微流控芯片是一種可兼容多種外泌體分離方法的新興檢測平臺(tái),這些方法包括免疫親和分離、膜過濾、納米線捕獲、聲納米過濾和確定性側(cè)向位移分選等。微流控裝置是由幾十到幾百微米的不同直徑微通道網(wǎng)絡(luò)組成的緊湊單元,能夠處理皮升到微升范圍內(nèi)的黏性介質(zhì)樣品;且根據(jù)特定的功能,微通道可以相互連接,使用額外的特定裝置來微調(diào)流體運(yùn)動(dòng)。微流控技術(shù)能夠以極高的準(zhǔn)確性和特異性在微尺度上重現(xiàn)眾多實(shí)驗(yàn)室過程,取代昂貴的設(shè)備,基于微流控技術(shù)的電化學(xué)外泌體檢測芯片已經(jīng)受到廣fan關(guān)注。臨床前研究的證據(jù)表明干細(xì)胞釋放的外泌體可作為心肌修復(fù)的潛在無細(xì)胞治理劑。研究所提取試劑盒廠家

事實(shí)上，動(dòng)物實(shí)驗(yàn)表明：在小鼠急性心肌梗塞術(shù)后，注射來源于間充質(zhì)干細(xì)胞、心臟祖細(xì)胞、胚胎干細(xì)胞或心肌源性細(xì)胞的外泌體均可改善心臟功能，減輕心臟纖維化，刺激血管生成。例如，心源性細(xì)胞外泌體能通過特異性的巨噬細(xì)胞極化為急性心肌梗死提供心臟保護(hù)作用。心臟再灌注后，CDCexo的輸注降低了大鼠和豬心肌梗死模型的梗死面積，而且CDCexo會(huì)減少梗死組織內(nèi)CD68+巨噬細(xì)胞數(shù)量，并改變巨噬細(xì)胞的極化狀態(tài)。自體CD34+干細(xì)胞的移植可以改善缺血組織再灌注后的功能，并降低嚴(yán)重肢體缺血患者的截肢率。其作用機(jī)制在于：CD34+干細(xì)胞分泌的外泌體促進(jìn)小鼠下肢缺血模型血管生成。雖然臨床前研究的證據(jù)表明干細(xì)胞釋放的外泌體可以作為心肌修復(fù)的潛在無細(xì)胞治理劑，但是，目前將外泌體完全用作心臟修復(fù)治理劑之前還是有很多重點(diǎn)問題需要解決。細(xì)胞上清提取試劑盒外泌體不只可作為疾病診斷的生物標(biāo)志，而且可作為天然的藥物傳遞載體。

外泌體的miRNA或蛋白質(zhì)等遺傳分子與肝臟病理息息相關(guān)，在肝臟疾病診斷中可作為潛在的治理靶點(diǎn)或分子標(biāo)志物。對外泌體的研究，將有利于闡述肝臟及其疾病的發(fā)生和發(fā)展機(jī)制，為尋求臨床可用的biomarkers和開發(fā)新的治理方法提供支持。外泌體可以通過轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白和miRNAs進(jìn)行細(xì)胞間交流，從而作用于周圍的細(xì)胞并改變肝臟的微環(huán)境。細(xì)胞內(nèi)多泡體（MVBs）與細(xì)胞膜融合，釋放內(nèi)部的外泌體到細(xì)胞外，被其他細(xì)胞攝取，通過細(xì)胞膜融合或內(nèi)吞作用釋放攜帶的內(nèi)含物，在受體細(xì)胞中調(diào)控生理活動(dòng)。外泌體介導(dǎo)的細(xì)胞間交流可以改變瘤的生長、細(xì)胞遷移、抗病毒等生理過程。

