結(jié)果表明,PS親和法可以檢測到許多目前為止都無法檢測的外泌體蛋白質(zhì)和RNA。應(yīng)用Tim4的外泌體強(qiáng)結(jié)合能力,可用ELISA或FACS高靈敏度定性檢測、定量分析外泌體。以前無法用超速離心法提取的微囊泡,也通過運(yùn)用PS親和法實(shí)現(xiàn)高純度提取。本指導(dǎo)書中對該技術(shù)進(jìn)行詳細(xì)說明,這項(xiàng)技術(shù)的有用性今后將受到世界各方評價(jià),有望在外泌體和微囊泡生理功能的分析研究上起重大貢獻(xiàn)。外泌體的檢測和提取還遇到一個(gè)困難即:對各種外泌體的分類。研究人員尚未統(tǒng)一定義以何種方法提取的細(xì)胞外囊泡可以稱之為外泌體,給實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)的分析和重復(fù)性確認(rèn)帶來困難。近年,隨著國際細(xì)胞外囊泡協(xié)會的成立、世界性研究者研討會的舉辦,提案MISEV指南作為國際標(biāo)準(zhǔn),計(jì)劃或已經(jīng)開始進(jìn)行EV研究的科學(xué)家請務(wù)必閱讀這些方針。隨著外泌體的功能逐漸被發(fā)現(xiàn),近年來,應(yīng)用這些功能的醫(yī)治法也在被開發(fā)出來。4980外泌體
中流細(xì)胞分泌的外泌體可以通過體液進(jìn)入特定qi官,建立有利于ai細(xì)胞生長的微環(huán)境,包括促進(jìn)受體細(xì)胞上皮細(xì)胞-間充質(zhì)轉(zhuǎn)化、引發(fā)炎癥、促進(jìn)血管生成,為ai細(xì)胞的擴(kuò)散形成有利條件。進(jìn)一步研究發(fā)現(xiàn)中流細(xì)胞外泌體能夠引導(dǎo)ai癥轉(zhuǎn)移至特定qi官,在膜表面特異性整合素的作用下,中流細(xì)胞外泌體首先在特定的qi官累積,引起受體qi官產(chǎn)生炎癥、生成血管,形成有利于中流轉(zhuǎn)移的微環(huán)境,使得中流細(xì)胞更容易轉(zhuǎn)移至該qi官。Maji等揭示了惡性中流細(xì)胞外泌體中的AnnexinⅡ蛋白能夠促進(jìn)血管生成,為中流轉(zhuǎn)移創(chuàng)造有利的微環(huán)境。腦脊液外泌體提取外泌體的異質(zhì)性可以根據(jù)其大小、含量(載物)、對受體細(xì)胞的功能影響以及細(xì)胞來源來區(qū)分。
在利用外泌體運(yùn)輸PTX進(jìn)行抗中流的研究中,由于間充質(zhì)干細(xì)胞可以歸巢(homing)至中流細(xì)胞微環(huán)境并且可以不通過基因操作即可對PTX運(yùn)輸,因此Pessina等采用間充質(zhì)干細(xì)胞SR4987作為分泌外泌體的母代細(xì)胞,而后將SR4987與PTX共混,使SR4987分泌的外泌體含有PTX,再利用超速離心法將載有PTX的外泌體分離出來,研究其對體外人胰腺ai細(xì)胞株的影響。結(jié)果表明外泌體可以有效的運(yùn)載PTX并不破壞其功能,小泡(主要指外泌體)溶液的蛋白質(zhì)濃度在0.047~0.095mg/mL之間時(shí)可以誘導(dǎo)中流細(xì)胞凋亡50%,這種抑制效果與純PTX對體外ai細(xì)胞的抑制效果相當(dāng)。
外泌體的組成較為復(fù)雜,其內(nèi)含有多種生物大分子,如:核酸(雙鏈DNA和各種RNA亞型)、蛋白質(zhì)和脂質(zhì)。這些分子被外泌體攜帶進(jìn)入血液循環(huán),而后被靶細(xì)胞吸收,從而調(diào)節(jié)靶細(xì)胞基因表達(dá)和細(xì)胞功能。此外,外泌體相關(guān)的miRNA作為短單鏈和非編碼RNA分子,調(diào)節(jié)致病基因或抑病基因的表達(dá),參與細(xì)胞分化、細(xì)胞凋亡及細(xì)胞信號的傳導(dǎo)。有研究表明,外泌體能影響種瘤微環(huán)境的形成、增強(qiáng)種瘤細(xì)胞的侵襲和轉(zhuǎn)移能力、介導(dǎo)種瘤免疫壓制及參與種瘤放化療抵抗進(jìn)而促進(jìn)種瘤的發(fā)展。外泌體介導(dǎo)的細(xì)胞間交流可以改變瘤的生長、細(xì)胞遷移、抗病毒等生理過程。
