傳遞相關(guān)的組織因子(如VEGF、TGF2β)介導細胞發(fā)生EMT，從而增加瘤細胞的化療抵抗能力。exosome diagnostics