瘤釋放的外泌體可以通過削弱免疫效應(yīng)細(xì)胞的反應(yīng)和激發(fā)免疫抑制細(xì)胞的擴(kuò)增，來營造一個(gè)免疫抑制的環(huán)境。瘤釋放的外泌體可以替代瘤細(xì)胞接受免疫系統(tǒng)的攻擊，從而幫助瘤細(xì)胞逃過免疫系統(tǒng)的識(shí)別。瘤釋放的外泌體可以引發(fā)炎癥，利用基質(zhì)浸潤細(xì)胞的反應(yīng)營造出利于瘤生長的微環(huán)境。研究表明，在過去短短的5年里，對外泌體的研究已經(jīng)取得了比較好的的進(jìn)展。如今，收集并分析瘤釋放的外泌體已經(jīng)成為液體活檢的一個(gè)重要研發(fā)方向。靶向瘤釋放外泌體的治理策略將對改善病癥患者的命運(yùn)發(fā)揮出舉足輕重的影響。超速離心是從生物體液或細(xì)胞上清分離外泌體的金標(biāo)準(zhǔn)方法。

獲得囊泡粒徑分布的兩種方法動(dòng)態(tài)光散射(DLS)和納米顆粒跟蹤分析(NTA)都被廣fan應(yīng)用于外泌體顆粒數(shù)目和粒徑分布的測量，但兩種方法也各有不足。動(dòng)態(tài)光散射法中散射光強(qiáng)度依賴于顆粒質(zhì)量(體積)，混合體系中大囊泡的存在(即使只有很少的量)將嚴(yán)重影響測量結(jié)果，因此動(dòng)態(tài)光散射法更適用于單分散體系。而且動(dòng)態(tài)光散射法所得的結(jié)果強(qiáng)烈依賴于所應(yīng)用的數(shù)學(xué)算法。而采用納米顆粒跟蹤分析儀對不同粒徑范圍的囊泡進(jìn)行檢測時(shí)，為了得到準(zhǔn)確的濃度和粒徑信息，需要根據(jù)所要測量的顆粒粒徑范圍對儀器分別校準(zhǔn)，操作繁瑣。受檢測靈敏度所限，納米顆粒跟蹤分析儀適用于粒徑范圍50nm～1μm的顆粒，粒徑小于50nm的外泌體無法檢測。除此之外，兩種方法都依賴光散射和粒子的布朗運(yùn)動(dòng)進(jìn)行分析，難以區(qū)分合成的納米材料、大蛋白質(zhì)聚合體和生物囊泡?？贵w親和法和密度梯度離心法，雖然可以提取到高純度的外泌體，但不能提取完整外泌體。北京外泌體NTA

外泌體并作為癥狀早期診斷技術(shù)，應(yīng)用于與癥狀進(jìn)展相關(guān)的研究。研究所提取試劑盒廠家

泌體是細(xì)胞內(nèi)源性的小囊泡，由大多數(shù)細(xì)胞分泌。在抗原呈遞細(xì)胞中的外泌體發(fā)揮作用的報(bào)道后，人們對外泌體的興趣增強(qiáng)，并且觀察到它們可以在體內(nèi)刺激免疫應(yīng)答。在過去幾年中，有幾個(gè)實(shí)驗(yàn)室報(bào)道了各種細(xì)胞類型的外泌體分泌，并討論了其潛在的生物學(xué)功能。該綜述描述了將外泌體定義為特定的分泌囊泡群體的物理性質(zhì)，總結(jié)了其生物學(xué)效應(yīng)，特別是免疫系統(tǒng)，討論了分泌囊泡可能作為細(xì)胞間信使的潛在作用。細(xì)胞分泌到細(xì)胞外環(huán)境中分別稱為外泌體和微泡的細(xì)胞外膜泡是內(nèi)源性和質(zhì)膜起源的不同類型的膜囊泡。這些細(xì)胞外囊泡（EVs）表示了細(xì)胞間通訊的一個(gè)重要模式，作為膜和細(xì)胞溶質(zhì)蛋白、脂質(zhì)和RNA細(xì)胞之間傳遞的載體。然而，我們對于EV形成的分子機(jī)制知識(shí)的缺乏以及缺乏干擾貨物包裝或囊泡釋放的方法仍然妨礙了其在體內(nèi)生理相關(guān)性的探索。這篇綜述專注于EV的特性和目前提出的形成、定位和功能的機(jī)制。研究所提取試劑盒廠家