Pascucci等將包含有紫杉醇的間充質(zhì)細(xì)胞來源外泌體與胰腺ai細(xì)胞共培養(yǎng),發(fā)現(xiàn)裝載紫杉醇的間充質(zhì)細(xì)胞外泌體具有很強(qiáng)的抗中流增殖效果。Tian等為降低免疫原性與毒性,采用小鼠未成熟樹突狀細(xì)胞所產(chǎn)生外泌體作為藥物載體。同時(shí)為實(shí)現(xiàn)外泌體運(yùn)輸?shù)陌邢蛐?,使?xì)胞表達(dá)能夠識別乳腺ai細(xì)胞的外泌體膜蛋白Lamp2b(lysosomeasso[1]ciatedmembraneglycoprotein2b,溶酶體相關(guān)膜蛋白2)。并采用電穿孔的方法,在純化所得的小鼠未成熟樹突狀細(xì)胞外泌體中載入阿霉素。結(jié)果表明該外泌體能夠特異性的將阿霉素傳遞給中流組織,抑制中流生長且無明顯毒性。外泌體在體液中十分穩(wěn)定,同時(shí)外囊泡所含的蛋白質(zhì)和RNA被外泌體的脂質(zhì)雙層膜所包被也不會分解。海洋生物外泌體蛋白質(zhì)組學(xué)
外泌體可參與到機(jī)體免疫應(yīng)答、抗原提呈、細(xì)胞遷移、細(xì)胞分化等方方面面。4980外泌體
所有真核細(xì)胞類型包括造血細(xì)胞、上皮細(xì)胞、神經(jīng)細(xì)胞、干細(xì)胞、脂肪細(xì)胞和病癥細(xì)胞均可在培養(yǎng)條件下分泌外泌體。體內(nèi)所有體液,包括血液、唾液、腦脊液、腹水,甚至尿液中都可以分離得到外泌體。這些外泌體傳輸多種信號分子,包括蛋白質(zhì)、信使核糖核酸(mRNA)和非編碼核糖核酸(RNA),其攜帶的分子可以被其他細(xì)胞吸收。因此,外泌體可以將生物信息轉(zhuǎn)移到相鄰細(xì)胞。這種細(xì)胞間通信不只涉及生理功能,還涉及一些疾病的發(fā)病機(jī)理,包括瘤、心血管疾病和神經(jīng)退行性疾病等。4980外泌體
上海宇玫博生物科技有限公司擁有一般項(xiàng)目:技術(shù)服務(wù)、技術(shù)開發(fā)、技術(shù)咨詢、技術(shù)交流、技術(shù)轉(zhuǎn)讓、技術(shù)推廣;生物基材料技術(shù)研發(fā);生物基材料銷售;五金產(chǎn)品批發(fā);電子元器件批發(fā);計(jì)算機(jī)軟硬件及輔助設(shè)備批發(fā);工藝美術(shù)品及收藏品批發(fā)(象牙及其制品除外);化工產(chǎn)品銷售(不含許可類化工產(chǎn)品);實(shí)驗(yàn)分析儀器銷售;環(huán)境保護(hù)設(shè)備銷售;電力電子元器件銷售;電子產(chǎn)品銷售;機(jī)械設(shè)備銷售;儀器儀表銷售;辦公用品銷售;塑料制品銷售;橡膠制品銷售;勞動保護(hù)用品銷售。(除依法須經(jīng)批準(zhǔn)的項(xiàng)目外,憑營業(yè)執(zhí)照依法自主開展經(jīng)營活動)許可項(xiàng)目:貨物進(jìn)出口;技術(shù)進(jìn)出口。(依法須經(jīng)批準(zhǔn)的項(xiàng)目,經(jīng)相關(guān)部門批準(zhǔn)后方可開展經(jīng)營活動,具體經(jīng)營項(xiàng)目以相關(guān)部門批準(zhǔn)文件或許可證件為準(zhǔn))等多項(xiàng)業(yè)務(wù),主營業(yè)務(wù)涵蓋外泌體提取試劑盒,外泌體,外泌體檢測,外泌體提取。公司目前擁有專業(yè)的技術(shù)員工,為員工提供廣闊的發(fā)展平臺與成長空間,為客戶提供高質(zhì)的產(chǎn)品服務(wù),深受員工與客戶好評。上海宇玫博生物科技有限公司主營業(yè)務(wù)涵蓋外泌體提取試劑盒,外泌體,外泌體檢測,外泌體提取,堅(jiān)持“質(zhì)量保證、良好服務(wù)、顧客滿意”的質(zhì)量方針,贏得廣大客戶的支持和信賴。公司力求給客戶提供全數(shù)良好服務(wù),我們相信誠實(shí)正直、開拓進(jìn)取地為公司發(fā)展做正確的事情,將為公司和個(gè)人帶來共同的利益和進(jìn)步。經(jīng)過幾年的發(fā)展,已成為外泌體提取試劑盒,外泌體,外泌體檢測,外泌體提取行業(yè)出名企業(yè)。