在Rameshwar等的研究中,采用轉(zhuǎn)染間充質(zhì)干細(xì)胞的方法,使外泌體載有anti-miR-9。在進(jìn)行間充質(zhì)細(xì)胞和多形性成角質(zhì)細(xì)胞瘤(GBM)細(xì)胞間anti-miR-9傳遞的實(shí)驗(yàn)時(shí),發(fā)現(xiàn)兩種細(xì)胞不僅可以通過(guò)縫隙連接介導(dǎo)的細(xì)胞間通訊(GJIC)也可以通過(guò)外泌體傳遞anti-miR-9。且anti-miR-9降低兩種GBM細(xì)胞(U87和T98G)對(duì)中流藥物替莫唑胺(TMZ)的抵抗能力的功能主要由外泌體傳遞的anti-miR-9實(shí)現(xiàn),而非經(jīng)GJIC傳遞的anti-miR-9,顯示出外泌體在運(yùn)載miRNA進(jìn)行基因zhiliao時(shí)的潛力。利用外泌體進(jìn)行GBM的zhiliao不只停留在體外細(xì)胞實(shí)驗(yàn)上,也已經(jīng)有相關(guān)的體內(nèi)zhiliao報(bào)道。外泌體介導(dǎo)的細(xì)胞間交流可以改變瘤的生長(zhǎng)、細(xì)胞遷移、抗病毒等生理過(guò)程。希諾神州外泌體
雖然外泌體在疾病的診斷上有天然優(yōu)勢(shì),但在臨床應(yīng)用上仍有一些限制:外泌體的提取方法金標(biāo)準(zhǔn)仍然是差速離心法,但這種方法費(fèi)時(shí)費(fèi)力且提取效率較低,難以進(jìn)行臨床推廣和應(yīng)用;而商業(yè)化的試劑盒質(zhì)量參差不齊,往往導(dǎo)致提取物雜質(zhì)過(guò)多,且其售價(jià)較高。外泌體的定量是采用顆粒濃度定量,蛋白濃度定量,亦或是核酸濃度定量,目前仍存有爭(zhēng)議。由于傳統(tǒng)的內(nèi)參并不適用于外泌體,在實(shí)時(shí)熒光定量PCR檢測(cè)靶分子含量時(shí)內(nèi)參的選擇尚沒(méi)有統(tǒng)一的標(biāo)準(zhǔn)。外泌體分子標(biāo)志物的研究還處于初級(jí)階段。目前外泌體研究的整個(gè)流程中成本都很高。外泌體 定性干細(xì)胞外泌體對(duì)多種類型的免疫細(xì)胞均具有免疫調(diào)節(jié)作用。
外泌體是新型治理劑,瘤轉(zhuǎn)移是一個(gè)包括病細(xì)胞侵入、血管中存活和殖民化等多步驟的復(fù)雜過(guò)程。外泌體能夠影響這個(gè)級(jí)聯(lián)反應(yīng)的每一步,因此可作為瘤治理的靶點(diǎn)。瘤細(xì)胞在轉(zhuǎn)移到其他組織時(shí)需要在間質(zhì)細(xì)胞間移動(dòng)并到達(dá)血管中,在這個(gè)過(guò)程中,瘤細(xì)胞外泌體通過(guò)纖維連接蛋白促進(jìn)瘤細(xì)胞的運(yùn)動(dòng)性,再通過(guò)蛋白酶促進(jìn)細(xì)胞外基質(zhì)的分解、血管生成,進(jìn)而促進(jìn)瘤轉(zhuǎn)移。多數(shù)瘤細(xì)胞對(duì)轉(zhuǎn)移的組織具有指向性,而外泌體表面的整合素就是決定其指向性的因子,如外泌體αvβ5整合素決定了對(duì)肝臟的指向性,而外泌體α6β4?α6β1整合素決定了對(duì)肺部的指向性。
