已經有許多關于外泌體作用的報導,根據這些現象實驗中,從體液和培養(yǎng)上清中高純度提取的高純度外泌體,在活內是否真的能發(fā)生作用尚未能確定。確認外泌體生理作用的單獨方法就是明確外泌體的釋放機制,通過促進或壓制釋放機制,分析會引起何種生理作用,這是進一步研究的發(fā)展方向。甚至活內的外泌體動態(tài)(哪個外泌體遷移至何處)也會成為今后需要努力研究的重要課題。實際上,用PS親和法提取的人白血病細胞釋放的外泌體,其純度與超離心法和PEG沉淀法提取外泌體做比較,PS親和法提取的外泌體,其蛋白特異性檢測可高出10~100倍以上,幾乎沒有混入外泌體以外的蛋白,回收量高,操作重復性好。外泌體膜蛋白可以與靶細胞膜蛋白結合,進而喚醒靶細胞細胞內的信號通路。北京外泌體示蹤
外泌體(exosome)是一種由活細胞分泌的,直徑約為40~160nm的具有雙層膜結構的生物活性囊泡。它攜帶了分泌細胞包含的生物活性物質,如DNA、miRNAs、mRNA、長鏈非編碼RNA(LncRNA)、酶、蛋白質和細胞代謝物等。外泌體在細胞間通信中扮演著十分重要的角色。目前對于外泌體的研究涉及包括瘤的發(fā)生和發(fā)展、侵襲轉移機制、瘤診斷標志物以及藥物傳遞系統(tǒng)等諸多方面。外泌體是一個高度異質性的群體,具有獨特的誘導復雜生物學反應的能力。外泌體的異質性可以根據其大小、含量(載物)、對受體細胞的功能影響以及細胞來源來區(qū)分。這些特征的不同組合導致了外泌體的復雜異質性。血漿血清提取試劑盒原理外泌體能負載的治理物質包括小分子化合物、蛋白質、寡核苷酸等,且在體液中寬泛分布且具有定向歸巢能力。
外泌體富含蛋白質、脂質和核酸分子,這些分子具有來源細胞的特異性,所以通過分析中流細胞所釋放的外泌體分子特征就可部分反映其來源細胞表型及其生物學作用。現已發(fā)現多種中流外泌體來源的蛋白類分子標志物。例如,乳腺ai、結腸ai和胰腺ai中均可檢測到磷脂酰肌醇蛋白聚糖1(glypican1,GPC1)的表達,且與乳腺ai和結腸ai相比,GPC1對胰腺ai的早期診斷尤具價值。前列腺ai患者血漿外泌體中凋亡抑制蛋白的表達增高則提示與中流進展相關。隨著蛋白組學技術的發(fā)展,研究發(fā)現中流患者血液外泌體來源的蛋白標志物其診斷特異性和敏感性分別可達到95%和90%。
外泌體由于包含的內容物具有明顯的組織特異性,為其能成為瘤早期診斷的生物標志物提供了重要保障。但目前對于外泌體miRNA、LnkRNA等的檢測方法還不成熟,限制了外泌體用于疾病診斷中的應用?;谕饷隗w的診斷產品獲得FDA批準上市,很大程度的增加了研發(fā)企業(yè)的信心。外泌體的異質性又決定了外泌體藥物遞送系統(tǒng)不能提供一個普適的遞藥策略,必須根據所傳遞治理物質的類型、目標組織的特點等進行針對性的進行策略調整。良好的生物兼容性、穩(wěn)定性和內在靶向性等使外泌體在藥物遞送方向大有潛力。外泌體本身的惰性相當高,但它們與細胞膜融合可將所攜帶的物質和信號傳遞到受體細胞并改變其生物學功能。
外泌體作為細胞外囊泡的一個亞群,直徑集中于30~150nm。目前,基于粒徑大小分離外泌體的方法有超濾法、尺寸排除色譜法、靜水過濾透析法和非對稱場流分離法等。超濾法利用不同孔徑的濾膜,對樣品進行選擇性分離以獲得外泌體,一般分為壓力超濾和離心超濾。其中離心超濾效果更好,不jin能減輕力對外泌體的破壞,而且可通過增大離心力和延長離心時間提高外泌體產物濃度。但離心力過大或離心時間過長均有可能導致超濾膜或外泌體破裂。此外,超濾法可以和切向流過濾法、微控流法、超速離心法或凝膠過濾色譜法等方法結合進一步提高分離效率。外泌體在組織修復領域均起著重要的作用,并且可以作為很好靶向給藥系統(tǒng)。血細胞提取試劑盒價格
隨著今后的研究發(fā)展,外泌體功能逐步清晰,并擴大臨床應用。北京外泌體示蹤
瘤轉移是病癥致死的首要原因。長久以來,對瘤轉移機理的研究一直聚焦于瘤與機體之間的相互作用。然而在近年來,由于外泌體被發(fā)現可以作為包括瘤在內細胞之間信息傳遞的一種新方式,瘤轉移研究領域再度變得火熱起來。我所(瘤轉移的預警和預防研究所)以謝曉東博士為首的外泌體研究小組一直致力于研究瘤轉移與外泌體之間的聯系,已取得一系列成果。外泌體是指包含了復雜RNA和蛋白質的小膜泡(30-150nm),現今,其特指直徑在40-100nm的盤狀囊泡。多種細胞在正常及病理狀態(tài)下均可分泌外泌體。其主要來源于細胞內內溶酶體微粒內陷形成的多囊泡體,經多囊泡體外膜與細胞膜融合后釋放到胞外基質中。北京外泌體示蹤