HE染色石蠟和冰凍切片樣本的處理，樣品處理：a.對于石蠟切片:二甲苯中脫蠟5-10分鐘;換用新鮮的二甲苯，再脫蠟5-10分鐘;無水乙醇5分鐘;90%乙醇2分;70%乙醇2分鐘;蒸餾水2分鐘.b.對于冰凍切片：蒸餾水2分鐘。c對于培養(yǎng)細胞：用4%多聚甲醛固定10分鐘以上。蒸餾水洗滌2分鐘。換用新鮮的蒸餾水，再洗滌2分鐘。蘇木素伊紅(HE)染色對于上述處理好的樣品：蘇木素染色液染色5-10分鐘(可以根據(jù)染色結果和要求調整時間)。浸自來水中沖洗去多余的染色液，約10分鐘。蒸餾水再洗滌一遍(數(shù)秒鐘)。95%乙醇5秒。伊紅染色液染色30秒-2分鐘(可以根據(jù)染色結果和要求調整時間)。此時，如果需要直接觀察，可以用70%乙醇洗滌2次。如需脫水、透明后封片按后續(xù)步驟進行，70%乙醇洗滌后仍可按照后續(xù)步驟進行脫水、透明和封片處理。比較常見的病理染色HE染色？河北性價比高的HE染色檢測

HE染色全名為蘇木精和伊紅染色方法，是**基本的病理學染色技術。由于組織或細胞的不同成分對蘇木精的親和力不同及染色性質不一樣。經(jīng)蘇木精染色后，細胞核及鈣鹽粘液等呈藍色，可用鹽酸酒精分化和弱堿性溶液顯藍，如處理適宜，可使細胞核著清楚的深藍色，胞漿等其它成分脫色。再利用胞漿染料伊紅染胞漿，使胞漿的各種不同成分又呈現(xiàn)出深淺不同的粉紅色。故各種組織或細胞成分與病變的一般形態(tài)結構特點均可顯示出來。質量好的HE具備條件1.細胞核與細胞漿藍紅相映，鮮艷亮麗；2.胞核鮮明、核膜、核染色質顆粒均清晰可見；3.組織或一般結構特點及假物質成分均能顯示出來。山東性價比高的HE染色外包HE染色，優(yōu)先南京英瀚斯生物。

HE染色伊紅溶液中加入少量的冰醋酸(一般小于10%就行)，可改變組織等電點，促進伊紅與胞漿蛋白質結合，其本身不參與染色的反應。當蘇木素染色效能極高，很短時間就導致核漿共染時，可適當?shù)靥砑颖姿?一般不超過2%)，抑制蘇木素染色效能，方便控制染色時間，同時也能提高蘇木素染色的清晰度?，F(xiàn)在有商用的HE染色液賣，但是質量參差不齊。如果課題組較大，完全可以自己配制，效果也挺好。配制為乙酸濃度5%-7.5%和鹽酸濃度為0.5%-1%的蘇木素溶液放置一周，即可完全成熟，染色效果好，氧化膜和結晶都很少(一般蘇木素中酸度越低越容易產(chǎn)生氧化膜和結晶，這也是提示更換蘇木素的標志之一)。

HE染色實驗步驟：（1）樣品制備：對于貼壁生長細胞，胰酶消化，調整細胞濃度約1×105/ml，滴加于蓋玻片上(置于6孔板中)，培養(yǎng)相應時間后，取出細胞爬片，用PBS洗滌3次。（2）樣品固定：95%乙醇固定20min，PBS洗滌2次，每次1min。（3）染核：蘇木素染液染色2-3min，自來水洗滌。（4）分色：鏡下觀察，若細胞核染色過深，用1%鹽酸酒精溶液分色數(shù)秒，自來水洗滌。（5）染胞質：浸入伊紅染液染色1min，自來水洗滌。（6）吹干或自然晾干細胞爬片后，中性樹膠封片。若細胞用4%多聚甲醛固定，則染色時間相應延長，蘇木素染色12-15min，伊紅5min即可冰凍切片是否可以做HE染色？

HE染色常見問題：成片的染色模糊不清，灰染答：（1）組織未及時固定，部分自溶；或固定不佳，深部組織未處理到。這種只能重新固定了。（2）盡管乙醇也是一種固定液，但盡量少用或不用，因為其會導致組織發(fā)硬變脆，染色效果不好。（3）包埋時蠟的溫度過高，或切片后烤片時間和溫度過久過高都不好，可能會導致無法染色。（4）脫蠟不徹底；染料有問題；分化過度導致的顏色變淡，鏡下組織界限不清；染完后的脫水和透明不佳，水霧殘留在組織上。（5）通風窗中（防止空氣中的水霧），戴口罩操作封片（減少哈氣帶來的水霧）。關于HE染色，你不知道的實驗技巧。陜西性價比高的HE染色價格

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HE染色樣本組織固定與切片：首先將組織樣本進行常規(guī)的石蠟包埋。在模具中加入液態(tài)石蠟，將待包埋的組織樣本放入石蠟中，確保組織位置規(guī)整。補充少許液態(tài)的石蠟后，進行降溫冷凍，使石蠟變?yōu)楣虘B(tài)達到組織固定的效果，然后使用石蠟切片機進行切片，厚度在４-８um左右。將切完后的組織切片放入載玻片上使用40℃溫水浸泡使組織充分伸展。組織樣本脫蠟：將待測組織樣本切片放于二甲苯中，充分浸泡10min，浸泡完后更換二甲苯繼續(xù)浸泡10min，目的是使用二甲苯將切片中的石蠟溶解，這樣可以在進行染液染色的時候，染液可以充分進入組織種，同時，二甲苯還可以起到透明的作用，使切片更容易觀察。河北性價比高的HE染色檢測