液體活檢是一種非侵入性的血液檢測(cè)突破性技術(shù),能早期快速地檢測(cè)中流及其病灶或者轉(zhuǎn)移過(guò)程中釋放到血液中的循環(huán)中流細(xì)胞(circulatingtumorcell,CTC)、循環(huán)中流DNA(circulatingtumorDNA,ctDNA)和中流外泌體等中流組分。中流外泌體作為液體活檢的一個(gè)重要組成,基于其內(nèi)容物成分多樣和穩(wěn)定等優(yōu)勢(shì),正成為中流標(biāo)志物相關(guān)研究的熱點(diǎn)。中流來(lái)源納米大小的外泌體具有易通過(guò)血腦屏障、天然的歸巢特性、雙分子層脂質(zhì)結(jié)構(gòu)的穩(wěn)定性和高效的生物相容性等特征。因此,中流外泌體正成為中流靶向zhiliao理想的載體,尤其是工程化外泌體更表現(xiàn)出很好的中流靶向干預(yù)和增強(qiáng)藥物zhiliao的效果。外泌體可參與到機(jī)體免疫應(yīng)答、抗原提呈、細(xì)胞遷移、細(xì)胞分化等方方面面。
妊娠期間胎盤(pán)可釋放外泌體到全身循環(huán)系統(tǒng),參與妊娠期間母胎界面的免疫調(diào)節(jié)、子宮螺旋動(dòng)脈重塑和胎盤(pán)屏障的形成等重要事件調(diào)控,在正常妊娠過(guò)程維持中發(fā)揮重要作用。而很多妊娠并發(fā)癥,如子癇前期等胎盤(pán)功能紊亂相關(guān)疾病的發(fā)生,很可能與胎盤(pán)來(lái)源外泌體異常密切相關(guān)。目前外泌體分離方法主要包括:多步差速離心、蔗糖密度梯度離心、試劑盒沉淀、免疫磁珠分選、色譜法、過(guò)濾離心等方法。其中,多步差速離心是制備外泌體的經(jīng)典方法,該方法是根據(jù)外泌體的沉降系數(shù)差速離心將其分離出來(lái),然而妊娠期母血清中除含有胎盤(pán)組織釋放的外泌體,還包括許多其他種類細(xì)胞釋放的外泌體,如樹(shù)突狀細(xì)胞、淋巴細(xì)胞等,且血清中可能還存在一些大小類似的物質(zhì)混雜其中,這些因素都會(huì)影響胎盤(pán)來(lái)源外泌體的分離純化。外泌體作為腦內(nèi)種瘤和神經(jīng)退行性疾病的新型標(biāo)記物。希諾神州外泌體
外泌體能負(fù)載的治理物質(zhì)包括小分子化合物、蛋白質(zhì)、寡核苷酸等,且在體液中寬泛分布且具有定向歸巢能力。希諾神州外泌體
科學(xué)家也嘗試?yán)猛饷隗w的壓制發(fā)病機(jī)制功能。例如,類風(fēng)濕關(guān)節(jié)炎患者的滑膜成纖維細(xì)胞所釋放的外泌體,高濃度集聚誘導(dǎo)細(xì)胞死亡的TNF-α,可使類風(fēng)濕關(guān)節(jié)炎惡化。通過(guò)上述介紹可以知道癥狀細(xì)胞來(lái)源的外泌體含有與癥狀進(jìn)展相關(guān)的分子,神經(jīng)細(xì)胞來(lái)源的外泌體含有與神經(jīng)退行性疾病相關(guān)的分子,因此,通過(guò)壓制或去除這些外泌體,有希望壓制疾病發(fā)生。隨著今后的研究發(fā)展,外泌體功能逐步清晰,并擴(kuò)大臨床應(yīng)用,有望將外泌體應(yīng)用在各種疾病醫(yī)治上。甚至可嘗試?yán)猛饷隗w將siRNA和抗藥劑等運(yùn)輸?shù)侥繕?biāo)細(xì)胞中。希諾神州外泌體
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