全轉(zhuǎn)錄組測序的研究對象為特定細胞在某一功能狀態(tài)下所能轉(zhuǎn)錄出來的所有RNA，主要為mRNA和lncRNA、circRNA等非編碼RNA。外泌體中攜帶有來自母本細胞的多種蛋白質(zhì)、脂類、短鏈RNA和長鏈RNA等重要信息。對外泌體中的長鏈RNA進行全轉(zhuǎn)錄組測序及分析，不只能夠篩選外泌體攜帶的特異Biomarker，同時對深入了解疾病或不同發(fā)育階段的內(nèi)在機制也有重要意義。外泌體全轉(zhuǎn)錄組測序體系，充分結(jié)合了微量核酸建庫技術(shù)、NGS技術(shù)和全新的生物信息序列比對算法，可實現(xiàn)對1mL血漿中的外泌體即可進行mRNA、lncRNA和circRNA等RNAs充分測序，獲取周全的外泌體轉(zhuǎn)錄組信息。外泌體膜可以與靶細胞膜直接融合，非選擇性的釋放其所含的蛋白質(zhì)、mRNA以及microRNA。研究所外泌體提取試劑盒應用

肉瘤細胞可以通過產(chǎn)生異常的抗肉瘤或肉瘤免疫應答并促進瘤子細胞的活動而大量產(chǎn)生外泌體，這些外泌體富含促病的細胞成分，例如PD-L1、mRNA和micro-RNA等免疫阻止蛋白，參與病癥的發(fā)展、轉(zhuǎn)移和耐藥性。值得注意的是，肉瘤分泌的外泌體表面和外泌體顆粒中均存在的PD-L1。ESCRT（運輸所需的內(nèi)體分選復合體）參與將生物分子包裝到外泌體中，nSMase2（中性鞘磷脂酶2）和Rab蛋白調(diào)節(jié)外泌體分泌。已確定ESCRT、Rab27a和nSMase2參與外泌體PD-L1的包裝和分泌。外泌體可以將PD-L1轉(zhuǎn)運至其他PD-L1表達低或沒有PD-L1的細胞，并可能與PD-1結(jié)合。超速離心提取外泌體的過程外泌體產(chǎn)生于細胞中的多泡體。

外泌體遞送藥物的優(yōu)勢：許多新的候選藥物（例如蛋白質(zhì)和核酸）在體內(nèi)環(huán)境中高度不穩(wěn)定，對診療結(jié)果的效果提出了重大挑戰(zhàn)。鑒于與許多當前的納米微粒遞送系統(tǒng)相關(guān)的問題，外泌體作為“自然的遞送系統(tǒng)”允許遞送這些生物分子。由于外泌體體積小和其本身就是細胞產(chǎn)物，通過外泌體遞送藥物可以避免巨噬細胞的吞噬作用或降解，還可以在體內(nèi)長時間循環(huán)，保持效果。其中，外泌體能夠穿過血腦屏障以將特定藥物輸送到中樞的神經(jīng)系統(tǒng)是外泌體遞送藥物的一個明顯優(yōu)勢。外泌體膜中有跨膜蛋白PGRL、LAMP1、LAMP2。

質(zhì)膜的連續(xù)內(nèi)陷較終導致多泡體的形成，多泡體可與細胞內(nèi)的其他囊泡和細胞器交叉，從而增加了外泌體成分的多樣性。根據(jù)細胞來源的不同，細胞外囊泡，包括外泌體，可以包含細胞的許多成分，包括DNA、RNA、脂質(zhì)、代謝物、胞質(zhì)和細胞表面蛋白。目前產(chǎn)生外泌體的生理目的尚不清楚，需要進一步研究。一個推測的作用是外泌體可能從細胞中去除多余和/或不必要的成分以維持細胞內(nèi)環(huán)境的穩(wěn)定。近來的研究也表明外泌體中特定細胞成分的功能、靶向、機制驅(qū)動的積累，提示它們在調(diào)節(jié)細胞間通訊中發(fā)揮作用。外泌體是指包含了復雜RNA和蛋白質(zhì)的小膜泡(30-150nm)。

流式細胞技術(shù)是細胞和小顆粒定性和定量表征的有效方法，其用于外泌體定量檢測的準確性也在不斷上升。將外泌體表面特異性標志物CD63、CD81等相應抗體進行標記，可用流式細胞儀檢測到陽性表達，從而實現(xiàn)對外泌體的定量。但流式細胞技術(shù)檢測時需要單顆粒懸浮液，當外泌體濃度高或分離過程中發(fā)生外泌體囊泡聚集時將導致一次觀察到多個顆粒，從而導致數(shù)據(jù)不準確。因此，為了通過流式細胞儀觀察，需要將外泌體通過免疫捕獲或共價結(jié)合固定在磁珠表面上，從而便于將外泌體囊泡暴露于已知或者預期在外泌體表面表達的抗原的熒光偶聯(lián)抗體中。在流式細胞術(shù)之前，可以在落射熒光顯微鏡（EPI）下觀察與磁珠和熒光抗體偶聯(lián)的外泌體囊泡。當樣品通過流式細胞儀時采集熒光信號，不只可以對外泌體進行高通量分析，還可以基于抗原表達對外泌體進行定量或分類。外泌體可以將PD-L1轉(zhuǎn)運至其他PD-L1表達低或沒有PD-L1的細胞，并可能與PD-1結(jié)合。腹水提取試劑盒產(chǎn)品標準

外泌體膜中有跨膜蛋白PGRL、LAMP1、LAMP2。研究所外泌體提取試劑盒應用

被特定部位的細胞獲取的瘤子外泌體可為肉瘤的轉(zhuǎn)移準備轉(zhuǎn)移前微環(huán)境。用肺轉(zhuǎn)傾向的肉瘤細胞來源的外泌體處理小鼠后可使骨轉(zhuǎn)傾向的肉瘤細胞重新定向。外泌體的蛋白質(zhì)組學分析發(fā)現(xiàn)不同部位傾向性的肉瘤細胞來源的外泌體具有不同的整合素（integrin）表達譜，整合素α6β4和α6β1與肺轉(zhuǎn)有關(guān)，而整合素αvβ5與肝轉(zhuǎn)有關(guān)。敲低整合素α6β4和αvβ5可減少外泌體被靶部位細胞獲取，進而分別降低了肺和肝的轉(zhuǎn)移。進一步研究發(fā)現(xiàn)外泌體整合素被細胞獲取后活躍了Src的磷酸化和促炎的S100基因的表達。通過臨床數(shù)據(jù)分析顯示外泌體整合素可作為預測肉瘤轉(zhuǎn)移的部位傾向性的診斷指標。研究所外泌體提取試劑盒應用

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