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來源: 發(fā)布時間:2023-09-16

目前,在各種健康與疾病模型中都發(fā)現(xiàn),外泌體通過分子信息傳遞扮演著重要的角色。外泌體還越來越多地被認(rèn)為是疾病的生物標(biāo)志物和預(yù)后因子,具有重要的臨床診斷和治理意義。除此之外,它們還有潛力被用于臨床,作為基因和藥物遞送的載體。健康人和多種疾病的患者會將含有不同RNA和蛋白質(zhì)成分的外泌體釋放到體液循環(huán)中,因其特殊性,外泌體可以作為生物標(biāo)志物來對疾病進(jìn)行檢測。例如,從血液或尿液中分離的外泌體可以用作病癥、心臟病的診斷和預(yù)后的指標(biāo)。干細(xì)胞外泌體可用于中風(fēng)的治理,改善神經(jīng)預(yù)后,增加血管與神經(jīng)生成。血清提取試劑盒價錢

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外泌體(Exosome)開始被認(rèn)為是毫無作用的“垃圾”,但隨著研究的不斷深入,人們發(fā)現(xiàn)事實(shí)并非如此,外泌體(Exosome)是具有功能活性并可進(jìn)行細(xì)胞間信息傳遞的微囊泡。外泌體(Exosome)介導(dǎo)瘤細(xì)胞的免疫耐受。瘤細(xì)胞來源的外泌體(Exosome)本身可作為瘤抗原,因此,瘤來源的外泌體(Exosome)既是一種抗原呈遞系統(tǒng),同時也是瘤排斥抗原的來源。瘤來源的外泌體(Exosome)能夠通過傳遞某些抑制信號,在機(jī)體免疫應(yīng)答過程中起負(fù)性調(diào)節(jié)作用,誘導(dǎo)瘤細(xì)胞形成免疫耐受,從而逃避免疫細(xì)胞的殺傷。江西外泌體iTRAQ泌體是細(xì)胞內(nèi)源性的小囊泡,由大多數(shù)細(xì)胞分泌。

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當(dāng)外泌體在第1次被發(fā)現(xiàn)的時候,外泌體被認(rèn)為是細(xì)胞排泄廢物的一種方式,如今隨著大量對其生物來源、其物質(zhì)構(gòu)成及運(yùn)輸、細(xì)胞間信號的傳導(dǎo)以及在體液中的分布的研究發(fā)現(xiàn)外泌體具有多種多樣的功能。外泌體的功能取決于其所來源的細(xì)胞類型,其可參與到機(jī)體免疫應(yīng)答、抗原提呈、細(xì)胞遷移、細(xì)胞分化、瘤侵襲等方方面面。有研究表明瘤來源的外泌體參與到瘤細(xì)胞與基底細(xì)胞的遺傳信息的交換,從而導(dǎo)致大量新生血管的生成,促進(jìn)了瘤的生長與侵襲。

膜封閉的囊泡釋放到周圍環(huán)境中已經(jīng)成為近幾年來越來越受關(guān)注的問題。令人信服的證據(jù)表明囊泡可交換復(fù)雜的信息有助于這種興趣的興起。但是,也已經(jīng)清楚,不同類型的分泌囊泡共存,具有不同的細(xì)胞內(nèi)起源和形成模式,因此可能具有不同的組成和功能。外泌體是分泌囊泡的一種亞型。它們在真核細(xì)胞內(nèi)的多泡小體中形成,并且當(dāng)這些多泡小體與質(zhì)膜融合時分泌到細(xì)胞外。有趣的是,不同的分子家族已被證明參與細(xì)胞內(nèi)形成外泌體及其隨后的分泌,這表明即使在外泌體中也存在不同的亞型。外泌體具有檢測包括病癥在內(nèi)的許多病理狀況的潛力,可用于對心血管疾病和病癥等多種疾病的診斷和監(jiān)測。

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幾乎所有的細(xì)胞都可以在自發(fā)或在一定刺激條件下產(chǎn)生外泌體,不同的細(xì)胞產(chǎn)生的外泌體具有不同的功能,這些外泌體參與了一系列生理和病理過程,如ai癥發(fā)生與發(fā)展、抗原呈遞、免疫調(diào)節(jié)、組織愈合等。來自血細(xì)胞(包括血小板、白細(xì)胞和紅細(xì)胞)的外泌體具有參與凝血、提供促血管生成因子、誘導(dǎo)血管生成等生理功能;妊娠期外泌體能夠影響局部血管生成、調(diào)節(jié)分化、激huo免疫、促進(jìn)胚胎發(fā)育;肝臟細(xì)胞產(chǎn)生的外泌體有利于維護(hù)肝臟內(nèi)穩(wěn)態(tài)。由此可見,正常細(xì)胞產(chǎn)生的外泌體對維持機(jī)體的正常生命活動起重要作用。外泌體又存在檢測時需使用大量外泌體和難以檢測到低表達(dá)水平的標(biāo)記蛋白。胸水外泌體tmt

突狀細(xì)胞釋放的外泌體可以強(qiáng)化殺傷性T細(xì)胞對癥狀細(xì)胞的特異性反應(yīng)。血清提取試劑盒價錢

研究采用蔗糖密度梯度離心聯(lián)合2次PEG6000沉淀,極大地降低了外泌體的提取成本,且獲得的外泌體不僅表達(dá)外泌體公認(rèn)的標(biāo)志蛋白分子,同時也表達(dá)胎盤特異性蛋白分子,證明通過這種方法獲得的外泌體是胎盤來源外泌體。通過蔗糖密度梯度離心后得到的外泌體沉淀經(jīng)蛋白質(zhì)SDS-PAGE膠電泳,銀染后可見各蛋白分子條帶清晰可見,動態(tài)光散射分析粒徑,結(jié)果顯示獲得的外泌體顆粒粒徑大部分分布于28-91nm之間,與文獻(xiàn)報道外泌體顆粒大小相一致。胎盤外泌體經(jīng)過PKH67熒光染料染色后,與細(xì)胞共孵育,熒光顯微鏡下觀察外泌體具備進(jìn)入細(xì)胞的活性,進(jìn)一步驗(yàn)證了我們應(yīng)用此種改良的分離方法可有效的獲得胎盤來源的外泌體。本研究通過蔗糖密度梯度離心聯(lián)合2次PEG6000沉淀成功分離得到母體血清中胎盤來源外泌體,并從蛋白標(biāo)志分子、電鏡、粒徑及分布、進(jìn)入細(xì)胞活性四方面對其進(jìn)行了鑒定,為研究妊娠期間胎盤外泌體在正常妊娠及胎盤源性并發(fā)癥中的作用奠定了基礎(chǔ)。血清提取試劑盒價錢

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