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耐用DTO-40工廠店

作者:[195p4r] 發(fā)布時間:[2024-06-07 23:10:04]

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“功能等同物”還包含根據(jù)本發(fā)明的多肽的“片段”,例如單個結(jié)構(gòu)域或序列基序,或n末端和/或c末端截短的形式,其可以顯示或可以不顯示期望的生物學(xué)功能。優(yōu)選地,這樣的“片段”至少定性地保持期望的生物學(xué)功能。中具有至少一個另外的功能不同的異源序列。這些異源序列的非限制性例子是例如信號肽、組氨酸錨或酶。根據(jù)本發(fā)明還包括的“功能等同物”是與具體公開的多肽的同源物。2444-2448的算法計算。根據(jù)本發(fā)明的同源多肽的以百分比表示的同源性或同一性尤其是指基于本文具體描述的氨基酸序列之一的總長度,以氨基酸殘基的百分比表示的同一性?;蛲ㄟ^應(yīng)用本文下面詳述的clustal設(shè)置來確定。

尾,其參與了mrna向翻譯位點例如細胞質(zhì)的轉(zhuǎn)運。術(shù)語“引物”是指短的序列,其被雜交到模板序列并且被用于與該模板互補的序列的聚合。

用于確定氨基酸或序列同一性百分比的比對可以使用計算機程序以及例如在互聯(lián)網(wǎng)上可公開獲得的計算機程序以多種方式實現(xiàn)。來獲得蛋白或序列的佳比對并計算序列同一性的百分比??梢砸砸阎绞酵ㄟ^化學(xué)合成從核苷酸結(jié)構(gòu)單元產(chǎn)生,例如通過雙螺旋的各個重疊的互補結(jié)構(gòu)單元的片段縮合來實現(xiàn)。本發(fā)明進一步涉及與具體描述的核苷酸序列或其區(qū)段互補的分子。根據(jù)本發(fā)明的核苷酸序列使得可以產(chǎn)生可用于鑒定和/或克隆其他細胞類型和生物體中的同源序列的探針和引物。與根據(jù)本發(fā)明的序列的有義鏈或相應(yīng)的反義鏈的至少約12個,優(yōu)選至少約25個,例如約50或75個連續(xù)核苷酸雜交的核苷酸序列區(qū)域。

另外,包含所公開的序列之一或其片段的分子可以使用基于該序列構(gòu)建的寡核苷酸引物,通過聚合酶鏈反應(yīng)來分離。以此方式擴增的可以克隆到合適的載體中,并可以通過dna測序來表征。根據(jù)本發(fā)明的寡核苷酸也可以通過標準的合成方法,例如使用自動dna合成儀制備。根據(jù)本發(fā)明的序列或其衍生物,這些序列的同源物或部分可以例如通過常規(guī)的雜交技術(shù)或pcr技術(shù)從其他細菌中,例如通過組或cdna文庫分離出來。這些dna序列在標準條件下與根據(jù)本發(fā)明的序列雜交?!半s交”是指多核苷酸或寡核苷酸在標準條件下結(jié)合幾乎互補的序列的能力,而在這些條件下非互補配對者之間不發(fā)生非特異性結(jié)合。

如本文所用,術(shù)語“雜交或在一定條件下雜交”旨在描述雜交和洗滌的條件,在所述條件下彼此顯著相同或同源的核苷酸序列保持彼此結(jié)合。本文提供了低嚴格度、中等和高嚴格度雜交條件的定義。如本文所用,所限定的低嚴格度條件如下。g/ml變性鮭魚精子dna的溶液中于40℃預(yù)處理6小時。硫酸葡聚糖,并使用5-20x106 32p標記的探針。將濾膜吸干并進行放射自顯影。如本文所用,所限定的中等嚴格度條件如下。g/ml變性鮭魚精子dna的溶液中于50℃預(yù)處理7小時。如本文所用,所限定的高嚴格度條件如下。g/ml變性鮭魚精子dna組成的緩沖液中于65℃下預(yù)雜交8小時至過夜。g/ml變性鮭魚精子dna和5-20x106 cpm 32p標記探針的預(yù)雜交混合物中,將濾膜在65℃下雜交48小時。

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