在過去十年中，細胞外囊泡已經(jīng)成為細胞間通訊的重要介質(zhì)，參與原核生物和高等真核生物細胞之間的生物信號傳遞，以調(diào)節(jié)不同范圍的生物過程。此外，細胞外囊泡的病理生理作用開始在包括癥狀、傳播性疾病和神經(jīng)變性疾病在內(nèi)的疾病中得到認識，突出了醫(yī)治干預(yù)的潛在新靶點。此外，未修飾和工程化的細胞外囊泡可能在大分子藥物遞送中具有應(yīng)用。該綜述回顧近在理解細胞外膜泡生物學和細胞外囊泡在疾病中的作用方面的進展，討論新出現(xiàn)的醫(yī)治機會并考慮相關(guān)的挑戰(zhàn)。干細胞外泌體通過改變細胞外基質(zhì)，改變受體細胞的轉(zhuǎn)錄組和蛋白質(zhì)組，調(diào)節(jié)細胞凋亡，生長，增殖和分化途徑。干細胞外泌體提取

由于這些胞外囊泡（EV）與生理和病理狀況之間的關(guān)系，人們對EV的興趣呈指數(shù)增長。EVs對新型診斷和臨床轉(zhuǎn)化有很大希望。近的研究已經(jīng)將這些交流所需的一些任務(wù)歸結(jié)為細胞外囊泡（如外泌體和微泡），主要參與髓鞘膠質(zhì)細胞和神經(jīng)元之間的相互信號傳遞從而促進神經(jīng)元存活、由小膠質(zhì)細胞介導(dǎo)的免疫應(yīng)答、突觸組裝和可塑性。這種囊泡也被認為是神經(jīng)變性疾病和腦病擴散的重要因素。這些細胞外囊泡功能為以前無法識別的神經(jīng)系統(tǒng)內(nèi)跨細胞相互作用增加了新方式。黑龍江外泌體Dir外泌體作為膜和細胞溶質(zhì)蛋白、脂質(zhì)和RNA細胞之間傳遞的載體。

密度梯度離心是基于差速超高速離心的改良技術(shù)。該方法需預(yù)先利用常用的梯度液介質(zhì)如蔗糖、碘克沙醇和氯化銫等，在離心管中構(gòu)筑從底部到頂部密度逐漸降低的密度梯度帶。根據(jù)密度梯度構(gòu)建和沉降方式的不同,又可以分為速率區(qū)帶離心法和等密度梯度離心法,前者主要根據(jù)顆粒的沉降速率分離,介質(zhì)密度均小于外泌體密度,離心時樣品在向超速離心管底部移動時,會通過密度不斷增加的密度梯度區(qū)帶,密度大的顆粒更容易穿過密度更高的梯度層,更快地到達管底,因此控制離心的時間很重要;等密度梯度離心法中的密度梯度區(qū)帶,則會根據(jù)樣品液中各種溶質(zhì)成分來進行組合,離心過程中,無論離心時間多久,不同密度顆粒jin會富集到具有相同密度的梯度區(qū)帶,而不會沉淀到底部。

在Rameshwar等的研究中，采用轉(zhuǎn)染間充質(zhì)干細胞的方法，使外泌體載有anti-miR-9。在進行間充質(zhì)細胞和多形性成角質(zhì)細胞瘤(GBM)細胞間anti-miR-9傳遞的實驗時，發(fā)現(xiàn)兩種細胞不僅可以通過縫隙連接介導(dǎo)的細胞間通訊(GJIC)也可以通過外泌體傳遞anti-miR-9。且anti-miR-9降低兩種GBM細胞(U87和T98G)對中流藥物替莫唑胺(TMZ)的抵抗能力的功能主要由外泌體傳遞的anti-miR-9實現(xiàn)，而非經(jīng)GJIC傳遞的anti-miR-9，顯示出外泌體在運載miRNA進行基因zhiliao時的潛力。利用外泌體進行GBM的zhiliao不只停留在體外細胞實驗上，也已經(jīng)有相關(guān)的體內(nèi)zhiliao報道。與正常細胞來源外泌體在結(jié)構(gòu)分子上的差異倍受矚目。

流式細胞技術(shù)針對外泌體的表面抗原標記物進行檢測，能夠?qū)崿F(xiàn)外泌體的高通量、多通道分析。但是由于外泌體的粒徑小、折射率低，所以采用常規(guī)的流式細胞儀進行檢測時往往需要將外泌體與beads連接以增大表面積、增強反射，操作耗時又費力。Tian等搭建了一種高靈敏度的流式細胞儀(HSFCM)，將可檢測的外泌體粒徑降至40nm，能夠在不連接beads的情況下實現(xiàn)每分鐘10000個外泌體的檢測，并且能夠結(jié)合免疫熒光的方法進行外泌體標志蛋白質(zhì)的定量檢測，目前該儀器已商品化。神經(jīng)細胞來源的外泌體含有與神經(jīng)退行性疾病相關(guān)的分子。外泌體原料

外泌體作為腦內(nèi)種瘤和神經(jīng)退行性疾病的新型標記物。干細胞外泌體提取

外泌體作為藥物遞送載體較以往的合成系統(tǒng)具有多方面的優(yōu)勢，比如：人工遞送載體具有更低的免疫原性，其含有的磷脂雙分子層可與靶細胞細胞膜融合，從而避廉價核巨噬細胞系統(tǒng)的吞噬作用。Srivastava等開發(fā)了一種基于外泌體-金奈米粒子（Exo-GNP）的藥物遞送系統(tǒng)—“nanosomes”用于肺病的醫(yī)治，研究表明該系統(tǒng)與單用多柔比星醫(yī)治相比，前者的多柔比星釋放量增加、攝取率提高、化療毒性降低且化療效果增強。此外，還有研究發(fā)現(xiàn)，使用外泌體運載紫杉醇（PTX）可顯著提高病細胞對PTX的吸收，將PTX加載至外泌體中顯著增加了藥物細胞毒性，Exo-PTX能顯著壓制肺病的發(fā)展。干細胞外泌體提取