Exosome（外泌體）是由活細(xì)胞分泌小囊泡，具有典型的脂質(zhì)雙分子層結(jié)構(gòu)；參與細(xì)胞之間的交流，物質(zhì)的運(yùn)輸以及正常生理過(guò)程的維持，此外還與疾病的產(chǎn)生有關(guān)。對(duì)分離的外泌體進(jìn)行體外標(biāo)記或示蹤，有助于對(duì)外泌體的功能進(jìn)行進(jìn)一步的研究。目前對(duì)于外泌體的標(biāo)記方法有很多種，包括親脂性的染料和膜滲透型的化合物等。PKH67的體內(nèi)熒光半衰期為10-12天。相比于PKH-67，PKH-26具有更長(zhǎng)的半衰期，標(biāo)記在兔紅細(xì)胞上的PKH26半衰期長(zhǎng)達(dá)100天以上。特別適用于體外增殖研究以及長(zhǎng)期的體內(nèi)細(xì)胞跟蹤研究。外泌體的異質(zhì)性可以根據(jù)其大小、含量(載物)、對(duì)受體細(xì)胞的功能影響以及細(xì)胞來(lái)源來(lái)區(qū)分。尿液外泌體提取試劑盒服務(wù)

流式細(xì)胞技術(shù)針對(duì)外泌體的表面抗原標(biāo)記物進(jìn)行檢測(cè)，能夠?qū)崿F(xiàn)外泌體的高通量、多通道分析。但是由于外泌體的粒徑小、折射率低，所以采用常規(guī)的流式細(xì)胞儀進(jìn)行檢測(cè)時(shí)往往需要將外泌體與beads連接以增大表面積、增強(qiáng)反射，操作耗時(shí)又費(fèi)力。Tian等搭建了一種高靈敏度的流式細(xì)胞儀(HSFCM)，將可檢測(cè)的外泌體粒徑降至40nm，能夠在不連接beads的情況下實(shí)現(xiàn)每分鐘10000個(gè)外泌體的檢測(cè)，并且能夠結(jié)合免疫熒光的方法進(jìn)行外泌體標(biāo)志蛋白質(zhì)的定量檢測(cè)，目前該儀器已商品化。安徽外泌體融合實(shí)驗(yàn)外泌體的檢測(cè)和提取還遇到一個(gè)困難即：對(duì)各種外泌體的分類(lèi)。

外泌體不只可作為疾病診斷的生物標(biāo)志，而且可作為天然的藥物傳遞載體。外泌體能夠負(fù)載的治理物質(zhì)包括小分子化合物、蛋白質(zhì)、寡核苷酸等，且在體液中寬泛分布且具有定向歸巢能力。外泌體獨(dú)特的生物兼容性、高穩(wěn)定性、瘤靶向性使其在未來(lái)瘤治理中有很大的利用價(jià)值。外泌體能夠裝載的治理物質(zhì)包括小分子化合物、蛋白質(zhì)、寡核苷酸等。作為小分子化合物載體，外泌體裝載姜黃素、紫杉醇、阿霉素等主要是用于抗瘤研究；已經(jīng)發(fā)現(xiàn)外泌體可遞送多種蛋白質(zhì)，例如酶，細(xì)胞骨架蛋白質(zhì)和跨膜蛋白質(zhì)；外泌體作為核酸分子的藥物載體主要用于基因治理，外泌體天然的可以攜帶遺傳（例如miRNA，siRNA）到靶細(xì)胞中，從而在生物學(xué)和致病過(guò)程中誘導(dǎo)遺傳修飾。

Buller等利用miR-146b的質(zhì)粒轉(zhuǎn)染間充質(zhì)干細(xì)胞，使其分泌的外泌體負(fù)載miR-146b，并將外泌體注射至移植到小鼠體內(nèi)的GBM處。結(jié)果表明，這種利用外泌體運(yùn)輸miRNA進(jìn)行zhiliao的方法可以有效抑制中流的生長(zhǎng)。對(duì)于GBM類(lèi)腦部中流，體內(nèi)zhiliao不同于體外細(xì)胞實(shí)驗(yàn)，更需考慮腦部組織微環(huán)境對(duì)藥物的影響，外泌體可運(yùn)輸miRNA并不破壞其在腦部中流組織處的原本功效。然而，至今還沒(méi)有利用外泌體載藥經(jīng)靜脈注射zhiliaoGBM的報(bào)道，這主要是由于跨越血腦屏障(BBB)仍然是外泌體進(jìn)行腦部中流zhiliao需要解決的難題。盡管如此，Wood等報(bào)道的在進(jìn)行阿茲茨海默病zhiliao時(shí)利用對(duì)腦部神經(jīng)元特異性肽RVG靶向的外泌體穿過(guò)BBB的研究顯示了經(jīng)靶向修飾的外泌體具備穿過(guò)BBB的潛力，因此外泌體載藥zhiliao具有廣闊的前景。確認(rèn)外泌體生理作用的單獨(dú)方法就是明確外泌體的釋放機(jī)制，通過(guò)促進(jìn)或壓制釋放機(jī)制。

外泌體基礎(chǔ)醫(yī)學(xué)和臨床應(yīng)用的探索和深入研究對(duì)如何準(zhǔn)確及高純度提取外泌體,并完整保存提出了更高的技術(shù)要求。外泌體可通過(guò)差速超速離心在不同離心力下沉淀樣品中不同的雜質(zhì)組分,并在100000×g~200000×g的轉(zhuǎn)速下獲取較純的外泌體。差速超速離心技術(shù)被認(rèn)為是外泌體分離的“金標(biāo)準(zhǔn)”,也是目前常用的外泌體分離和濃縮方法。該方法可通過(guò)結(jié)合0.22μm或0.45μm孔徑濾膜進(jìn)行超濾來(lái)提高產(chǎn)物純度減少外泌體的聚集,其分離效率容易受到加速度、轉(zhuǎn)子類(lèi)型、旋轉(zhuǎn)半徑、沉降路徑長(zhǎng)度以及樣品黏度等多種因素影響。有望在外泌體和微囊泡生理功能的分析研究上起重大貢獻(xiàn)。外泌體示蹤實(shí)驗(yàn)

外泌體介導(dǎo)的細(xì)胞間交流可以改變瘤的生長(zhǎng)、細(xì)胞遷移、抗病毒等生理過(guò)程。尿液外泌體提取試劑盒服務(wù)

外泌體（Exosome）介導(dǎo)瘤血管的形成和轉(zhuǎn)移。外泌體（Exosome）能將自身的細(xì)胞因子IL-8和VEGF釋放到細(xì)胞外，作用于內(nèi)皮細(xì)胞膜表面受體，導(dǎo)致瘤血管快速形成并較終通過(guò)發(fā)生EMT過(guò)程促進(jìn)瘤的遷移。瘤細(xì)胞來(lái)源的外泌體（Exosome）中含有血管生長(zhǎng)素、血管內(nèi)皮生長(zhǎng)因子等，這些細(xì)胞因子以不同的作用方式促進(jìn)瘤血管的形成，如VEGF通過(guò)喚醒磷酸酯酶C和第二信使的形成，誘導(dǎo)纖維蛋白溶解酶原活化物的表達(dá)，使得基底膜降解，從而促進(jìn)瘤細(xì)胞的遷移。尿液外泌體提取試劑盒服務(wù)