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江蘇嘉安健達二代測序應用

來源: 發(fā)布時間:2024-12-23

二代測序—全外顯子測序的局限性

不能檢測所有的遺傳變異:它只能檢測外顯子區(qū)域的變異,對于非外顯子區(qū)域(如內(nèi)含子、基因間區(qū)域)的變異無法檢測,而這些區(qū)域的某些變異也可能對基因的表達和功能產(chǎn)生重要影響,如內(nèi)含子中的突變可能影響基因的剪接。

數(shù)據(jù)分析復雜:全外顯子測序會產(chǎn)生大量的數(shù)據(jù),需要復雜的生物信息學工具和方法來進行數(shù)據(jù)分析。包括數(shù)據(jù)的質(zhì)量控制、變異的檢測和注釋、致病性的評估等多個環(huán)節(jié),其中任何一個環(huán)節(jié)出現(xiàn)問題都可能導致錯誤的結論。 二代測序又可以稱之為什么?江蘇嘉安健達二代測序應用

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①二代測序一般多久出結果?

二代測序(Next-GenerationSequencing,NGS)出結果的時間會受到多種因素的影響,一般在數(shù)天到數(shù)周不等。

1、樣本類型和質(zhì)量

不同的樣本類型處理時間不同。例如,血液樣本相對容易處理,提取DNA的過程比較常規(guī)。如果是組織樣本,可能需要先進行樣本的解離等復雜操作。如果樣本質(zhì)量高,DNA提取和文庫構建等前期工作會比較順利,能加快整體進程。但如果樣本量少或者DNA有降解等質(zhì)量問題,可能需要重新提取樣本或者進行DNA修復等操作,這會**延長時間。例如,對于新鮮血液樣本,DNA提取可能在1-2天內(nèi)完成;而對于一些福爾馬林固定石蠟包埋(FFPE)組織樣本,可能需要3-5天來完成高質(zhì)量DNA的提取和后續(xù)的優(yōu)化處理。


山西二代測序分析二代測序常用于產(chǎn)前的檢測或診斷。

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二代測序的建庫步驟⑥

六、文庫質(zhì)量檢測

定量檢測:使用熒光定量PCR(qPCR)或其他核酸定量方法(如Qubit)來確定文庫的濃度。Qubit是一種基于熒光染料與核酸特異性結合的定量方法,它可以準確地測量DNA或RNA的濃度,并且對不同大小的核酸片段有較好的定量準確性。通過定量檢測,可以了解文庫的產(chǎn)量,為后續(xù)的測序上樣量提供參考。

片段大小檢測:利用瓊脂糖凝膠電泳或生物分析儀(如Agilent2100Bioanalyzer)來檢測文庫片段大小。瓊脂糖凝膠電泳是一種傳統(tǒng)的方法,通過將文庫樣品在瓊脂糖凝膠中進行電泳,根據(jù)DNA片段在電場中的遷移速度來判斷片段大小。生物分析儀則可以提供更精確的片段大小分布和濃度信息,它是基于微流體芯片技術,能夠快速、準確地分析文庫質(zhì)量。

關于二代測序的簡介:

二代測序技術(Next-Generation Seguencing,NGS)也稱為高通量測序技術,是一種能夠同時對數(shù)百萬甚至數(shù)十億個 DNA片段進行測序的方法。與傳統(tǒng)的桑格測序相比二代測序技術具有高通量、高準確性、高靈敏度和低成本等優(yōu)勢。

二代測序技術在大幅提高了測序速度的同時,大幅度的降低了測序成本,保持了高準確性,以前完成一個人類基因組的測序需要3年時間,而使用二代測序技術則需要1周,但其序列讀長方面比起一代測序技術則要短很多,大多只100bp-150bp。


二代測序是2005年以后開始的嗎?

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二代測序技術的一些***研究進展②

植物基因組學研究領域 :

花生四倍體野生種基因組測序:河南農(nóng)業(yè)大學殷冬梅教授團隊和上海交通大學韋朝春教授團隊聯(lián)合發(fā)布了花生四倍體野生種近乎完整基因組 amon2.0 版本。該研究結合 ONT 超長讀段、二代測序和 Hi-C 等多種測序技術,使基因組的連續(xù)性、完整性和準確性都得到了顯著提高,為花生的遺傳馴化和分子育種提供了重要的基因組數(shù)據(jù)信息資源。

長雄野生稻基因組解析:中科院昆明動物所王文研究組與云南省農(nóng)科院糧食作物研究所胡鳳益研究組等中外機構合作,利用二代測序技術成功組裝出高質(zhì)量的長雄野生稻基因組,并對其與近緣物種的分歧時間、基因的收縮擴張等進行了分析,還鑒定出一批可能影響地下莖以及自交不親和性狀的候選基因及代謝途徑,為解析相關分子機制提供了重要線索。 二代測序與Sanger測序相同嗎?山西嘉安健達二代測序運用

二代測序的原理是什么?江蘇嘉安健達二代測序應用

二代測序的應用領域有哪些?

基因組學研究:用于全基因組測序,快速獲取物種的基因組序列信息,研究基因組結構、變異、進化等;進行全外顯子組測序,重點關注編碼蛋白質(zhì)的外顯子區(qū)域,發(fā)現(xiàn)與疾病相關的基因突變。

轉(zhuǎn)錄組學研究:通過對轉(zhuǎn)錄組進行測序,可分析基因的表達水平、可變剪接、新轉(zhuǎn)錄本發(fā)現(xiàn)等,有助于深入了解基因在不同生理和病理狀態(tài)下的表達調(diào)控機制。

疾病診斷與***:在遺傳病診斷中,能夠檢測出導致遺傳病的基因突變,為疾病的診斷、遺傳咨詢和產(chǎn)前診斷提供依據(jù);在**研究中,可分析腫瘤細胞的基因突變、拷貝數(shù)變異、基因融合等,為**的早期診斷、靶向***和預后評估提供支持。

藥物研發(fā):用于藥物靶點的發(fā)現(xiàn)和驗證,通過分析疾病相關的基因變異和表達變化,確定潛在的藥物作用靶點;還可進行藥物基因組學研究,預測患者對藥物的反應和不良反應,實現(xiàn)個體化藥物***。

微生物學研究:對微生物群落進行宏基因組測序,無需培養(yǎng)即可分析微生物的種類、豐度和功能基因,了解微生物群落的結構和動態(tài)變化,研究微生物與宿主的相互作用,以及在環(huán)境科學、農(nóng)業(yè)、醫(yī)學等領域的應用


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