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來源: 發(fā)布時間:2023-12-16

有研究表明外泌體通過喚醒瘤相關(guān)信號通路、誘導(dǎo)免疫耐受、重塑細(xì)胞外基質(zhì)、增強瘤細(xì)胞侵襲性和調(diào)控瘤微環(huán)境促進瘤的發(fā)生和發(fā)展,外泌體在瘤的診斷上有諸多優(yōu)勢:外泌體可保護其中的核酸類物質(zhì),防止其迅速降解;外泌體的形成與親源細(xì)胞的狀態(tài)密切相關(guān);針對外泌體內(nèi)容物的檢測比傳統(tǒng)的瘤標(biāo)志物更具有特異性;外泌體寬泛存在于多種體液樣本中,以其為基礎(chǔ)的瘤診斷可在病情發(fā)展過程中及時監(jiān)測分子標(biāo)志物的變化,這種檢測更易監(jiān)控且樣本更易收集。干細(xì)胞外泌體通過改變細(xì)胞外基質(zhì),改變受體細(xì)胞的轉(zhuǎn)錄組和蛋白質(zhì)組,調(diào)節(jié)細(xì)胞凋亡,生長,增殖和分化途徑。羊水提取試劑盒生產(chǎn)廠家

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外泌體在心臟修復(fù)中起著關(guān)鍵作用。外泌體通過內(nèi)含的miRNA直接調(diào)控基因表達(dá),將信息傳遞給靶細(xì)胞。盡管干細(xì)胞移植治理是一種很有前景的修復(fù)損傷心臟組織并使其再生的輔助手段,但由于缺血心臟中移植細(xì)胞的存活狀況不佳,一般只能觀察到心臟功能的輕度改善。近期的研究表明,干細(xì)胞釋放的外泌體可以作為心臟修復(fù)潛在的無細(xì)胞治理劑。干細(xì)胞分泌的外泌體相比干細(xì)胞有如下優(yōu)點:(1)旁分泌效應(yīng),外泌體作為干細(xì)胞旁分泌作用的一種媒介;(2)組合起效,外泌體可與現(xiàn)有的組合物或方法進行組合;(3)個性化,外泌體可改造特定活性成分;(4)靶向特異性,外泌體被工程化改造后,具有靶向特定細(xì)胞類型或組織的功能;(5)安全性高,外泌體治理屬于無細(xì)胞療法。體液外泌體提取試劑盒服務(wù)外泌體具有良好的生物兼容性、穩(wěn)定性和內(nèi)在靶向性,使其在藥物遞送方向大有潛力。

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外泌體(Exosome)介導(dǎo)瘤血管的形成和轉(zhuǎn)移。外泌體(Exosome)能將自身的細(xì)胞因子IL-8和VEGF釋放到細(xì)胞外,作用于內(nèi)皮細(xì)胞膜表面受體,導(dǎo)致瘤血管快速形成并較終通過發(fā)生EMT過程促進瘤的遷移。瘤細(xì)胞來源的外泌體(Exosome)中含有血管生長素、血管內(nèi)皮生長因子等,這些細(xì)胞因子以不同的作用方式促進瘤血管的形成,如VEGF通過喚醒磷酸酯酶C和第二信使的形成,誘導(dǎo)纖維蛋白溶解酶原活化物的表達(dá),使得基底膜降解,從而促進瘤細(xì)胞的遷移。

密度梯度離心是基于差速超高速離心的改良技術(shù)。該方法需預(yù)先利用常用的梯度液介質(zhì)如蔗糖、碘克沙醇和氯化銫等,在離心管中構(gòu)筑從底部到頂部密度逐漸降低的密度梯度帶。根據(jù)密度梯度構(gòu)建和沉降方式的不同,又可以分為速率區(qū)帶離心法和等密度梯度離心法,前者主要根據(jù)顆粒的沉降速率分離,介質(zhì)密度均小于外泌體密度,離心時樣品在向超速離心管底部移動時,會通過密度不斷增加的密度梯度區(qū)帶,密度大的顆粒更容易穿過密度更高的梯度層,更快地到達(dá)管底,因此控制離心的時間很重要;等密度梯度離心法中的密度梯度區(qū)帶,則會根據(jù)樣品液中各種溶質(zhì)成分來進行組合,離心過程中,無論離心時間多久,不同密度顆粒jin會富集到具有相同密度的梯度區(qū)帶,而不會沉淀到底部。外泌體由于包含的內(nèi)容物具有明顯的組織特異性,為其能成為瘤早期診斷的生物標(biāo)志物提供了重要保障。

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尺寸排除色譜法是使用聚合物凝膠或類似的固定相柱進行外泌體分離的技術(shù),樣品以重力滴落的方式收集。流體力學(xué)半徑較小的樣品組分進入凝膠孔隙后,需耗費相對較長的時間通過凝膠柱,導(dǎo)致延遲洗脫,實現(xiàn)不同粒徑大小顆粒分離。尺寸排除色譜法可以與差速離心法結(jié)合而不會明顯損失外泌體,保證產(chǎn)量的同時可有效去除雜質(zhì)蛋白,更適合目標(biāo)蛋白質(zhì)組學(xué)和miRNA的分析。靜水過濾透析法主要利用靜水壓力迫使樣品中不同特定大小分子先后通過透析管,其中溶劑和小溶質(zhì)很容易通過透析管,而較大的顆粒,如外泌體和其他囊泡,仍留在透析管中而被收集。與正常細(xì)胞來源外泌體在結(jié)構(gòu)分子上的差異倍受矚目。腦脊液提取試劑盒原理

確認(rèn)外泌體生理作用的單獨方法就是明確外泌體的釋放機制,通過促進或壓制釋放機制。羊水提取試劑盒生產(chǎn)廠家

外泌體(exosomes)是一類由細(xì)胞分泌到胞外的囊泡。與其他兩種胞外囊泡(微囊泡和凋亡小體)相比,外泌體在產(chǎn)生方式、尺寸、密度和內(nèi)容物等方面存在明顯差異。不同于微囊泡“出芽”的形成方式,外泌體主要通過胞吐過程釋放至細(xì)胞外:首先細(xì)胞膜向內(nèi)凹陷形成早期核內(nèi)體(earlyendosomes),早期核內(nèi)體進一步內(nèi)陷形成多泡體(multivesicularbodies,MVBs),其中一部分多泡體與溶酶體(lysosome)融合,進而降解;另一部分與細(xì)胞膜融合,將其內(nèi)部所包含的囊泡釋放至胞外,即為外泌體。外泌體具有獨特的物理化學(xué)性質(zhì),其直徑為30~200nm,密度為1.13~1.19g/mL,組成包括細(xì)胞來源相關(guān)的脂質(zhì)、蛋白質(zhì)、RNA、DNA等物質(zhì),在其表面連接有大量的糖鏈,如甘露糖、聚乳糖胺和α2,6-唾液酸等。羊水提取試劑盒生產(chǎn)廠家

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