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病理實驗外包,染色常見染色介紹天狼星紅染色:主要由天狼星紅染色液、Mayer蘇木素染色液組成,主要用于各種組織病變時對膠原纖維異?;蚶w維增生的研究中,在普通光學顯微鏡下心臟血管等組織的膠原纖維被染成紅色,在偏振光鏡下對各種纖維化病變的分型和分級研究有一定的幫助作用。采用免疫組化技術也可顯示Ⅰ、Ⅲ型膠原纖維,但所用抗體昂貴,操作費時,而采用天狼星紅染色試劑便宜,操作簡單。天狼星紅染色液操作步驟1、組織固定于10%福爾馬林固定液,常規(guī)脫水包埋。2、切片厚6μm,常規(guī)脫蠟至水。3、天狼星紅染色液滴染1h。4、流水稍沖洗,去除切片表面染液。5、Mayer蘇木素染色液染細胞核8~10min。6、流水沖洗10min。7、常規(guī)脫水透明,中性樹膠封固。天狼星紅染色可用作肝纖維化以及腎纖維化模型的定性與膠原纖維沉積的半定量分析。南京英瀚斯,專業(yè)的病理染色實驗服務平臺。南京病理實驗外包檢測,優(yōu)先南京英瀚斯。青海生物病理實驗外包服務
病理實驗外包,病理染色常見染色介紹TUNEL染色:基因組DNA斷裂時,暴露的3’-OH可以在末端脫氧核苷酸轉移酶(TerminalDeoxynucleotidylTransferase,TdT)的催化下加上熒光素(FITC)標記的dUTP(fluorescein-dUTP),從而可以通過熒光顯微鏡或流式細胞儀進行檢測,這就是TUNEL(TdT-mediateddUTPNick-EndLabeling)法檢測細胞凋亡的原理。實驗步驟使細胞或組織貼在載玻片上?固定?洗滌?通透?洗滌?預平衡?用熒光素12-dUTP標記斷裂的DNA鏈?終止反應?洗滌?封片?分析樣品南京英瀚斯,專業(yè)的病理染色實驗服務平臺。推薦的病理實驗外包哪家好病理實驗外包所需樣本如何保存。
病理實驗外包,病理染色多聚甲醛保存組織的注意事項:多聚甲醛放置過久其中的醛基可能會被氧化為酸,使溶液pH降低,從而影響染色。不同細胞或組織樣品所需的固定時間有所不同,應當根據(jù)細胞或組織的種類以及組織塊的大小來調(diào)整固定時間。多聚甲醛雖然作用溫和,但能硬化組織,固定時間過久會導致組織變脆,切片時易碎。因此固定時間通常不宜超過24小時。多聚甲醛可長期存在于固定過的細胞或組織樣品中,固定完成后用適當?shù)南礈煲夯蛩疀_洗數(shù)小時仍會有殘留,因此后續(xù)實驗結果如果受醛基影響,須盡量洗去殘留的多聚甲醛。醛基與抗原蛋白的氨基交聯(lián)形成羧甲基,使抗原決定簇的三維構象出現(xiàn)空間障礙。分子間交聯(lián)形成的網(wǎng)格結構可能部分或完全掩蓋某些抗原決定簇,使之不能充分暴露,可造成假陰性的染色,影響免疫組化結果。因此,4%多聚甲醛固定的細胞或組織樣品在進行免疫組化檢測時,有時需要對抗原先進行修復,然后才能進行免疫染色等后續(xù)操作。
病理實驗外包,染色包埋的知識:知識點1:包埋的概念組織經(jīng)過固定、脫水、透明和浸蠟等過程后,用包埋劑(石蠟、火棉膠、樹脂等)將組織塊包埋成塊,使得組織和包埋劑相熔一體并迅速冷卻,這個程序稱為包埋。知識點2:組織石蠟包埋法石蠟包埋法是制作光學顯微鏡切片的常規(guī)方法,包埋后的組織可以長期保存。包埋的方法有包埋機包埋和手工包埋兩種。知識點3:體液石蠟包埋法痰液、胃液、尿液、胸腔積液、腹水等可以行石蠟包埋。痰液應當選用含血液的部分或較為可疑的實體部分,滴上伊紅后用皺紋紙包好,然后用10%的中性甲醛固定,再經(jīng)常規(guī)脫水,透明、浸蠟并包埋。新鮮的胃液、尿液、胸腔積液、腹水等體液標本,倒去上層的澄清液體,將渾濁的液體放入離心管中,以轉速2000-3000轉每分鐘離心15分鐘,倒去上清液后,用10%中性甲醛固定沉淀物,然后進行脫水透明、浸蠟、包埋。病理實驗外包,科研實驗好幫手。
病理實驗外包,病理染色方法分為石蠟切片法和冰凍切片兩種,詳細的實驗方法如下:石蠟切片法實驗方法及原理:石蠟切片是比較基本的切片技術,冰凍切片和超薄切片等都是在石蠟切片基礎上發(fā)展起來的。蘇木素與伊紅對比染色法(簡稱H.E.對染法)是組織切片比較常用的染色方法。這種方法適用范圍普遍,對組織細胞的各種成分都可著色,便于普遍觀察組織構造,而且適用于各種固定液固定的材料,染色后不易褪色可長期保存。冰凍切片試驗方法及原理:冰凍切片是指將組織在冷凍狀態(tài)下直接用切片機切片。它實際上是以水為包埋劑,將組織進行冰凍至堅硬后切片的。在冰凍切片前組織不經(jīng)過任何化學藥品處理或加熱過程,明顯縮短了制片時間。同時,由于此法不需要經(jīng)過脫水、透明和浸蠟等步驟,因而較適合于脂肪、神經(jīng)組織和一些組織化學的制片,并作為快速切片的方法應用在臨床診斷。病理實驗外包檢測服務介紹,醫(yī)學造模以及評價。江蘇生物病理實驗外包哪家靠譜
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病理實驗外包,病理染色冰凍切片介紹;冰凍切片是指將組織在冷凍狀態(tài)下直接用切片機切片。它實際上是以水為包埋劑,將組織進行冰凍至堅硬后切片的。在冰凍切片前組織不經(jīng)過任何化學藥品處理或加熱過程,明顯縮短了制片時間。同時,由于此法不需要經(jīng)過脫水、透明和浸蠟等步驟,因而較適合于脂肪、神經(jīng)組織和一些組織化學的制片,并作為快速切片的方法應用在臨床診斷。一、取材應盡可能快地采取新鮮的材料,防止組織發(fā)生死后變化。二、速凍1.將組織塊平放于軟塑瓶蓋或特制小盒內(nèi)(直徑約2cm)。2.如組織塊小可適量加OCT包埋劑浸沒組織,然后將特制小盒緩緩平放入盛有液氮的小杯內(nèi)。3.當盒底部接觸液氮時即開始氣化沸騰,此時小盒保持原位切勿浸入液氮中,大約10~20s組織即迅速冰結成塊。4在制成凍塊后,即可置入恒冷箱切片機冰凍切片。5.若需要保存,應快速以鋁箔或塑料薄膜封包,立即置入-80℃冰箱貯存?zhèn)溆?。南京英瀚斯,專業(yè)的病理染色實驗服務平臺。青海生物病理實驗外包服務
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